公开(公告)号：CN117821356B

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202410247775.2

申请日：2024-03-05

申请人： 天津科技大学 ,  浙江震元生物科技有限公司

发明人： 范晓光 ,  温昊妍 ,  樊伟明 ,  孟祥燕 ,  谢华丽 ,  陈燕娜 ,  屠建情

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12N15/70 ,  C12P13/04 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种提高L‑茶氨酸从头发酵产量和转化率的基因工程菌株、方法和应用。在一株从头发酵生产茶氨酸的工程菌E.coli E5的基础上，通过缺失乙酸激酶、丙酮酸氧化酶和D‑乳酸脱氢酶减少副产物乙酸和乳酸的形成，通过过表达柠檬酸合成酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，动态调控α‑酮戊二酸脱氢酶提高乙酰辅酶A向茶氨酸的代谢通量，通过过表达乙酰辅酶A合成酶使工程菌具备利用外源乙酸发酵生产茶氨酸的能力。构建的基因工程菌E.coli E12可以利用葡萄糖和乙酸双碳源发酵生产茶氨酸，茶氨酸产量和糖酸转化率分别为出发菌株的1.52倍和2.06倍，具备较好的工业应用潜力。

公开(公告)号：CN117821356A

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202410247775.2

申请日：2024-03-05

申请人： 天津科技大学 ,  浙江震元生物科技有限公司

发明人： 范晓光 ,  温昊妍 ,  樊伟明 ,  孟祥燕 ,  谢华丽 ,  陈燕娜 ,  屠建情

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12N15/70 ,  C12P13/04 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种提高L‑茶氨酸从头发酵产量和转化率的基因工程菌株、方法和应用。在一株从头发酵生产茶氨酸的工程菌E.coli E5的基础上，通过缺失乙酸激酶、丙酮酸氧化酶和D‑乳酸脱氢酶减少副产物乙酸和乳酸的形成，通过过表达柠檬酸合成酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，动态调控α‑酮戊二酸脱氢酶提高乙酰辅酶A向茶氨酸的代谢通量，通过过表达乙酰辅酶A合成酶使工程菌具备利用外源乙酸发酵生产茶氨酸的能力。构建的基因工程菌E.coli E12可以利用葡萄糖和乙酸双碳源发酵生产茶氨酸，茶氨酸产量和糖酸转化率分别为出发菌株的1.52倍和2.06倍，具备较好的工业应用潜力。

公开(公告)号：CN118389392B

公开(公告)日：2024-09-24

申请号：CN202410815839.4

申请日：2024-06-24

申请人： 天津科技大学 ,  浙江震元生物科技有限公司

发明人： 徐庆阳 ,  陈志超 ,  樊伟明 ,  孟祥燕 ,  陈燕娜 ,  朱文韬

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12P13/22 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种L‑苯丙氨酸生产菌株及其构建方法与应用，所述菌株是以菌株FG105作为底盘菌株，敲除katG基因和yhhY基因，敲除ybiC基因并在该位点整合来源于绿铜假单胞杆菌的pheC基因获得的，能够最大程度的使分支酸合成L‑苯丙氨酸，且阻断了L‑苯丙氨酸的降解与苯丙酮酸的降解，能够有效提高葡萄糖‑L‑苯丙氨酸之间的糖酸转化率，提高生产效益，降低生产成本。

公开(公告)号：CN118389392A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202410815839.4

申请日：2024-06-24

申请人： 天津科技大学 ,  浙江震元生物科技有限公司

发明人： 徐庆阳 ,  陈志超 ,  樊伟明 ,  孟祥燕 ,  陈燕娜 ,  朱文韬

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12P13/22 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种L‑苯丙氨酸生产菌株及其构建方法与应用，所述菌株是以菌株FG105作为底盘菌株，敲除katG基因和yhhY基因，敲除ybiC基因并在该位点整合来源于绿铜假单胞杆菌的pheC基因获得的，能够最大程度的使分支酸合成L‑苯丙氨酸，且阻断了L‑苯丙氨酸的降解与苯丙酮酸的降解，能够有效提高葡萄糖‑L‑苯丙氨酸之间的糖酸转化率，提高生产效益，降低生产成本。

公开(公告)号：CN117210515A

公开(公告)日：2023-12-12

申请号：CN202311422691.X

申请日：2023-10-30

申请人： 浙江震元生物科技有限公司

发明人： 谢华丽 ,  孟祥燕 ,  王培 ,  禹卫东 ,  陈燕娜 ,  王克非 ,  王瑞莹

IPC分类号： C12P13/04 ,  C12R1/19

摘要： 本申请提供一种高发酵单位、高糖酸转化率的L‑茶氨酸发酵工艺，属于以发酵方法合成氨基酸技术领域。将TH5‑2接种至摇瓶LB培养基中，振荡培养得到摇瓶种子；摇瓶种子通过火焰法接种至种子罐的种子培养基中，培养得到成熟的种子液，培养过程中以OUR和CER作为种子成熟的指标，确定最佳移种时间点；成熟种子液加压转接到发酵罐的发酵培养基中，代谢合成目标产物L‑茶氨酸。上述方案中KH2PO4和木糖用量显著减少。在50 L发酵罐水平24 h L‑茶氨酸的发酵单位达到102.8 g/L，糖酸转化率60.0%。

公开(公告)号：CN117844879A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202311419053.2

申请日：2023-10-30

申请人： 浙江震元生物科技有限公司

发明人： 樊伟明 ,  陈燕娜 ,  王克非 ,  王培 ,  孟祥燕 ,  谢华丽 ,  禹卫东

IPC分类号： C12P13/22 ,  C12R1/19

摘要： 本申请提供一种提高发酵单位与糖酸转化率的L‑酪氨酸发酵工艺，属于以发酵方法合成氨基酸技术领域。将TYR042接种至LB摇瓶灭菌培养基中，振荡培养得到摇瓶种子液；摇瓶种子液通过火焰法接种至种子罐的种子培养基中，培养得到成熟的种子液；成熟种子液加压转接到发酵罐的发酵培养基中，代谢合成目标产物L‑酪氨酸；发酵结束后，加热发酵液保温灭活菌体，冷却至室温后转移至纯化工序。上述方案中KH2PO4和木糖用量显著减少。在50 L发酵罐水平24 h L‑酪氨酸的发酵单位达到102.8 g/L，糖酸转化率60.0%。