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公开(公告)号：CN112662654A
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN202110116007.X
申请日：2021-01-28
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明主要通过DNA改组技术，利用DNaseI消化地衣芽胞杆菌来源和克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶基因，纯化回收目的片段，通过无引物PCR和有引物PCR构建碱性蛋白酶突变库，筛选获得了一种碱性蛋白酶活力显著提高的突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。适宜条件下，突变体碱性蛋白酶活力为61.75U/mL，相比野生型有显著提高。
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公开(公告)号：CN114480352B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210097345.8
申请日：2022-01-26
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明主要通过DNA改组技术，利用DNaseI消化地衣芽胞杆菌来源和克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶基因，纯化回收目的片段，通过无引物PCR和有引物PCR构建碱性蛋白酶突变库，筛选获得了一种碱性蛋白酶活力显著提高的突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。适宜条件下，突变体碱性蛋白酶活力为61.75U/mL，相比野生型有显著提高。
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公开(公告)号：CN114480352A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210097345.8
申请日：2022-01-26
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明主要通过DNA改组技术，利用DNaseI消化地衣芽胞杆菌来源和克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶基因，纯化回收目的片段，通过无引物PCR和有引物PCR构建碱性蛋白酶突变库，筛选获得了一种碱性蛋白酶活力显著提高的突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。适宜条件下，突变体碱性蛋白酶活力为61.75U/mL，相比野生型有显著提高。
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公开(公告)号：CN116286568A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202211227756.0
申请日：2022-10-09
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种通过敲除枯草芽孢杆菌SacB基因构建的底盘菌菌株及其应用，属于基因工程、酶工程及食品工程技术领域。本发明通过对枯草芽孢杆菌基因组上的SacB基因进行敲除，获得一种能够高效表达氨肽酶、碱性蛋白酶的枯草芽孢杆菌表达系统，为蛋白的高效表达奠定基础，推动氨肽酶、碱性蛋白酶的高效表达以及工业化生产。同时上述底盘菌株，在携带氨肽酶、碱性蛋白酶表达盒的情况下，分别经48H摇瓶发酵，发酵液氨肽酶酶活力高达1666.7U/mL，以出发菌株为对比酶活提升了30％左右；发酵液中碱性蛋白酶的酶活最高达到6348U/mL，以出发菌株为对比酶活提升了20％左右。
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公开(公告)号：CN116218750A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202211257312.1
申请日：2022-10-14
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，涉及工业微生物的育种，特别涉及一种底盘敲除菌株及其应用。所述解淀粉芽孢杆菌基因工程菌株，不表达解淀粉芽孢杆菌基因组上的六种胞外蛋白酶基因aprE，bpr，vpr，mpr，nprE，epr，胞外多糖基因簇eps，聚谷氨酸基因簇pgs和sacB基因构建底盘菌，并在此基础上异源表达角蛋白酶基因kerk、氨肽酶基因ywaD、碱性蛋白酶基因AprE，最终获得了一种解淀粉芽孢杆菌底盘菌株及能够高产角蛋白酶、氨肽酶以及碱性蛋白酶的生产菌株，为构建蛋白酶高产菌株提供了新的思路。
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