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公开(公告)号：CN111172184A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN202010161676.4
申请日：2020-03-10
申请人： 大连理工大学
摘要： 本发明公开了一种基于基因修饰得到的人重组干扰素融合基因、融合蛋白及其制备方法，属于生物制品技术领域。基于基因修饰得到人重组干扰素IFN-β的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。由基因编码的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明对人重组干扰素IFN-β基因序列进行扩增，与质粒pET-28a(+)相连接得到融合基因，再将融合基因转染至大肠杆菌BL21(DE3)中进行扩增和表达得到了可溶性的融合蛋白，解决了大肠杆菌中无法获得可溶性干扰素的问题。本发明还提供了从稳定细胞系获得高纯度的IFN-KE50蛋白的纯化方法，由于其具有组氨酸标签，用固定金属镍进行亲和层析可以对目标蛋白进行有效的纯化，纯化后蛋白纯度可达到94.8％。简化了后续的纯化步骤，并可以获得更高的纯度。
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公开(公告)号：CN110078829B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201910356933.7
申请日：2019-04-29
申请人： 大连理工大学
IPC分类号： C07K17/02 , C12N11/02 , C12N11/14 , C12N11/089 , A61K47/42
摘要： 本发明公开了一种基于乙烯基砜表面反应的组氨酸标签蛋白定点共价固定新方法。所述的组氨酸标签蛋白定点共价固定方法，以表面含有乙烯基砜基团的基底材料作为蛋白质固定载体，在近中性条件的蛋白质溶液中室温下即可以实现组氨酸标签与表面乙烯基砜的反应，从而实现组氨酸标签蛋白在乙烯基砜表面的定点共价固定。本发明的定点共价固定新方法定向性强，特异性高，固定化的蛋白质稳定性高，反应条件温和并且实验方法简单，该方法所用试剂均为常规试剂，成本低廉。本发明的组氨酸标签蛋白共价固定新方法在酶固定化，生物芯片制备，微阵列制备及靶向给药系统构建中均具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN108452775B
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN201810283350.1
申请日：2018-04-02
申请人： 大连理工大学
摘要： 本发明公开了一种功能化的高密度层析基质、其制备方法及应用。所述的层析基质功能化方法，以表面多羟基结构的亲水性微球或表面包被有多羟基聚合物的亲水性微球作为层析基质，在无水条件下利用催化剂催化层析基质表面羟基与二乙烯基砜反应，实现对基质表面羟基进行功能化。本发明的层析基质表面功能化方法步骤少，过程简单，功能化密度高，所用的试剂和溶剂均为常规试剂并且可以回收重复利用，该反应在反应过程中没有副产物生成，原子经济性高，成本低廉；通过调控反应时间和催化剂种类能够实现密度控制。利用本发明所述方法制备的层析基质，其在亲和层析填料制备以及抗体药物纯化中有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN104311465B
公开(公告)日：2016-04-27
申请号：CN201410539887.1
申请日：2014-10-11
申请人： 大连理工大学
IPC分类号： C07C323/65 , C07C319/22 , C07K17/10 , C07K17/02
摘要： 本发明公开一种ω-乙烯砜基双硫化合物、其制备方法及应用，所述的化合物具有通式I的结构，该通式I中，n是4～18的整数。该化合物能在金、银等贵金属表面形成高度有序的自组装膜，自组装膜表面的乙烯基砜基团在一定的条件下可以分别与含有巯基、氨基和羟基的生物/化学分子反应，用以分子偶联、生物活性材料制备和生化传感芯片修饰等。使用该化合物制备的自组装膜具有耐水解性、耐碱性和反应光谱性等优点。
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公开(公告)号：CN104311465A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410539887.1
申请日：2014-10-11
申请人： 大连理工大学
IPC分类号： C07C323/65 , C07C319/22 , C07K17/10 , C07K17/02
摘要： 本发明公开一种ω-乙烯砜基双硫化合物、其制备方法及应用，所述的化合物具有通式I的结构，该通式I中，n是4～18的整数。该化合物能在金、银等贵金属表面形成高度有序的自组装膜，自组装膜表面的乙烯基砜基团在一定的条件下可以分别与含有巯基、氨基和羟基的生物/化学分子反应，用以分子偶联、生物活性材料制备和生化传感芯片修饰等。使用该化合物制备的自组装膜具有耐水解性、耐碱性和反应光谱性等优点。
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公开(公告)号：CN105295447A
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201510594737.5
申请日：2015-09-17
申请人： 大连理工大学
摘要： 本发明公开一种硅基材料表面生物功能化的方法，并公开以该方法所制备的功能化硅基材料。所述的方法是以二乙烯基砜连接由巯基/氨基硅烷偶联剂表面改性的羟基化硅基材料与生物分子的方法。该方法使用商业化的巯基/氨基硅烷偶联剂和二乙烯基砜为偶联试剂，无需前处理，可操作性强、重现性高、适用性广；乙烯基砜可以和巯基、氨基、羟基反应，适用生物分子具有广谱性；涉及的反应均在水溶液中进行，条件温和、环境友好；是一种潜力巨大的广谱性硅基材料表面生物功能化方法。
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公开(公告)号：CN108452775A
公开(公告)日：2018-08-28
申请号：CN201810283350.1
申请日：2018-04-02
申请人： 大连理工大学
摘要： 本发明公开了一种功能化的高密度层析基质、其制备方法及应用。所述的层析基质功能化方法，以表面多羟基结构的亲水性微球或表面包被有多羟基聚合物的亲水性微球作为层析基质，在无水条件下利用催化剂催化层析基质表面羟基与二乙烯基砜反应，实现对基质表面羟基进行功能化。本发明的层析基质表面功能化方法步骤少，过程简单，功能化密度高，所用的试剂和溶剂均为常规试剂并且可以回收重复利用，该反应在反应过程中没有副产物生成，原子经济性高，成本低廉；通过调控反应时间和催化剂种类能够实现密度控制。利用本发明所述方法制备的层析基质，其在亲和层析填料制备以及抗体药物纯化中有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN104530460A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410803233.5
申请日：2014-12-19
申请人： 大连理工大学
摘要： 糖基化高分子材料及其制备方法，所述制备方法是以二乙烯基砜为偶联剂化学连接高分子材料和糖的方法，所述的高分子材料含羟基。本发明的方法采用天然糖(包括单糖和寡糖)作为糖基化底物，不需要先行对糖分子进行化学修饰，可操作性强、重现性高、适用性广；该方法所涉及的反应均在水溶液中进行，条件温和，环境友好；所制备的糖基化高分子膜在蛋白质水平和细胞水平均具有良好的糖生物活性。
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公开(公告)号：CN110078829A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910356933.7
申请日：2019-04-29
申请人： 大连理工大学
摘要： 本发明公开了一种基于乙烯基砜表面反应的组氨酸标签蛋白定点共价固定新方法。所述的组氨酸标签蛋白定点共价固定方法，以表面含有乙烯基砜基团的基底材料作为蛋白质固定载体，在近中性条件的蛋白质溶液中室温下即可以实现组氨酸标签与表面乙烯基砜的反应，从而实现组氨酸标签蛋白在乙烯基砜表面的定点共价固定。本发明的定点共价固定新方法定向性强，特异性高，固定化的蛋白质稳定性高，反应条件温和并且实验方法简单，该方法所用试剂均为常规试剂，成本低廉。本发明的组氨酸标签蛋白共价固定新方法在酶固定化，生物芯片制备，微阵列制备及靶向给药系统构建中均具有广泛的应用前景。
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