一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法

    公开(公告)号:CN109156359B

    公开(公告)日:2022-04-12

    申请号:CN201811244722.6

    申请日:2018-10-24

    IPC分类号: A01H4/00

    摘要: 本发明提供了一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法,步骤如下:(1)外植体的获取:来源两种,一种为叶龄在20~50d的砀山酥梨组培苗叶片;另一种,先利用梨种无菌播种,再采用无菌实生苗的叶片作为外植体;(2)外植体的预处理:在梨叶片中脉横切2~4个刀口,再置于预培养培养基暗培养;(3)不定芽的诱导及增殖:将叶片接种至诱导培养基上暗培养,再转至光周期培养室诱导不定芽;剪下不定芽,接种至增殖培养基。本发明首次建立了遗传稳定的砀山酥梨叶片直接再生体系,叶片再生率达78.6%,平均每叶产生不定芽数3.8,褐化率0;此方法不仅可由梨叶片器官直接产生大量不定芽,还具有遗传稳定、周期短、成本低等优势。

    一种梨漆酶基因PbLAC1及其载体、宿主细胞和应用

    公开(公告)号:CN109207493A

    公开(公告)日:2019-01-15

    申请号:CN201811170973.4

    申请日:2018-10-09

    摘要: 本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域,提供了一种梨漆酶基因PbLAC1,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种植物超量表达载体,所述植物超量表达载体包括PbLAC1构建的pMD-18T-PbLAC1质粒。本发明还提供了一种遗传工程化的宿主细胞,所述宿主细胞包括PbLAC1基因序列。本发明还提供了上述梨漆酶基因PbLAC1在调控植物木质素合成及细胞壁发育中的应用。本发明的梨漆酶基因PbLAC1为完善植物木质素合成途径提供了新的证据,对水果品质改良以及作物其他关键农艺性状的改良也具有重要的理论及实践意义,同时,还为利用基因工程调控梨石细胞含量提供了新的途径。

    一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法

    公开(公告)号:CN108344814A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810063847.2

    申请日:2018-01-23

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/38

    摘要: 本发明提供了一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法,首先,采用高效液相色谱法测定待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度和5-羟基松柏醇的吸光度,其中,检测波长为243nm;所述高效液相色谱法采用梯度洗脱,所述梯度洗脱中洗脱剂包括甲醇和水;然后根据5-羟基松柏醛的标准曲线和待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度,得到所述待测样品中5-羟基松柏醛的浓度;根据5-羟基松柏醇的标准曲线和待测样品中5-羟基松柏醇的吸光度,得到所述待测样品中5-羟基松柏醇的浓度。本发明提供的方法能够有效地分离5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇,而且能够分别检测5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的浓度。

    一种松柏醇和松脂醇的同步检测方法

    公开(公告)号:CN109781905A

    公开(公告)日:2019-05-21

    申请号:CN201910196937.3

    申请日:2019-03-15

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/06

    摘要: 本发明涉及物质分离检测领域,提供了一种松柏醇和松脂醇的同步检测方法,首先,采用高效液相色谱法测定待测样品中的松柏醇与松脂醇的吸光度,其中,检测波长为280nm;所述高效液相色谱法采用梯度洗脱,梯度洗脱中的洗脱剂包括甲醇和水;然后根据松柏醇的标准曲线和待测样品中松柏醇的吸光度,得到所述待测样品中松柏醇的浓度;根据松脂醇的标准曲线和待测样品中松脂醇的吸光度,得到所述待测样品中松脂醇的浓度。本发明提供的方法能够有效分离待测样品中的松柏醇与松脂醇,并分别检测出松柏醇与松脂醇的相应浓度。

    一种梨漆酶基因PbLAC1及其载体、宿主细胞和应用

    公开(公告)号:CN109207493B

    公开(公告)日:2022-04-12

    申请号:CN201811170973.4

    申请日:2018-10-09

    摘要: 本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域,提供了一种梨漆酶基因PbLAC1,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种植物超量表达载体,所述植物超量表达载体包括PbLAC1构建的pMD‑18T‑PbLAC1质粒。本发明还提供了一种遗传工程化的宿主细胞,所述宿主细胞包括PbLAC1基因序列。本发明还提供了上述梨漆酶基因PbLAC1在调控植物木质素合成及细胞壁发育中的应用。本发明的梨漆酶基因PbLAC1为完善植物木质素合成途径提供了新的证据,对水果品质改良以及作物其他关键农艺性状的改良也具有重要的理论及实践意义,同时,还为利用基因工程调控梨石细胞含量提供了新的途径。

