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公开(公告)号：CN115820527B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202211581639.4
申请日：2022-12-09
摘要： 本发明公开了一种生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌及构建方法与应用，其构建方法为：1)敲除盐单胞菌Halomonas sp.TD01中基因phaB和基因phaC；2)将基因mvaElac和基因mvaSlac表达单元靶向整合至步骤1)所得菌株基因组G7位点；得到在G7位点整合有mvaElac和mvaSlac表达单元的重组菌株；3)将基因mvaEef和mvaSef表达单元靶向整合至步骤2)所得菌株基因组G4位点，得到生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌；本发明构建的重组菌，有效利用不同碳源发酵生产甲羟戊酸，其甲羟戊酸产量和底物转化率高，稳定性好，无需诱导剂和抗生素。
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公开(公告)号：CN115820527A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211581639.4
申请日：2022-12-09
摘要： 本发明公开了一种生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌及构建方法与应用，其构建方法为：1)敲除盐单胞菌Halomonas sp.TD01中基因phaB和基因phaC；2)将基因mvaElac和基因mvaSlac表达单元靶向整合至步骤1)所得菌株基因组G7位点；得到在G7位点整合有mvaElac和mvaSlac表达单元的重组菌株；3)将基因mvaEef和mvaSef表达单元靶向整合至步骤2)所得菌株基因组G4位点，得到生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌；本发明构建的重组菌，有效利用不同碳源发酵生产甲羟戊酸，其甲羟戊酸产量和底物转化率高，稳定性好，无需诱导剂和抗生素。
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公开(公告)号：CN116925991A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202310938835.0
申请日：2023-07-28
申请人： 天津大学
摘要： 本发明公开了高产甲羟戊酸的重组盐单胞菌菌株及构建方法与应用，其构建步骤为：1)构建CRISPRi弱化基因表达所需重组质粒pli‑1、pli‑2、pli‑3、pli‑4、pli‑5、pli‑6、pli‑7、pli‑8、pli‑9或pli‑10：2)将步骤1)构建得到的重组质粒分别转入大肠杆菌S17‑1，再通过接合转化方法导入生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌Halomonas sp.TDMVA‑02中，分别得到高产甲羟戊酸的重组盐单胞菌菌株；本发明的菌株，在摇瓶发酵下较对照菌(空白载体表达菌株)的甲羟戊酸产量分别提高7.60％‑14.04％；显著提高甲羟戊酸的发酵产量。
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公开(公告)号：CN116925991B
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202310938835.0
申请日：2023-07-28
申请人： 天津大学
摘要： 本发明公开了高产甲羟戊酸的重组盐单胞菌菌株及构建方法与应用，其构建步骤为：1)构建CRISPRi弱化基因表达所需重组质粒pli‑1、pli‑2、pli‑3、pli‑4、pli‑5、pli‑6、pli‑7、pli‑8、pli‑9或pli‑10：2)将步骤1)构建得到的重组质粒分别转入大肠杆菌S17‑1，再通过接合转化方法导入生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌Halomonas sp.TDMVA‑02中，分别得到高产甲羟戊酸的重组盐单胞菌菌株；本发明的菌株，在摇瓶发酵下较对照菌(空白载体表达菌株)的甲羟戊酸产量分别提高7.60％‑14.04％；显著提高甲羟戊酸的发酵产量。
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