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公开(公告)号：CN113621639B
公开(公告)日：2022-06-07
申请号：CN202111026593.5
申请日：2021-09-02
摘要： 本发明公开了重组嗜盐单胞菌及构建方法与催化丙酮酸生产乙偶姻的应用，重组嗜盐单胞菌的构建方法为：(1)在野生型嗜盐单胞菌Halomonas sp.TD01CGMCCNo.4353基因组上整合Mmp1RNA聚合酶表达单元；再敲除PhaC基因；(2)制备高拷贝表达载体pN59‑PMmp1‑RBS‑aldC‑S2‑alsS；(3)制备低拷贝表达载体pN85‑PMmp1‑RBS‑aldC；(4)向步骤(1)获得的菌株中导入高拷贝表达载体和低拷贝表达载体，得到重组嗜盐单胞菌TDZ‑2。利用重组嗜盐单胞菌进行全细胞催化丙酮酸生产乙偶姻，与体外酶催化相比，效率高，反应周期短，成本低，环保。
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公开(公告)号：CN113481136B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202110813397.6
申请日：2021-07-19
摘要： 本发明公开了重组嗜盐单胞菌及构建方法及催化柠檬酸制备衣康酸的应用，一种重组嗜盐单胞菌的构建方法，其特征是包括如下步骤：在野生型嗜盐单胞菌Halomonas sp.TD01基因组上整合Mmp1RNA聚合酶表达单元，并将其icd基因起始密码子ATG替换为TTG，得到Halomonas sp.TD2.0；向其中依次导入高拷贝表达载体pN59‑PMmp1‑RBS‑cadA‑acn和低拷贝表达载体pN85‑PMmp1‑RBS‑GroESL‑PMmp1‑RBS‑acn；得到重组嗜盐单胞菌Halomonas sp.IA02；该菌细胞催化可高效制备衣康酸。本发明周期短、简便、产率高。
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公开(公告)号：CN113481136A
公开(公告)日：2021-10-08
申请号：CN202110813397.6
申请日：2021-07-19
摘要： 本发明公开了重组嗜盐单胞菌及构建方法及催化柠檬酸制备衣康酸的应用，一种重组嗜盐单胞菌的构建方法，其特征是包括如下步骤：在野生型嗜盐单胞菌Halomonas sp.TD01基因组上整合Mmp1RNA聚合酶表达单元，并将其icd基因起始密码子ATG替换为TTG，得到Halomonas sp.TD2.0；向其中依次导入高拷贝表达载体pN59‑PMmp1‑RBS‑cadA‑acn和低拷贝表达载体pN85‑PMmp1‑RBS‑GroESL‑PMmp1‑RBS‑acn；得到重组嗜盐单胞菌Halomonas sp.IA02；该菌细胞催化可高效制备衣康酸。本发明周期短、简便、产率高。
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公开(公告)号：CN115820527A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211581639.4
申请日：2022-12-09
摘要： 本发明公开了一种生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌及构建方法与应用，其构建方法为：1)敲除盐单胞菌Halomonas sp.TD01中基因phaB和基因phaC；2)将基因mvaElac和基因mvaSlac表达单元靶向整合至步骤1)所得菌株基因组G7位点；得到在G7位点整合有mvaElac和mvaSlac表达单元的重组菌株；3)将基因mvaEef和mvaSef表达单元靶向整合至步骤2)所得菌株基因组G4位点，得到生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌；本发明构建的重组菌，有效利用不同碳源发酵生产甲羟戊酸，其甲羟戊酸产量和底物转化率高，稳定性好，无需诱导剂和抗生素。
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公开(公告)号：CN113621639A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202111026593.5
申请日：2021-09-02
摘要： 本发明公开了重组嗜盐单胞菌及构建方法与催化丙酮酸生产乙偶姻的应用，重组嗜盐单胞菌的构建方法为：(1)在野生型嗜盐单胞菌Halomonas sp.TD01CGMCCNo.4353基因组上整合Mmp1RNA聚合酶表达单元；再敲除PhaC基因；(2)制备高拷贝表达载体pN59‑PMmp1‑RBS‑aldC‑S2‑alsS；(3)制备低拷贝表达载体pN85‑PMmp1‑RBS‑aldC；(4)向步骤(1)获得的菌株中导入高拷贝表达载体和低拷贝表达载体，得到重组嗜盐单胞菌TDZ‑2。利用重组嗜盐单胞菌进行全细胞催化丙酮酸生产乙偶姻，与体外酶催化相比，效率高，反应周期短，成本低，环保。
