公开(公告)号：CN115895992A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211264766.1

申请日：2022-10-17

申请人： 天津科技大学

发明人： 马倩 ,  赵可欣 ,  耿自豪 ,  伊进行 ,  张春月 ,  谢希贤 ,  徐庆阳 ,  吴鹤云

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其是一种利用混菌劳动分工发酵生产氨基葡萄糖的方法。分别在两种大肠杆菌中构建强化N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径与脱乙酰功能模块，通过两菌功能分工策略，解决了氨基葡萄糖合成途径中关键酶果糖‑6‑磷酸转氨酶受到代谢产物氨基葡萄糖‑6‑磷酸反馈抑制的问题。摇瓶发酵24h后氨基葡萄糖的产量最高达到11.21g/L，生产强度达到0.47g/(L×h)，具有较强的工业化生产潜力。

公开(公告)号：CN113817658B

公开(公告)日：2023-06-16

申请号：CN202110973426.5

申请日：2021-08-24

申请人： 天津科技大学

发明人： 马倩 ,  张颖 ,  侯正杰 ,  谢希贤 ,  杨蒙雅 ,  卓明洋 ,  赵可欣 ,  陈宁 ,  徐庆阳 ,  张成林 ,  李燕军 ,  范晓光

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N15/61 ,  C12N15/31 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种利用木糖诱导生产N‑乙酰神经氨酸的基因工程菌。以大肠杆菌为出发菌株，在基因组上整合N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径，并引入来自项圈藻的N‑乙酰氨基葡萄糖2‑差向异构酶基因bAGE以及N‑乙酰神经氨酸合成酶基因neuB，构建N‑乙酰神经氨酸合成途径，并敲除其分解代谢途径的关键基因nanATEK。同时对合成N‑乙酰神经氨酸所需的前体物质的代谢途径进行多拷贝强化并对部分旁路代谢途径进行敲除，通过对产GlcNAc和Neu5Ac的关键酶基因进行不同拷贝数的优化，最终确定了关键酶基因的最佳比例，得到一株N‑乙酰神经氨酸高产菌。N‑乙酰神经氨酸产量最高可达28g/L，生产强度最高可达0.67g/(L×h)，为目前报道的最高值，具有重要的工业应用价值。

公开(公告)号：CN113817658A

公开(公告)日：2021-12-21

申请号：CN202110973426.5

申请日：2021-08-24

申请人： 天津科技大学

发明人： 马倩 ,  张颖 ,  侯正杰 ,  谢希贤 ,  杨蒙雅 ,  卓明洋 ,  赵可欣 ,  陈宁 ,  徐庆阳 ,  张成林 ,  李燕军 ,  范晓光

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N15/61 ,  C12N15/31 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种利用木糖诱导生产N‑乙酰神经氨酸的基因工程菌。以大肠杆菌为出发菌株，在基因组上整合N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径，并引入来自项圈藻的N‑乙酰氨基葡萄糖2‑差向异构酶基因bAGE以及N‑乙酰神经氨酸合成酶基因neuB，构建N‑乙酰神经氨酸合成途径，并敲除其分解代谢途径的关键基因nanATEK。同时对合成N‑乙酰神经氨酸所需的前体物质的代谢途径进行多拷贝强化并对部分旁路代谢途径进行敲除，通过对产GlcNAc和Neu5Ac的关键酶基因进行不同拷贝数的优化，最终确定了关键酶基因的最佳比例，得到一株N‑乙酰神经氨酸高产菌。N‑乙酰神经氨酸产量最高可达28g/L，生产强度最高可达0.67g/(L×h)，为目前报道的最高值，具有重要的工业应用价值。