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公开(公告)号：CN106442794B
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201610921367.6
申请日：2016-10-21
申请人： 安徽农业大学
摘要： 本发明公开了一种气质联用分离检测松柏醇和芥子醇的方法，包括以下步骤：(1)将含有松柏醇和/或芥子醇的样品溶于色谱级吡啶中，得到样品溶液，然后对样品溶液进行衍生化处理，得待测样品；(2)对步骤(1)所得的待测样品使用气相色谱‑质谱联用技术进行分离检测。本发明应用气相色谱‑质谱联用的方法分离检测松柏醇和芥子醇，能够有效地分离检测松柏醇和芥子醇，并且确定了松柏醇保留时间和主要离子峰，以及芥子醇保留时间和主要离子峰，填补了NIST库中松柏醇和芥子醇衍生化后结构的空白，构建了松柏醇和芥子醇衍生化后GC‑MS检测质谱图，能够用来分离检测松柏醇和芥子醇，检测准确性高；且本发明工艺简单，容易实施，具有非常好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105766584B
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201610189333.2
申请日：2016-03-28
申请人： 安徽农业大学
摘要： 本发明公开了一种砀山酥梨外植体及提高组培苗成活率的方法，选择田间生长健壮、芽体饱满无病虫害的一年生中庸枝，通过人工培养获得5㎝‑10㎝的“新稍”，将其作为组培的外植体，然后再将该外植体经消毒及预处理、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单，充分利用冬季修剪去除的将丢弃的枝条。通过本发明人工方式获得大量“新稍”，提供组培所需足够的外植体，可进行砀山酥梨工厂化快速繁殖脱毒的优良种苗；且本发明组培方法成活率达96％。
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公开(公告)号：CN109161553A
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201811148204.4
申请日：2018-09-29
申请人： 安徽农业大学
摘要： 本发明公开了一种梨木质素合成调控PbBP基因，所述梨木质素合成调控PbBP基因具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，命名为PbBP，所述PbBP基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，核苷酸长度为1194bp，氨基酸长度为397个氨基酸。调控基因PbBP及其编码蛋白应用在植物中合成木质素基因表达方面。本发明PbBP基因具有负调控作用，可以直接通过抑制植物木质素合成基因的表达从而阻碍其木质素的生物合成，减缓细胞壁发育，降低木质化程度，以提高梨果肉品质。
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公开(公告)号：CN109156359A
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201811244722.6
申请日：2018-10-24
申请人： 安徽农业大学
IPC分类号： A01H4/00
摘要： 本发明提供了一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法，步骤如下：(1)外植体的获取：来源两种，一种为叶龄在20～50d的砀山酥梨组培苗叶片；另一种，先利用梨种无菌播种，再采用无菌实生苗的叶片作为外植体；(2)外植体的预处理：在梨叶片中脉横切2～4个刀口，再置于预培养培养基暗培养；(3)不定芽的诱导及增殖：将叶片接种至诱导培养基上暗培养，再转至光周期培养室诱导不定芽；剪下不定芽，接种至增殖培养基。本发明首次建立了遗传稳定的砀山酥梨叶片直接再生体系，叶片再生率达78.6％，平均每叶产生不定芽数3.8，褐化率0；此方法不仅可由梨叶片器官直接产生大量不定芽，还具有遗传稳定、周期短、成本低等优势。
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公开(公告)号：CN105400887A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510962652.8
申请日：2015-12-16
申请人： 安徽农业大学
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q2600/156
摘要： 一种筛选砀山酥梨适宜授粉梨品种的方法，具体步骤是：(1)提取授粉梨品种叶片的DNA；(2)进行SCoT-PCR反应，计算遗传相似系数，构建授粉梨品种之间的亲缘关系聚类图；(3)根据聚类分析结果，选取亲缘关系远、中、近的授粉品种树给砀山酥梨进行授粉；(4)对每个授粉品种所结成熟果实果肉组织的石细胞团数目及面积进行显微观察、计算；并测定石细胞含量；(5)通过步骤(4)的分析结果，筛选出最优亲缘关系授粉梨品种。本发明可以快速准确的从分子层面揭示不同梨品种资源间的亲缘关系，通过分析不同亲缘关系授粉品种对砀山酥梨果实石细胞大小及含量的影响，进而筛选出适宜亲缘关系的优良授粉品种，改善砀山酥梨果实的石细胞含量，提高砀山酥梨果实品质。
