公开(公告)号：CN118325929A

公开(公告)日：2024-07-12

申请号：CN202410273660.0

申请日：2024-03-11

申请人： 天津科技大学

发明人： 李庆刚 ,  孙雪 ,  张文聪 ,  何晋怀 ,  谢真真 ,  刘传 ,  肖卫华 ,  宗剑飞 ,  李玉 ,  路福平

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/61 ,  C12N1/21 ,  C12P19/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于微生物代谢工程领域，具体涉及一种利用甘露糖合成岩藻糖基乳糖并提高甘露糖利用率的菌株及方法。所述方法是通过在岩藻糖基乳糖生产菌株基因组上D‑甘露糖异构酶编码基因yihS和甘露糖特异性PTS酶IIAB组分编码基因manX中的至少一种缺失表达实现。特别是敲除D‑甘露糖异构酶编码基因yihS的同时，对manX基因进行失活，能够大大提高利用甘露糖生产岩藻糖基乳糖的转化率和产量。

公开(公告)号：CN116334025A

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202310064132.X

申请日：2023-01-17

申请人： 天津科技大学 ,  山东合成远景生物科技有限公司

发明人： 孙雪 ,  李庆刚 ,  谢真真 ,  何晋怀 ,  宗剑飞 ,  肖卫华 ,  刘传 ,  张文聪 ,  李玉 ,  路福平

IPC分类号： C12N9/12 ,  C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12N15/61 ,  C12N15/31 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种RNA聚合酶β亚单位突变体及其应用。所述RNA聚合酶β亚单位突变体，是在野生型RNA聚合酶β亚单位(RpoC，NCBI Reference Sequences：NP_418415.1)的基础上，缺失第215位至第220位的6个氨基酸获得的，具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。将其应用于生产2'‑岩藻糖基乳糖和3‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌中，能够大幅提高菌株在发酵时的活细胞数，提高了菌株在发酵环境中的耐受性，并且2'‑岩藻糖基乳糖或3‑岩藻糖基乳糖产量也大幅度提高。

公开(公告)号：CN117106040A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202310830437.7

申请日：2023-07-06

申请人： 天津科技大学 ,  山东合成远景生物科技有限公司

发明人： 李庆刚 ,  黄道帅 ,  何晋怀 ,  李俊众 ,  宗剑飞 ,  刘甜甜 ,  肖卫华 ,  孙雪 ,  李玉 ,  路福平

IPC分类号： C07K14/33 ,  C12Q1/54 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/65

摘要： 本发明以涉及一种新型的转录调控因子BgaR突变体，属于代谢工程领域。所述突变体是在来源于产气荚膜梭菌野生型BgaR的基础上发生P120L，I123V，S187N和Y226C突变获得的，具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明首次利用BgaR作为生物传感器中的识别元件构建乳糖生物传感器，使乳糖浓度与菌株的生长情况偶联，用于测定/表征细胞中的乳糖含量；并对BgaR进行优化，获得对乳糖灵敏度更高，响应范围更宽的乳糖生物传感器，BgaR突变后对乳糖的响应范围由5‑10g/L增加到0‑12g/L，乳糖浓度为12g/L时，表达BgaR突变体菌株的生长情况明显优于表达野生型BgaR菌株，是野生型BgaR的3.3倍，对乳糖检测及乳糖生产菌株的筛选具有重要意义。

公开(公告)号：CN114276971A

公开(公告)日：2022-04-05

申请号：CN202210018189.1

申请日：2022-01-07

申请人： 天津科技大学 ,  山东合成远景生物科技有限公司

发明人： 李庆刚 ,  李玉 ,  李浩正 ,  郑艳玲 ,  宗剑飞 ,  肖卫华 ,  彭则涛 ,  程亚楠 ,  李畅 ,  路福平

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/56 ,  C12N15/60 ,  C12N15/61 ,  C12N15/31 ,  C12P19/24 ,  C12P19/18 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种构建重组大肠杆菌利用甘露糖合成GDP‑岩藻糖，进而生产2′‑岩藻糖基乳糖并提高甘露糖利用率的方法，属于微生物代谢工程领域。所述工程菌以大肠杆菌为出发菌株，敲除lac操纵子序列中Plac启动子序列以及lacI、lacZ基因，并且在1acI、lacZ基因位点上过表达wcaG、gmd、lacy基因，之后在基因组上敲除磷酸甘露糖异构酶编码基因manA，过表达磷酸甘露糖变位酶编码基因manB、α‑(1,2)‑岩藻糖基转移酶编码基因futC、甘露糖‑1‑磷酸鸟嘌呤基转移酶编码基因manC所得。本发明提供的2′‑岩藻糖基乳糖从头合成途径生产2′‑岩藻糖基乳糖的发酵策略，能够大幅提高大肠杆菌发酵生产2′‑岩藻糖基乳糖碳源利用率。