    一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法

    公开(公告)号:CN108344814B

    公开(公告)日:2019-10-18

    申请号:CN201810063847.2

    申请日:2018-01-23

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/38

    摘要: 本发明提供了一种5‑羟基松柏醛和5‑羟基松柏醇的同步检测方法,首先,采用高效液相色谱法测定待测样品中5‑羟基松柏醛的吸光度和5‑羟基松柏醇的吸光度,其中,检测波长为243nm;所述高效液相色谱法采用梯度洗脱,所述梯度洗脱中洗脱剂包括甲醇和水;然后根据5‑羟基松柏醛的标准曲线和待测样品中5‑羟基松柏醛的吸光度,得到所述待测样品中5‑羟基松柏醛的浓度;根据5‑羟基松柏醇的标准曲线和待测样品中5‑羟基松柏醇的吸光度,得到所述待测样品中5‑羟基松柏醇的浓度。本发明提供的方法能够有效地分离5‑羟基松柏醛和5‑羟基松柏醇,而且能够分别检测5‑羟基松柏醛和5‑羟基松柏醇的浓度。

    一种4-羟基肉桂醛类化合物的合成方法

    公开(公告)号:CN107573226A

    公开(公告)日:2018-01-12

    申请号:CN201710774353.0

    申请日:2017-08-31

    IPC分类号: C07C45/64 C07C47/277

    摘要: 本发明申请涉及有机合成与农业化学领域,具体公开了一种合成式II所示4-羟基肉桂醛类化合物的合成方法,该方法以4-羟基烯丙基苯为原料,首先进行羟基保护,然后利用2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)为氧化剂,水(H2O)为亲核试剂,在较温和条件下氧化烯丙基为α,β-不饱和醛(即肉桂醛结构),最后脱保护得到目标产物。本发明阐述了一种4-羟基肉桂醛类化合物的合成新方法,具有无过渡金属的参与,反应条件简单温和,产物收率高等特点,在农业化学特别是植物科学和生物能源转化领域有广泛的应用前景。

    一种松柏醇和松脂醇的同步检测方法

    公开(公告)号:CN109781905B

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN201910196937.3

    申请日:2019-03-15

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/06

    摘要: 本发明涉及物质分离检测领域,提供了一种松柏醇和松脂醇的同步检测方法,首先,采用高效液相色谱法测定待测样品中的松柏醇与松脂醇的吸光度,其中,检测波长为280nm;所述高效液相色谱法采用梯度洗脱,梯度洗脱中的洗脱剂包括甲醇和水;然后根据松柏醇的标准曲线和待测样品中松柏醇的吸光度,得到所述待测样品中松柏醇的浓度;根据松脂醇的标准曲线和待测样品中松脂醇的吸光度,得到所述待测样品中松脂醇的浓度。本发明提供的方法能够有效分离待测样品中的松柏醇与松脂醇,并分别检测出松柏醇与松脂醇的相应浓度。

    一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法

    公开(公告)号:CN109156359A

    公开(公告)日:2019-01-08

    申请号:CN201811244722.6

    申请日:2018-10-24

    IPC分类号: A01H4/00

    摘要: 本发明提供了一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法,步骤如下:(1)外植体的获取:来源两种,一种为叶龄在20~50d的砀山酥梨组培苗叶片;另一种,先利用梨种无菌播种,再采用无菌实生苗的叶片作为外植体;(2)外植体的预处理:在梨叶片中脉横切2~4个刀口,再置于预培养培养基暗培养;(3)不定芽的诱导及增殖:将叶片接种至诱导培养基上暗培养,再转至光周期培养室诱导不定芽;剪下不定芽,接种至增殖培养基。本发明首次建立了遗传稳定的砀山酥梨叶片直接再生体系,叶片再生率达78.6%,平均每叶产生不定芽数3.8,褐化率0;此方法不仅可由梨叶片器官直接产生大量不定芽,还具有遗传稳定、周期短、成本低等优势。