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公开(公告)号：CN110283835A
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201910551575.5
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA-T1142A-C4334A及构建方法，所述的突变基因ISA-T1142A-C4334A以3型鸭甲肝病毒强毒株基因组第1142位核苷酸由T突变为A，从而使病毒VP0蛋白的第164位氨基酸由亲本株的酪氨酸突变为天冬酰胺；第4334位核苷酸由C突变为A，从而使病毒2C蛋白的第71位氨基酸由亲本株的亮氨酸突变为异亮氨酸。3型鸭甲肝病毒突变基因ISA-T1142A-C4334A突变株是一株理想的疫苗候选株；还可用于3型鸭甲肝病毒致弱分子机理等基础研究中，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN110283834B
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN201910551569.X
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/41 , C12N7/01 , A61K39/125 , A61P31/14 , A61P1/16
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑A117C及构建方法，该突变基因基因组的第3403位核苷酸的G突变为T，作为感染性克隆的遗传标记，可用来区分拯救株与亲本株以及野毒株；5'UTR的第117核苷酸由A突变为C。该突变基因病毒株与亲本株具有相同的抗原性，而在鸭胚上比亲本株具有更高的增殖效率和病毒滴度且能够在鸡胚上增殖，免疫原性和遗传稳定性良好。突变基因病毒株对雏鸭致病力已明显下降，能够在雏鸭体内复制但对雏鸭不致病，这为该病毒致病机制及疫苗研制奠定了重要基础。综上所述，3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑A117C病毒株可作为一株疫苗候选或培育毒株并可用于3型鸭甲肝病毒宿主嗜性与致弱机理研究，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN110684781B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201910551112.9
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑A117C‑T1142A及构建方法，所述的突变基因ISA‑A117C‑T1142A以3型鸭甲肝病毒强毒株基因组5'UTR的第117核苷酸由A突变为C；第1142位核苷酸由T突变为A，从而使病毒VP0蛋白的第164位氨基酸由亲本株的酪氨酸突变为天冬酰胺。该突变基因病毒株与亲本株具有相同的抗原性，而在鸭胚上比亲本株具有更高的增殖效率和病毒滴度且能够在鸡胚上增殖，免疫原性和遗传稳定性良好。突变基因病毒株对雏鸭致病力已明显下降，突变基因病毒株能够在雏鸭体内复制但对雏鸭不致病，这为该病毒致病机制及疫苗研制奠定了重要基础。综上所述，3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑A117C‑T1142A病毒株是一株理想的疫苗候选株并可用于3型鸭甲肝病毒宿主嗜性与致弱机理研究，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN110484546B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201910551576.X
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/41 , C12N15/85 , C12N5/10 , A61K39/125 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑C4334A及构建方法，该突变基因以3型鸭甲肝病毒强毒株基因组的第4334位核苷酸由C突变为A，从而使其2C蛋白的第71位氨基酸由亮氨酸(CTC)突变为异亮氨酸(ATC)。突变基因病毒株与亲本株基因具有相同的抗原性，而在鸭胚上具有比亲本株更高的增殖效率和病毒滴度，免疫原性和遗传稳定性良好；突变基因病毒株对雏鸭致病力已明显下降，这为该病毒致病机制及疫苗研制奠定了重要基础。综上所述，3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑C4334A病毒株可作为一株疫苗候选株或培育毒株；同时，为鸭肝炎病毒毒力致弱的分子机理研究提供了基础材料，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN110295148A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910551110.X
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明涉及一种快速构建3型鸭甲肝病毒反向遗传株的方法。将3型鸭甲肝病毒全基因组分为大小相近的三个片段进行PCR扩增，第一个片段的5'端添加巨细胞病毒早期启动子，在第二个片段的2A基因中引入同义突变作为遗传标记位点，在病毒基因组第三个片段的3'端添加丁型肝炎病毒核酶序列和猴空泡病毒早期mRNA多腺苷酸化信号序列，完成3型鸭甲肝病毒感染性亚基因组复制子的构建，与转染试剂混合后转染原代鸭胚成纤维细胞，复制子自发重组，最终获得含有遗传标记的3型鸭甲肝病毒。利用该方法可快速获得3型鸭甲肝病毒突变株，这为研究3型鸭甲肝病毒的致病机理、开发新型疫苗等提供了有利的工具。
