公开(公告)号：CN104697831A

公开(公告)日：2015-06-10

申请号：CN201510083007.9

申请日：2015-02-16

申请人： 同济大学

发明人： 邢美燕 ,  徐婷 ,  王寅 ,  卞方杰 ,  潘赛 ,  孙文 ,  杨健 ,  吴敏 ,  王亚宜

IPC分类号： G01N1/28

摘要： 本发明提供了一种生物膜蛋白质的提取方法和电泳样品的制备方法，提取方法包括以下步骤：对生物膜样品进行预处理以得到沉淀物；将该沉淀物与裂解液和苯甲基磺酰氟溶液混合，在冰浴条件下超声裂解，得到样品裂解液；震荡并离心样品裂解液，取上清液并采用TCA-丙酮沉淀法对其进行处理，得到蛋白质样品；制备方法包括以下步骤：使用溶解液溶解蛋白质样品，依次进行超声、涡旋振荡和离心，取上清液得到电泳样品；本发明的方法采用了含有多种去垢剂的裂解液并结合冰浴超声对微生物细胞进行破壁，同时采用TCA-丙酮沉淀法提纯蛋白质，不仅能有效地提取生物膜样品中的全蛋白，还能降低腐殖质对蛋白质的掩蔽作用，使电泳的分析结果清晰。

公开(公告)号：CN104697831B

公开(公告)日：2018-04-13

申请号：CN201510083007.9

申请日：2015-02-16

申请人： 同济大学

发明人： 邢美燕 ,  徐婷 ,  王寅 ,  卞方杰 ,  潘赛 ,  孙文 ,  杨健 ,  吴敏 ,  王亚宜

IPC分类号： G01N1/28

摘要： 本发明提供了一种生物膜蛋白质的提取方法和电泳样品的制备方法，提取方法包括以下步骤：对生物膜样品进行预处理以得到沉淀物；将该沉淀物与裂解液和苯甲基磺酰氟溶液混合，在冰浴条件下超声裂解，得到样品裂解液；震荡并离心样品裂解液，取上清液并采用TCA‑丙酮沉淀法对其进行处理，得到蛋白质样品；制备方法包括以下步骤：使用溶解液溶解蛋白质样品，依次进行超声、涡旋振荡和离心，取上清液得到电泳样品；本发明的方法采用了含有多种去垢剂的裂解液并结合冰浴超声对微生物细胞进行破壁，同时采用TCA‑丙酮沉淀法提纯蛋白质，不仅能有效地提取生物膜样品中的全蛋白，还能降低腐殖质对蛋白质的掩蔽作用，使电泳的分析结果清晰。