基于未变性染色皮粉底物的蛋白酶胶原蛋白水解活力测定方法及其应用

    公开(公告)号:CN105136699B

    公开(公告)日:2018-03-16

    申请号:CN201510527085.3

    申请日:2015-08-25

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: G01N21/31 G01N21/75

    摘要: 本发明提供了一种基于未变性染色皮粉底物的蛋白酶胶原蛋白水解活力测定方法,包括以下步骤:(1)制备染色皮粉:将由动物皮中间网状层制取的皮粉分散NaCl溶液中形成皮粉悬浮液,振荡使皮粉中的杂质充分进入液相,然后按照每质量份皮粉使用0.15~4.0质量份低温活性染料、0.05~1.2质量份固色剂的量,加入低温活性染料溶液,振荡使低温活性染料与皮粉中的胶原蛋白发生共价结合,再加入固色剂溶液,充分振荡后过滤,洗涤、脱水、干燥、粉碎即得;(2)测定染色皮粉标准曲线;(3)制备待测反应液和空白对照液;(4)测得吸光度值并计算酶活力。该方法可在酸性、中性和碱性条件下测定蛋白酶的胶原水解酶活力。

    基于未变性染色皮粉底物的蛋白酶胶原蛋白水解活力测定方法及其应用

    公开(公告)号:CN105136699A

    公开(公告)日:2015-12-09

    申请号:CN201510527085.3

    申请日:2015-08-25

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: G01N21/31 G01N21/75

    摘要: 本发明提供了一种基于未变性染色皮粉底物的蛋白酶胶原蛋白水解活力测定方法,包括以下步骤:(1)制备染色皮粉:将由动物皮中间网状层制取的皮粉分散NaCl溶液中形成皮粉悬浮液,振荡使皮粉中的杂质充分进入液相,然后按照每质量份皮粉使用0.15~4.0质量份低温活性染料、0.05~1.2质量份固色剂的量,加入低温活性染料溶液,振荡使低温活性染料与皮粉中的胶原蛋白发生共价结合,再加入固色剂溶液,充分振荡后过滤,洗涤、脱水、干燥、粉碎即得;(2)测定染色皮粉标准曲线;(3)制备待测反应液和空白对照液;(4)测得吸光度值并计算酶活力。该方法可在酸性、中性和碱性条件下测定蛋白酶的胶原水解酶活力。

    一种脱灰-软化-浸酸一体化清洁制革方法及其应用

    公开(公告)号:CN113913563A

    公开(公告)日:2022-01-11

    申请号:CN202111088748.8

    申请日:2021-09-16

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C14C1/08 C14C3/06

    摘要: 本发明提供了一种脱灰‑软化‑浸酸一体化清洁制革方法,该方法的特点是将常规制革工艺中的脱灰、酶软化和浸酸工序合并,并用无盐浸酸替代有盐浸酸。用无铵盐脱碱剂和非膨胀酸将浸灰裸皮的pH值调节至酸性,加入酸性复合酶制剂进行软化,同浴再加入非膨胀酸进行无盐浸酸,同时实现软化和浸酸的目的。该方法用酸性复合酶软化替代常规的胰酶软化,完全不加铵盐、硼酸和中性盐,可从源头上消除脱灰、软化、浸酸工序中氨氮和氯离子污染,且能减少铬的排放;该方法能有效避免常规的无氨软化浴液pH缓冲性差所造成的软化效果不稳定的问题。该方法具有广泛的实用性,适合以各种动物皮为原料的各种皮革生产过程。

    一种动物皮的高效酶脱脂方法

    公开(公告)号:CN107164585A

    公开(公告)日:2017-09-15

    申请号:CN201710575588.7

    申请日:2017-07-14

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C14C5/00

    CPC分类号: C14C5/00

    摘要: 本发明提供了一种基于脂肪酶对动物皮油脂催化水解作用的高效脱脂方法及其应用。该方法的特点是,是将脂肪酶对动物皮油脂的催化水解反应分阶段进行,酶作用初期,在脂肪酶的最适pH值下催化动物皮内油脂水解;在反应中、后期加入碱和脂肪酸分散剂,使脂肪酸原位形成可溶性皂,进入水相,实现产物脂肪酸与油脂分子及时分离,消除了脂肪酶催化反应的产物抑制和表面活性剂抑制作用,使脂肪酶产生“超活性”,提高酶催化效率,不需要外加表面活性剂,实现动物皮无溶剂和表面活性剂的高效脱脂。本发明的方法适合以任何动物皮为原料的制革、制裘、制胶、多肽和活性物质提取等过程中对动物皮进行高效脱脂。

    调控蛋白酶对动物皮内胶原蛋白和弹性蛋白选择性作用的方法

    公开(公告)号:CN105132600B

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201510516342.3

    申请日:2015-08-21

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C14C11/00

    摘要: 本发明公开的调控蛋白酶对动物皮内胶原蛋白和弹性蛋白选择性作用的方法,其特点是,于转鼓或划槽中对动物皮进行酶处理的过程中,在酶处理前的处理液中,按100质量份的动物皮使用0.1‑5.0质量份阴离子表面活性剂,将阴离子表面活性剂加入到处理液中,转动0‑120分钟,再加入0.01‑2.0质量份蛋白酶,或者先将0.1‑5.0质量份阴离子表面活性剂用水配制成质量浓度为0.1%‑5.0%的溶液,再将0.01‑2.0质量份的蛋白酶溶解在表面活性剂溶液中,放置10‑60分钟得到预处理蛋白酶,将预处理蛋白酶加入到处理液中,对动物皮进行酶处理,抑制蛋白酶对动物皮内胶原蛋白的水解活力并提高其对弹性蛋白的水解活力。