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公开(公告)号：CN109207493B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201811170973.4
申请日：2018-10-09
申请人： 安徽农业大学
摘要： 本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域，提供了一种梨漆酶基因PbLAC1，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种植物超量表达载体，所述植物超量表达载体包括PbLAC1构建的pMD‑18T‑PbLAC1质粒。本发明还提供了一种遗传工程化的宿主细胞，所述宿主细胞包括PbLAC1基因序列。本发明还提供了上述梨漆酶基因PbLAC1在调控植物木质素合成及细胞壁发育中的应用。本发明的梨漆酶基因PbLAC1为完善植物木质素合成途径提供了新的证据，对水果品质改良以及作物其他关键农艺性状的改良也具有重要的理论及实践意义，同时，还为利用基因工程调控梨石细胞含量提供了新的途径。
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公开(公告)号：CN109161553B
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN201811148204.4
申请日：2018-09-29
申请人： 安徽农业大学
摘要： 本发明公开了一种梨木质素合成调控PbBP基因，所述梨木质素合成调控PbBP基因具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，命名为PbBP，所述PbBP基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，核苷酸长度为1194bp，氨基酸长度为397个氨基酸。调控基因PbBP及其编码蛋白应用在植物中合成木质素基因表达方面。本发明PbBP基因具有负调控作用，可以直接通过抑制植物木质素合成基因的表达从而阻碍其木质素的生物合成，减缓细胞壁发育，降低木质化程度，以提高梨果肉品质。
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公开(公告)号：CN112695055A
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN202110103367.6
申请日：2021-01-26
申请人： 安徽农业大学
摘要： 本发明涉及园艺作物基因工程领域，提供了一种农杆菌介导桃遗传转化方法，包括如下步骤：遗传转化受体建立，农杆菌的培养与侵染液的配置，侵染与共培养，除菌与筛选培养，抗性愈伤组织GUS染色鉴定。本发明以愈伤组织为受体，以GUS基因为报告基因，通过农杆菌GV3101介导的方法进行桃的遗传转化，获得抗性愈伤组织，历经数次继代，经GUS染色确定为阳性愈伤组织。本发明方法可以显著提升农杆菌介导转化的成功率，同时此方法可以在桃基因工程、细胞工程、代谢工程以及桃遗传转化体系的建立中得到广泛应用。
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公开(公告)号：CN108419607A
公开(公告)日：2018-08-21
申请号：CN201810186277.6
申请日：2018-03-07
申请人： 安徽农业大学
摘要： 本发明公开了一种糙皮侧耳降解棉秸秆的工艺参数优化方法。该种糙皮侧耳降解棉秸秆的工艺参数优化方法包括制备PDA培养基；培养糙皮侧耳菌种；设置培养温度、料液比、秸秆粒度、表面活性剂剂量为实验因素，为每一个实验因素设置若干个水平；制备不同棉秸秆固体培养基，灭菌、接种、培养，测定棉秸秆固体培养基中木质素的含量，记录实验结果；依据上步实验结果，细化实验因素的水平，设计多组实验条件进行降解实验，测定各实验条件下剩余培养基的木质素含量，记录实验结果；根据分析结果，选择最佳水平组合，确定最佳的糙皮侧耳降解棉秸秆的工艺参数。该种方法，合理设置实验条件，从而完成对木质素降解工艺参数的整体考量。
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公开(公告)号：CN109156359B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201811244722.6
申请日：2018-10-24
申请人： 安徽农业大学
IPC分类号： A01H4/00
摘要： 本发明提供了一种砀山酥梨直接器官发生型再生途径的构建方法，步骤如下：(1)外植体的获取：来源两种，一种为叶龄在20～50d的砀山酥梨组培苗叶片；另一种，先利用梨种无菌播种，再采用无菌实生苗的叶片作为外植体；(2)外植体的预处理：在梨叶片中脉横切2～4个刀口，再置于预培养培养基暗培养；(3)不定芽的诱导及增殖：将叶片接种至诱导培养基上暗培养，再转至光周期培养室诱导不定芽；剪下不定芽，接种至增殖培养基。本发明首次建立了遗传稳定的砀山酥梨叶片直接再生体系，叶片再生率达78.6％，平均每叶产生不定芽数3.8，褐化率0；此方法不仅可由梨叶片器官直接产生大量不定芽，还具有遗传稳定、周期短、成本低等优势。
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