一种在水/有机介质混合体系中酶催化合成β-内酰胺抗生素的方法

    公开(公告)号:CN101130804B

    公开(公告)日:2010-04-07

    申请号:CN200710070380.6

    申请日:2007-08-01

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12P35/04 C12P37/04

    摘要: 本发明公开了一种在水/有机介质混合体系中酶催化合成β-内酰胺抗生素的方法,包括将β-内酰胺母核、酰化试剂、水和有机溶剂混合,加入青霉素酰化酶后在-10~45℃反应1~48小时。本发明方法一方面可以有效抑制青霉素酰化酶的水解活性,降低酰化试剂的水解和产物的水解程度,另一方面可以减少溶剂尤其是强极性溶剂对酶表面“必需水”层的剥夺能力,从而获得更好的酶催化活性。与水介质的反应方法相比,本发明方法的合成/水解比值得到了很大提高,降低生产成本。由于水解等副反应受到抑制,副产物减少,产率得以提高,β-内酰胺抗生素的分离过程得到简化。

    一种用于固定青霉素酰化酶的载体的制备和负载方法

    公开(公告)号:CN100455664C

    公开(公告)日:2009-01-28

    申请号:CN200610155523.9

    申请日:2006-12-28

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N11/08 C12N9/78

    摘要: 本发明公开了一种固定化青霉素酰化酶的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)将带有侧链官能团的多孔树脂进行研磨,筛选,干燥,活化后与壳聚糖溶液混合,烘干,得到固体;(2)将步骤(1)得到的固体加入极性亲水性溶剂中,加入助剂进行修饰反应后抽滤,洗涤,烘干得到多孔树脂载体;(3)将青霉素酰化酶负载于多孔树脂载体上;得到的固定化青霉素酰化酶。发明通过壳聚糖的生物相容性作用提高了酶的活性并维持较高稳定性,而且高分子聚合物基材具有良好的机械性能,使得本发明的固定化青霉素酰化酶更好的满足β-内酰胺抗生素工业化生产条件的要求。

    酰化酶催化多步串联合成环己烯酮衍生物的方法

    公开(公告)号:CN102162002B

    公开(公告)日:2013-08-28

    申请号:CN201110026402.5

    申请日:2011-01-24

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12P7/26

    摘要: 本发明公开了一种酰化酶催化多步串联合成环己烯酮衍生物的方法,包括:将酮与醛和溶剂构成反应体系,加入酰化酶和添加剂后在10℃~70℃反应4小时~72小时,制得具有环己烯酮结构衍生物;所述的添加剂为咪唑、带取代基的咪唑、苯并咪唑、氨基酸中的一种;其中,每升反应体系中酰化酶的用量为50mu~2000mu;每升反应体系中添加剂的用量为4g~128g;溶剂为一种溶剂或多种溶剂。该方法利用酰化酶和添加剂作为催化剂,可以合成具有环己烯酮结构的衍生物,与现有的化学合成的方法相比,具有操作简便,反应条件温和,对环境友好等优点。

    一种肝靶向性药物微胶囊的制备方法

    公开(公告)号:CN101129342A

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:CN200710070408.6

    申请日:2007-07-31

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明公开了一种具肝靶向性的药物缓释纳米微胶囊的制备方法。该方法将肝靶向基团-含有半乳糖残基的糖单体与羧酸乙烯酯进行酶促反应结合,制得的带糖基的乙烯酯再与不饱和阳离子或阴离子单体共聚,得到肝靶向聚电解质。该聚电解质在药物微粒表面通过静电作用层层组装,得到带肝靶向性的药物微胶囊,胶囊化的药物释放速率可控。本发明聚合方法简单高效,合成的聚电解质无生理毒性。包覆方法效率高,易操作,制备工艺温和,聚电解质可以循环利用多次,制得的药物胶囊长期稳定储存。胶囊化的药物能够逐步释放出来,并可能在肝脏累积,在提高病灶部位药效的同时能大大减轻对其他健康器官的药毒作用,具有很好的应用前景。

    一种用于固定青霉素酰化酶的载体的制备和负载方法

    公开(公告)号:CN1995339A

    公开(公告)日:2007-07-11

    申请号:CN200610155523.9

    申请日:2006-12-28

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N11/08 C12N9/78

    摘要: 本发明公开了一种固定化青霉素酰化酶的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)将带有侧链官能团的多孔树脂进行研磨,筛选,干燥,活化后与壳聚糖溶液混合,烘干,得到固体;(2)将步骤(1)得到的固体加入极性亲水性溶剂中,加入助剂进行修饰反应后抽滤,洗涤,烘干得到多孔树脂载体;(3)将青霉素酰化酶负载于多孔树脂载体上;得到的固定化青霉素酰化酶。发明通过壳聚糖的生物相容性作用提高了酶的活性并维持较高稳定性,而且高分子聚合物基材具有良好的机械性能,使得本发明的固定化青霉素酰化酶更好的满足β-内酰胺抗生素工业化生产条件的要求。