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公开(公告)号：CN103382507A
公开(公告)日：2013-11-06
申请号：CN201310228262.9
申请日：2013-06-08
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开的是1型和3型鸭甲肝病毒一步法双重RT-PCR检测试剂盒、引物对及方法，引物对1由引物1和引物2组成，用于检测1型鸭甲肝病毒，它们的核苷酸序列分别依次为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的单链DNA；引物对2由引物3和引物4组成，用于检测3型鸭甲肝病毒，它们的核苷酸序列分别依次为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示的单链DNA。一次RT-PCR反应就能同时检测1型鸭甲肝病毒和3型鸭甲肝病毒两种病原体的检测技术，避免了常规PCR的重复检测，具有低成本、高效率等优点，而且在引物设计上利用扩增片段长度的不同直接判定扩增结果，使得该方法在结果判定时更简便、直观和实用。
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公开(公告)号：CN110283835B
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN201910551575.5
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑T1142A‑C4334A及构建方法，所述的突变基因ISA‑T1142A‑C4334A以3型鸭甲肝病毒强毒株基因组第1142位核苷酸由T突变为A，从而使病毒VP0蛋白的第164位氨基酸由亲本株的酪氨酸突变为天冬酰胺；第4334位核苷酸由C突变为A，从而使病毒2C蛋白的第71位氨基酸由亲本株的亮氨酸突变为异亮氨酸。3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑T1142A‑C4334A突变株是一株理想的疫苗候选株；还可用于3型鸭甲肝病毒致弱分子机理等基础研究中，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN110295149B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN201910551115.2
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/87 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种突变株3型鸭甲肝病毒CH‑P60‑117C株及构建方法，该突变株为以3型鸭甲肝病毒强毒株基因组5'UTR的第117位核苷酸由A突变为C；第1142位核苷酸由T突变为A，从而使病毒的VP0蛋白第164位氨基酸由亲本株的酪氨酸突变为天冬酰胺；第4334位核苷酸由C突变为A，从而使病毒2C蛋白的第71位氨基酸由亲本株的亮氨酸突变为异亮氨酸。该突变株免疫原性和遗传稳定性良好；能够在鸭胚和鸡胚上增殖且具有更高的增殖效率和病毒滴度；对雏鸭不致病，具有良好的安全性。
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公开(公告)号：CN110283836A
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201910551577.4
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA-T1142A及构建方法，该突变基因基因组的第3403位核苷酸的G突变为T，作为感染性克隆的遗传标记，可用来区分拯救株与亲本株以及野毒株；第1142位核苷酸由T突变为A，从而使病毒VP0蛋白的第164位氨基酸的由亲本株的酪氨酸突变为天冬酰胺。突变基因病毒株与亲本株具有相同的抗原性，而在鸭胚上具有比亲本株更高的增殖效率和病毒滴度，免疫原性和遗传稳定性良好。突变基因病毒株对雏鸭致病力已明显下降，这为该病毒致病机制及疫苗研制奠定了重要基础。综上所述，3型鸭甲肝病毒突变基因ISA-T1142A病毒株可作为一株疫苗候选或培育毒株并可用于3型鸭甲肝病毒致弱机理研究，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN109797139A
公开(公告)日：2019-05-24
申请号：CN201910036716.X
申请日：2019-01-15
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N7/00 , C12N7/08 , A61K39/125 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒弱毒株CH-P60及其应用，该病毒株于2018年12月2日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内，保藏编号为CCTCC NO：V201861。所述的3型鸭甲肝病毒弱毒株对雏鸭安全，无致病力，且可保护同源强毒的攻毒，具有实际和广泛的应用价值。
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