公开(公告)号：CN107422128A

公开(公告)日：2017-12-01

申请号：CN201710229608.5

申请日：2017-04-10

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 张运海 ,  李辉 ,  曹祖兵 ,  丁彪 ,  罗磊 ,  洪仁芸 ,  高迪 ,  刘成雪 ,  尚慧 ,  许腾腾

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/561

CPC classification number: G01N33/6803 ,  G01N33/561

Abstract: 本发明属于蛋白检测领域，具体涉及一种卵母细胞中蛋白的检测方法，包括如下步骤：S1，蛋白样的提取；S2，SDS-PAGE凝胶电泳流程；S3，转膜；S4，封闭；S5，孵育一抗；S6，孵育二抗；S7，显影。所述蛋白样的提取过程中添加玻璃珠用于充分提取蛋白的方法以及显影过程中自封袋的巧妙运用。相比以往的技术方法，本方法在卵母细胞样的处理方式和显影环节的优化方面实施了创造性的发明和改进，因此显著提高了蛋白检测的效率。本方法通过少量试验材料就能检测低丰度蛋白的方案，检测内参蛋白只需要1个卵母细胞就能测出条带，对于表达丰度较低的蛋白质需要40个左右就能出较清晰的条带，相比现有技术需要不低于200个卵母细胞，效率显著提高。

公开(公告)号：CN107422128B

公开(公告)日：2020-06-09

申请号：CN201710229608.5

申请日：2017-04-10

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 张运海 ,  李辉 ,  曹祖兵 ,  丁彪 ,  罗磊 ,  洪仁芸 ,  高迪 ,  刘成雪 ,  尚慧 ,  许腾腾

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/561

Abstract: 本发明属于蛋白检测领域，具体涉及一种卵母细胞中蛋白的检测方法，包括如下步骤：S1，蛋白样的提取；S2，SDS‑PAGE凝胶电泳流程；S3，转膜；S4，封闭；S5，孵育一抗；S6，孵育二抗；S7，显影。所述蛋白样的提取过程中添加玻璃珠用于充分提取蛋白的方法以及显影过程中自封袋的巧妙运用。相比以往的技术方法，本方法在卵母细胞样的处理方式和显影环节的优化方面实施了创造性的发明和改进，因此显著提高了蛋白检测的效率。本方法通过少量试验材料就能检测低丰度蛋白的方案，检测内参蛋白只需要1个卵母细胞就能测出条带，对于表达丰度较低的蛋白质需要40个左右就能出较清晰的条带，相比现有技术需要不低于200个卵母细胞，效率显著提高。