公开(公告)号：CN110551670B

公开(公告)日：2020-09-25

申请号：CN201910886078.0

申请日：2019-09-19

申请人： 天津科技大学

发明人： 张成林 ,  徐庆阳 ,  李燕军 ,  张宇 ,  李英滋 ,  朱福周 ,  卢楠 ,  韩世宝 ,  董解荣 ,  王子申 ,  徐昊 ,  李子翼

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种生产L‑亮氨酸的基因工程菌及其应用，属于代谢工程领域。所述基因工程菌是通过在宿主细胞中过表达解除L‑亮氨酸反馈抑制异丙基苹果酸合成酶编码基因leuAM、解除L‑异亮氨酸反馈抑制乙酰乳酸合酶编码基因ilvBNM、3‑异丙基苹果酸脱氢酶编码基因leuB、3‑异丙基苹果酸脱水酶编码基因leuCD，leuAM编码的乙酰羟酸合成酶在解除了L‑亮氨酸对其的反馈抑制作用，且其活性较野生型leuA编码的异丙基苹果酸合成酶未见明显降低；本发明所述的L‑亮氨酸基因工程菌无营养缺陷、生长快、发酵周期短、产量高、转化率高，经过40‑44h发酵后，发酵液中的L‑亮氨酸浓度达到60.5‑69.6g/L。

公开(公告)号：CN110747261A

公开(公告)日：2020-02-04

申请号：CN201910905969.6

申请日：2019-09-24

申请人： 天津科技大学

发明人： 赵化冰 ,  董萌 ,  路福平 ,  师三媛 ,  任璐 ,  刘东青 ,  史婷婷 ,  李子翼

IPC分类号： C12Q1/6851 ,  C12N15/11

摘要： 本发明涉及一种四环素类抗生素抗性基因tetX的特异性引物，所述引物的核苷酸序列为：F1：SEQ ID NO:1；R1：SEQ ID NO:2。本引物具有较高的特异性，检测方法的检测过程无需依靠标准曲线来测定核酸量，而是可以直接读取DNA分子的拷贝数，大大简化操作步骤，该方法结果判读直观准确、精确度高、灵敏度高，重复性好，同时具有高效性，最低可检测17个拷贝数。

公开(公告)号：CN110551670A

公开(公告)日：2019-12-10

申请号：CN201910886078.0

申请日：2019-09-19

申请人： 天津科技大学

发明人： 张成林 ,  徐庆阳 ,  李燕军 ,  张宇 ,  李英滋 ,  朱福周 ,  卢楠 ,  韩世宝 ,  董解荣 ,  王子申 ,  徐昊 ,  李子翼

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种生产L-亮氨酸的基因工程菌及其应用，属于代谢工程领域。所述基因工程菌是通过在宿主细胞中过表达解除L-亮氨酸反馈抑制异丙基苹果酸合成酶编码基因leuAM、解除L-异亮氨酸反馈抑制乙酰乳酸合酶编码基因ilvBNM、3-异丙基苹果酸脱氢酶编码基因leuB、3-异丙基苹果酸脱水酶编码基因leuCD，leuAM编码的乙酰羟酸合成酶在解除了L-亮氨酸对其的反馈抑制作用，且其活性较野生型leuA编码的异丙基苹果酸合成酶未见明显降低；本发明所述的L-亮氨酸基因工程菌无营养缺陷、生长快、发酵周期短、产量高、转化率高，经过40-44h发酵后，发酵液中的L-亮氨酸浓度达到60.5-69.6g/L。

公开(公告)号：CN110540976B

公开(公告)日：2020-07-24

申请号：CN201910820591.X

申请日：2019-08-29

申请人： 天津科技大学

发明人： 张成林 ,  徐庆阳 ,  李燕军 ,  张宇 ,  李英滋 ,  朱福周 ,  卢楠 ,  韩世宝 ,  董解荣 ,  王子申 ,  徐昊 ,  李子翼

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P13/06

摘要： 本发明涉及一个解除L‑亮氨酸反馈抑制的2‑异丙基苹果酸合成酶及其应用，属于代谢工程领域。本发明所述leuAM基因编码的2‑异丙基苹果酸合成酶具有如下特点：该酶解除了L‑亮氨酸对其的反馈抑制作用，在L‑亮氨酸浓度为0‑15mmol/L条件下，LEUAM酶活性无显著变化，且其活性较野生型leuAM编码的2‑异丙基苹果酸合成酶未见明显降低，可应用于L‑亮氨酸中的生产。

公开(公告)号：CN110747260A

公开(公告)日：2020-02-04

申请号：CN201910905955.4

申请日：2019-09-24

申请人： 天津科技大学

发明人： 赵化冰 ,  任璐 ,  路福平 ,  董萌 ,  刘东青 ,  师三媛 ,  杨柳 ,  杨晨 ,  史婷婷 ,  王晓康 ,  李子翼

IPC分类号： C12Q1/6851 ,  C12N15/11

摘要： 本发明涉及一种β-内酰胺类抗生素抗性基因blaTEM的特异性引物，所述引物的核苷酸序列为：F1：SEQ ID NO:1；R1：SEQ ID NO:2。本引物具有较高的特异性，检测方法的检测过程无需依靠标准曲线来测定核酸量，而是可以直接读取DNA分子的拷贝数，大大简化操作步骤，该方法结果判读直观准确、精确度高、灵敏度高，重复性好，同时具有高效性，最低可检测25.5个拷贝数。

公开(公告)号：CN110540976A

公开(公告)日：2019-12-06

申请号：CN201910820591.X

申请日：2019-08-29

申请人： 天津科技大学

发明人： 张成林 ,  徐庆阳 ,  李燕军 ,  张宇 ,  李英滋 ,  朱福周 ,  卢楠 ,  韩世宝 ,  董解荣 ,  王子申 ,  徐昊 ,  李子翼

IPC分类号： C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P13/06

摘要： 本发明涉及一个解除L-亮氨酸反馈抑制的2-异丙基苹果酸合成酶及其应用，属于代谢工程领域。本发明所述leuAM基因编码的2-异丙基苹果酸合成酶具有如下特点：该酶解除了L-亮氨酸对其的反馈抑制作用，在L-亮氨酸浓度为0-15mmol/L条件下，LEUAM酶活性无显著变化，且其活性较野生型leuAM编码的2-异丙基苹果酸合成酶未见明显降低，可应用于L-亮氨酸中的生产。