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公开(公告)号：CN115820527B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202211581639.4
申请日：2022-12-09
摘要： 本发明公开了一种生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌及构建方法与应用，其构建方法为：1)敲除盐单胞菌Halomonas sp.TD01中基因phaB和基因phaC；2)将基因mvaElac和基因mvaSlac表达单元靶向整合至步骤1)所得菌株基因组G7位点；得到在G7位点整合有mvaElac和mvaSlac表达单元的重组菌株；3)将基因mvaEef和mvaSef表达单元靶向整合至步骤2)所得菌株基因组G4位点，得到生产甲羟戊酸的重组盐单胞菌；本发明构建的重组菌，有效利用不同碳源发酵生产甲羟戊酸，其甲羟戊酸产量和底物转化率高，稳定性好，无需诱导剂和抗生素。
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公开(公告)号：CN116904384B
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202311167153.0
申请日：2023-09-12
申请人： 清华大学 , 北京微构工场生物技术有限公司
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/113 , C12N1/38 , C12P7/625 , C12R1/19 , C12R1/40 , C12R1/01
摘要： 本发明属于微生物培养技术领域，具体涉及一种重组微生物及其在生产聚羟基脂肪酸酯中的应用。本发明提供了一种嗜盐微生物的培养基，所述的培养基以氨基酸或氨基酸盐作为氮源，本发明还提供了一种重组嗜盐微生物，所述的重组嗜盐微生物敲除其中的谷氨酸合成相关蛋白的编码基因，利用氨基酸或氨基酸盐（特别是谷氨酸钠）作为唯一氮源进行发酵培养，可以显著提高发酵过程中的碳源转化率，进一步提高PHA产量；当使用混合氨基酸作为氮源进行发酵时，能够同时提高细胞干重、PHA产量、PHA百分含量和碳源转化率。
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公开(公告)号：CN118325982A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410611424.5
申请日：2024-05-16
申请人： 清华大学 , 北京微构工场生物技术有限公司
摘要： 本发明提供了一种生产酰基辅酶A或其衍生物的方法，所述的方法包括使用CO2衍生物对盐单胞菌培养过程中pH进行调节，且CO2衍生物可以作为底物，用以生产酰基辅酶A或其衍生物，实验结果显示，以CO2衍生物和碳源作为共底物，乙酰辅酶A丰度增加了241％，且生产过程绿色可持续。
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公开(公告)号：CN118272284A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410461686.8
申请日：2024-04-17
摘要： 本发明公开了一株重组盐单胞菌及其应用和基于其生产1,3‑丁二醇的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明首次公开了一株重组盐单胞菌Halomonas sp.TDΔC(pMABY‑KS/341BDO)，并将其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。实验表明，本发明菌株可在矿物培养基(60‑MMG)中高效生产1,3‑丁二醇，实验室摇瓶发酵最高产量为6.69g/L，是极具潜力的1,3‑丁二醇合成菌株。本发明基于盐单胞菌的“下一代工业生物技术”，为1,3‑丁二醇的高效低成本生产提供了极具竞争力的微生物发酵工艺，能够有效提升1,3‑丁二醇的产率，具有很好的工业化前景。
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公开(公告)号：CN116970659B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311195721.8
申请日：2023-09-18
申请人： 清华大学 , 北京微构工场生物技术有限公司
摘要： 本发明提供了一种生产聚羟基脂肪酸酯的方法，所述的方法包括使用戊酸、戊酸盐、庚酸或庚酸盐培养盐单胞菌。该盐单胞菌可以以五碳或七碳为底物高产包含3‑羟基戊酸单体的聚羟基脂肪酸酯，进一步通过调整戊酸、戊酸盐、庚酸或庚酸盐与葡萄糖的比例控制聚羟基脂肪酸酯中3‑羟基戊酸单体的摩尔比，在实际应用上，可以根据需求，可定制化的获得不同3HV摩尔比的PHA，多样化的材料也能满足更多的应用需求。因此，本申请的方法在提高包含3HV单体的PHA的产品竞争力和大规模生产效益等方面具有重要的
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