    碳纳米管表面层层自组装制备增敏型免疫反应探针的方法

    公开(公告)号:CN101482561A

    公开(公告)日:2009-07-15

    申请号:CN200910096093.1

    申请日:2009-02-09

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: G01N33/535 G01N33/551

    摘要: 本发明公开了一种碳纳米管表面层层自组装制备增敏型免疫反应探针的方法,将表面自组装改性的碳纳米管分别分散于伴刀豆球蛋白溶液、过氧化物酶溶液中,依靠伴刀豆球蛋白与过氧化物酶的特异性生物识别作用,可以层层自组装达到预定厚度,得到增敏型免疫反应探针。本发明利用层层自组装制备的增敏型免疫反应探针,将大量的过氧化物酶与抗体共固定在碳纳米管表面。该探针与待测样品中和抗原特异性结合形成结合体时,每个待测抗原对应增敏型探针上大量的过氧化物酶,可显著提高免疫反应的检测灵敏度。本发明利用层层自组装制备增敏型免疫反应探针的方法制备条件温和,标记酶、抗体固定量可控。

    一种在聚电解质离子的协同作用下对青霉素酰化酶的固定方法

    公开(公告)号:CN100465271C

    公开(公告)日:2009-03-04

    申请号:CN200610155522.4

    申请日:2006-12-28

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12N11/04 C12N9/78

    摘要: 本发明公开了一种在聚电解质离子的协同作用下对青霉素酰化酶进行固定的方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)将浓度为100~3000U/ml的青霉素酰化酶的溶液与聚阴离子溶液进行预混合,然后将预混合液与聚阳离子溶液混合,生成带有絮状沉淀的悬浊液;(2)将带有絮状沉淀的悬浊液进行搅拌,搅拌下加入硅烷类物质并均匀混合,加入交联剂,再经过陈化,真空干燥,研磨,得到颗粒状的青霉素酰化酶固定化产物。通过本发明方法固定的青霉素酰化酶,提高了酶活性和使用稳定性,可以改善β-内酰胺抗生素工业化生产条件,降低生产成本。

    一种在水/有机介质混合体系中酶催化合成β-内酰胺抗生素的方法

    公开(公告)号:CN101130804A

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:CN200710070380.6

    申请日:2007-08-01

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12P35/04 C12P37/04

    摘要: 本发明公开了一种在水/有机介质混合体系中酶催化合成β-内酰胺抗生素的方法,包括将β-内酰胺母核、酰化试剂、水和有机溶剂混合,加入青霉素酰化酶后在-10~45℃反应1~48小时。本发明方法一方面可以有效抑制青霉素酰化酶的水解活性,降低酰化试剂的水解和产物的水解程度,另一方面可以减少溶剂尤其是强极性溶剂对酶表面“必需水”层的剥夺能力,从而获得更好的酶催化活性。与水介质的反应方法相比,本发明方法的合成/水解比值得到了很大提高,降低生产成本。由于水解等副反应受到抑制,副产物减少,产率得以提高,β-内酰胺抗生素的分离过程得到简化。

    酰化酶催化多步串联合成环己烯酮衍生物的方法

    公开(公告)号:CN102162002A

    公开(公告)日:2011-08-24

    申请号:CN201110026402.5

    申请日:2011-01-24

    申请人: 浙江大学

    IPC分类号: C12P7/26

    摘要: 本发明公开了一种酰化酶催化多步串联合成环己烯酮衍生物的方法,包括:将酮与醛和溶剂构成反应体系,加入酰化酶和添加剂后在10℃~70℃反应4小时~72小时,制得具有环己烯酮结构衍生物;所述的添加剂为咪唑、带取代基的咪唑、苯并咪唑、氨基酸中的一种;其中,每升反应体系中酰化酶的用量为50mu~2000mu;每升反应体系中添加剂的用量为4g~128g;溶剂为一种溶剂或多种溶剂。该方法利用酰化酶和添加剂作为催化剂,可以合成具有环己烯酮结构的衍生物,与现有的化学合成的方法相比,具有操作简便,反应条件温和,对环境友好等优点。