棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法

    公开(公告)号:CN103952464B

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201310537999.9

    申请日:2013-10-29

    Abstract: 本发明涉及一种棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法,属于生物技术领域。其具体方法和步骤如下:(1)分离和培养淋巴细胞;(2)提取总RNA;(3)合成cDNA;(4)cDNA的纯化;(5)设计引物;(6)生成标准曲线;(7)根据2-△△CT法分析棉酚作用后的IL-18基因的表达;(8)分析研究不同浓度、不同时间下棉酚作用后表达量变化。该发明较好地分析研究了棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达的影响,并能以此作为解除棉酚对新疆多浪羊危害方面研究的重要依据。

    一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法

    公开(公告)号:CN103820864A

    公开(公告)日:2014-05-28

    申请号:CN201310537998.4

    申请日:2013-10-29

    Abstract: 本发明涉及一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法,属于生物技术领域。具体构建方法及过程如下:(1)提取和纯化总RNA;(2)合成cDNA第一链;(3)合成cDNA第二链;(4)对产物进行消化、酶切、过柱分离及连接;(5)体外包装;(6)cDNA文库的鉴定、扩增。本发明通过建立多浪羊的cDNA文库,有利于进一步研究新疆多浪羊的免疫分子并为保存物种信息奠定坚实的基础。对于现阶段利用分子克隆技术而言,建立多浪羊的cDNA文库,用相应的探针进行标记,筛选出目的基因和与目的基因相关的基因,也是目前获取新基因的重要手段。

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