公开(公告)号：CN115820705B

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202210978312.4

申请日：2022-08-16

申请人： 天津大学

发明人： 程景胜 ,  高庚荣 ,  丁明珠 ,  元英进

IPC分类号： C12N15/75 ,  C12N15/31 ,  C12N15/54 ,  C12N15/52 ,  C12N15/113 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C12R1/125

摘要： 本发明公开了高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株及构建方法,步骤：利用CRISPR/Cas9技术敲除菌株CGF01的srfAB‑srfAC和pksBCDE基因片段，用Pveg启动子替换启动子PfenC，得到重组菌株CGF04；对CGF04菌株利用P43启动子过表达乙酰辅酶A羧化酶基因accBC和3‑氧酰基‑ACP合酶III基因fabHB，得到重组菌株CGF16；对CGF16菌株敲除生物膜形成相关基因片段tapA‑sipW‑tasA，敲除基因片段epsAB和敲除孢子形成相关基因spoIIIE，得到重组菌株CGF26；本发明所构建的菌株丰原素产量高，菌株稳定性好，可重复性强，构建方法简单，易操作。

公开(公告)号：CN118834895A

公开(公告)日：2024-10-25

申请号：CN202310455512.6

申请日：2023-04-25

申请人： 天津大学

发明人： 程景胜 ,  高庚荣 ,  丁明珠 ,  卫斯毓 ,  元英进

IPC分类号： C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P39/00 ,  C12P21/02 ,  C07K7/06 ,  C12R1/125 ,  C12R1/15

摘要： 本发明公开了利用重组枯草芽孢杆菌CGF‑PG与重组谷氨酸棒状杆菌共培养生产丰原素的方法，其中的重组枯草芽孢杆菌CGF‑PG即一种带绿色荧光蛋白的强化脯氨酸转运的枯草芽孢杆菌，用下述方法构建：在枯草芽孢杆菌CGF26中，利用PfbaA启动子强化脯氨酸转运相关基因opuE，得到CGF‑P‑02菌株，在此基础上，利用C2up启动子过表达绿色荧光蛋白基因egfp，得到重组枯草芽孢杆菌CGF‑PG；本发明所构建的一种强化脯氨酸转运的枯草芽孢杆菌菌株，其丰原素产量高，菌株稳定性好，构建方法简单；本发明利用CGF‑PG与重组谷氨酸棒状杆菌共培养生产丰原素，丰原素产量显著提高至1554.74mg/L。

公开(公告)号：CN115820705A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202210978312.4

申请日：2022-08-16

申请人： 天津大学

发明人： 程景胜 ,  高庚荣 ,  丁明珠 ,  元英进

IPC分类号： C12N15/75 ,  C12N15/31 ,  C12N15/54 ,  C12N15/52 ,  C12N15/113 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C12R1/125

摘要： 本发明公开了高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株及构建方法,步骤：利用CRISPR/Cas9技术敲除菌株CGF01的srfAB‑srfAC和pksBCDE基因片段，用Pveg启动子替换启动子PfenC，得到重组菌株CGF04；对CGF04菌株利用P43启动子过表达乙酰辅酶A羧化酶基因accBC和3‑氧酰基‑ACP合酶III基因fabHB，得到重组菌株CGF16；对CGF16菌株敲除生物膜形成相关基因片段tapA‑sipW‑tasA，敲除基因片段epsAB和敲除孢子形成相关基因spoIIIE，得到重组菌株CGF26；本发明所构建的菌株丰原素产量高，菌株稳定性好，可重复性强，构建方法简单，易操作。