    一种脱灰-软化-浸酸一体化清洁制革方法及其应用

    公开(公告)号:CN113913563B

    公开(公告)日:2022-03-29

    申请号:CN202111088748.8

    申请日:2021-09-16

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C14C1/08 C14C3/06

    摘要: 本发明提供了一种脱灰‑软化‑浸酸一体化清洁制革方法,该方法的特点是将常规制革工艺中的脱灰、酶软化和浸酸工序合并,并用无盐浸酸替代有盐浸酸。用无铵盐脱碱剂和非膨胀酸将浸灰裸皮的pH值调节至酸性,加入酸性复合酶制剂进行软化,同浴再加入非膨胀酸进行无盐浸酸,同时实现软化和浸酸的目的。该方法用酸性复合酶软化替代常规的胰酶软化,完全不加铵盐、硼酸和中性盐,可从源头上消除脱灰、软化、浸酸工序中氨氮和氯离子污染,且能减少铬的排放;该方法能有效避免常规的无氨软化浴液pH缓冲性差所造成的软化效果不稳定的问题。该方法具有广泛的实用性,适合以各种动物皮为原料的各种皮革生产过程。

    一种对皮表面进行钙盐矿化包覆保护皮粒面的酶脱毛方法

    公开(公告)号:CN113061669A

    公开(公告)日:2021-07-02

    申请号:CN202110405641.5

    申请日:2021-04-15

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C14C1/06

    摘要: 本发明公开了一种在动物皮酶脱毛之前,使用沉积性钙盐对皮表面进行矿化包覆来保护生皮粒面的方法,涉及皮革生产领域。本发明的特点在于使用沉积性钙盐矿化保护动物皮粒面,使钙盐在生皮表面沉积包覆,赋予胶原蛋白更强的耐酶性能,之后再进行酶法脱毛。该方法能够有效保护动物皮的粒面层胶原在酶脱毛过程中不受蛋白酶过度作用,避免松面、烂面等粒面损害情况的发生,并且不影响后续工段的进行,有效提高成革质量。该方法具有广泛的适用性,适合于以动物皮为原料的各种皮革的生产。

    一种以富含油脂皮粉为底物的脂肪酶活力测定和性能评价方法

    公开(公告)号:CN107058461A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710220038.3

    申请日:2017-04-06

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C12Q1/61 C12Q1/44

    摘要: 本发明提供了一种以富含油脂皮粉为底物的脂肪酶活力测定和性能评价的方法。该方法以动物皮为原料,制备富含油脂的皮粉底物;在水介质中,脂肪酶与皮粉吸附的油脂接触,催化皮粉内的油脂水解生成脂肪酸,在一定条件下反应后,同时用盐和酸终止酶反应,并使浴液中的脂肪酸盐转变成脂肪酸,使油脂和脂肪酸完全被皮粉吸附。用溶剂完全抽提皮粉中生成的脂肪酸,通过测定单位时间脂肪酸的产生量来对脂肪酶活力及性能进行表征。该方法可以在较宽pH范围测定脂肪酶的活力及对脂肪酶性能进行评价,所用底物和反应条件与动物皮处理过程中脂肪酶对皮内油脂作用的条件相近,测定结果对以动物皮为原料的制革、制裘、制胶和胶原提取等脂肪酶应用领域中的脂肪酶的选择和应用条件的优化更具有指导意义。

    调控蛋白酶对动物皮内胶原蛋白和弹性蛋白选择性作用的方法

    公开(公告)号:CN105132600A

    公开(公告)日:2015-12-09

    申请号:CN201510516342.3

    申请日:2015-08-21

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C14C11/00

    摘要: 本发明公开的调控蛋白酶对动物皮内胶原蛋白和弹性蛋白选择性作用的方法,其特点是,于转鼓或划槽中对动物皮进行酶处理的过程中,在酶处理前的处理液中,按100质量份的动物皮使用0.1-5.0质量份阴离子表面活性剂,将阴离子表面活性剂加入到处理液中,转动0-120分钟,再加入0.01-2.0质量份蛋白酶,或者先将0.1-5.0质量份阴离子表面活性剂用水配制成质量浓度为0.1%-5.0%的溶液,再将0.01-2.0质量份的蛋白酶溶解在表面活性剂溶液中,放置10-60分钟得到预处理蛋白酶,将预处理蛋白酶加入到处理液中,对动物皮进行酶处理,抑制蛋白酶对动物皮内胶原蛋白的水解活力并提高其对弹性蛋白的水解活力。

    一种以含蛋白多糖复合物皮粉为底物的糖苷酶活力测定和性能评价方法

    公开(公告)号:CN111172233B

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202010082876.0

    申请日:2020-02-07

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C12Q1/34

    摘要: 本发明提供了一种以含蛋白多糖复合物皮粉为底物的糖苷酶活力测定和性能评价方法。该方法以天然动物皮为原料,制备含蛋白多糖复合物的皮粉底物;糖苷酶催化皮粉中蛋白多糖复合物水解并从皮粉中溶出,以单位时间内反应液中总糖的产生量来表征酶活力。本发明的糖苷酶活力表征方法包括以下步骤:(1)底物的制备;(2)糖苷酶活力的测定;(3)糖苷酶活力计算。本方法所用底物含与胶原结合紧密的、难以被普通酸碱破坏的动物皮中原有的蛋白多糖复合物,反应过程模拟了制革、制裘等动物皮加工过程中的固液反应,可以在较宽的pH范围测定不同糖苷酶的活力和性能,测定结果能为制革或制裘生产中糖苷酶的筛选、应用条件的优化和技术的开发提供指导。