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公开(公告)号:CN111454855B
公开(公告)日:2022-10-14
申请号:CN202010402827.0
申请日:2020-05-13
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明提供了一种重组毕赤酵母及其构建方法和在高效制备15α‑左旋乙基甾烯二酮中的应用,属于发酵工程技术领域;本发明以毕赤酵母为宿主,首次以胞内产酶方式同时诱导15α‑甾体羟化酶和葡糖‑6‑磷酸脱氢酶,采用毕赤酵母全细胞边诱导边催化的方式实现左旋乙基甾烯二酮转化高投料量和高转化率。
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公开(公告)号:CN112980702A
公开(公告)日:2021-06-18
申请号:CN202110301235.4
申请日:2021-03-22
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及一种高效表达C16β羟化酶的重组菌及其构建方法和应用,特别涉及基因工程领域。本发明提供了一种高效表达甾体C16β羟化酶的重组菌的构建方法,包括以下步骤:PCR扩增CYP5061基因左右同源臂,分别克隆到pBluescriptⅡKS(+)中后回收,将回收得到的CYP5061基因左右同源臂分别插入pPZP中,得到重组质粒;将重组质粒电转化至根癌农杆菌中,得到重组根癌农杆菌;将所述重组根癌农杆菌与黑曲霉共培养,得到重组黑曲霉。敲除本发明所述基因得到的菌株转化4‑AD生成16β‑OH‑4AD特异性明显提高。
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公开(公告)号:CN112980702B
公开(公告)日:2022-10-11
申请号:CN202110301235.4
申请日:2021-03-22
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及一种高效表达C16β羟化酶的重组菌及其构建方法和应用,特别涉及基因工程领域。本发明提供了一种高效表达甾体C16β羟化酶的重组菌的构建方法,包括以下步骤:PCR扩增CYP5061基因左右同源臂,分别克隆到pBluescriptⅡKS(+)中后回收,将回收得到的CYP5061基因左右同源臂分别插入pPZP中,得到重组质粒;将重组质粒电转化至根癌农杆菌中,得到重组根癌农杆菌;将所述重组根癌农杆菌与黑曲霉共培养,得到重组黑曲霉。敲除本发明所述基因得到的菌株转化4‑AD生成16β‑OH‑4AD特异性明显提高。
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公开(公告)号:CN111454855A
公开(公告)日:2020-07-28
申请号:CN202010402827.0
申请日:2020-05-13
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明提供了一种重组毕赤酵母及其构建方法和在高效制备15α-左旋乙基甾烯二酮中的应用,属于发酵工程技术领域;本发明以毕赤酵母为宿主,首次以胞内产酶方式同时诱导15α-甾体羟化酶和葡糖-6-磷酸脱氢酶,采用毕赤酵母全细胞边诱导边催化的方式实现左旋乙基甾烯二酮转化高投料量和高转化率。
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