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公开(公告)号：CN103834695B
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201410085685.4
申请日：2012-05-07
申请人： 安徽大学
IPC分类号： C12P7/42 , C12N9/02 , C07C59/245 , C07C51/42 , C12R1/645
摘要： 本发明属化合物分离纯化技术领域，涉及一种微生物来源的新型真菌漆酶高效诱导化合物的发酵制备、分离纯化工艺，及其在诱导真菌漆酶生产方面的应用。其特征在于包括下述步骤：通过真菌发酵制备含有活性化合物的发酵液，经过萃取获得的活性化合物粗提物依次经不同层析树脂吸附，以不同浓度甲醇-水作为洗脱剂纯化精制，最终获得纯化的活性化合物分子；获得的活性化合物在1～500μM浓度下可以高效诱导漆酶生产真菌分泌胞外漆酶。本发明具有以下优点：诱导化合物来源于真菌次级代谢产物；诱导化合物工作浓度低，有效工作浓度为1～500μM；诱导化合物具有高的真菌漆酶诱导活性。
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公开(公告)号：CN1958789B
公开(公告)日：2010-07-07
申请号：CN200610146143.9
申请日：2006-11-11
申请人： 安徽大学
摘要： 一种真菌共培养发酵生产漆酶的方法，将栓菌AH28-2(Trametes sp.AH28-2)的菌悬液接种在发酵培养基中于22～37℃培养1～4天，然后加入木霉ZH1(Trichoderma sp.ZH1)的菌悬液继续培养5～10天，最后分离得到漆酶制剂，酶活达6,000U/L(愈创木酚法)。培养基为液体培养基，主要含一定量的碳源、氮源、钾与钠的磷酸盐、铜与铁的硫酸盐、腺嘌呤和维生素B等。本方法中不用芳香化合物和重金属离子诱导，安全、环保，酶活高且活力稳定。
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公开(公告)号：CN100497607C
公开(公告)日：2009-06-10
申请号：CN200610146145.8
申请日：2006-11-11
申请人： 安徽大学
摘要： 一种栓菌AH28-2固态发酵生产漆酶的方法，是将栓菌AH28-2菌株种液接种在经灭菌的固体培养基上于20～28℃条件下发酵培养20～30天。固体培养基由3～5份油料作物秸秆、1～3份粮食麸皮、1～2份花生壳粉和2～6倍质量的水组成，自然pH。发酵结束后加水浸提，经沉淀除杂、超滤浓缩和冻干得到块状漆酶，酶活在8000U/g(ABTS法)以上。
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公开(公告)号：CN1935992A
公开(公告)日：2007-03-28
申请号：CN200610096638.5
申请日：2006-10-13
申请人： 安徽大学
摘要： 一种灵芝漆酶的清洁高效生产方法，以申请人自主选育的树舌灵芝ST为出发菌株，将其先接种在发酵培养基中制备种液，再将种液接种到同样的发酵培养基中于22～35℃培养3～8天，分离后得到漆酶制剂。发酵培养基由0.1～5％的玉米粉，1～7％的粮食麸皮、1～7％的花生饼粉和余量水组成。本方法生产的漆酶活力在9000U/L以上(愈创木酚法)，该产量处于漆酶液态发酵生产法的国际领先水平。培养基为农副产品，无毒、廉价、无污染。本方法工艺简单、周期短、产率高，适于工业化生产。
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公开(公告)号：CN102220302A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110132525.7
申请日：2011-05-20
申请人： 安徽大学
摘要： 本发明通过基因定点突变的方法获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌，并可在将工程菌诱导表达后，获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础，通过PCR定点突变，获得突变基因。相对野生型β-葡萄糖苷酶蛋白，获得的突变蛋白的葡萄糖耐受浓度提高了13倍，而其他酶学性质没有变化，在工业上具有应用价值，其可以改善木质纤维素的发酵工艺，并且可生产出高达20-30％浓度的果汁。
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公开(公告)号：CN101045918A
公开(公告)日：2007-10-03
申请号：CN200610146145.8
申请日：2006-11-11
申请人： 安徽大学
摘要： 一种栓菌AH28－2固态发酵生产漆酶的方法，是将栓菌AH28－2菌株种液接种在经灭菌的固体培养基上于20～28℃条件下发酵培养20～30天。固体培养基由3～5份油料作物秸秆、1～3份粮食麸皮、1～2份花生壳粉和2～6倍质量的水组成，自然pH。发酵结束后加水浸提，经沉淀除杂、超滤浓缩和冻干得到块状漆酶，酶活在8000U/g(ABTS法)以上。
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公开(公告)号：CN101008005A
公开(公告)日：2007-08-01
申请号：CN200610038089.6
申请日：2006-01-24
申请人： 安徽大学
IPC分类号： C12N9/02
摘要： 一种灵芝漆酶制剂，由真菌灵芝(Ganoderma lucidum)通过斜面培养和两级发酵后制备得到的含有硫酸铜的液体漆酶制剂，硫酸铜的浓度为0.15～0.40mol/L。一级培养的培养基由葡萄糖、玉米粉、麸皮和水组成，培养条件为25～35℃、6～12天。深层发酵的培养基由麸皮、花生壳粉、玉米粉和水组成，培养条件为25～35℃、3～7天。本制剂酶活达32841.36U/L(以ABTS为底物)。稀释200～250倍后可广泛应用于纺织、造纸、食品、饮料等各个领域，还可用于加工生物传感器。
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公开(公告)号：CN102220302B
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201110132525.7
申请日：2011-05-20
申请人： 安徽大学
摘要： 本发明通过基因定点突变的方法获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌，并可在将工程菌诱导表达后，获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础，通过PCR定点突变，获得突变基因。相对野生型β-葡萄糖苷酶蛋白，获得的突变蛋白的葡萄糖耐受浓度提高了13倍，而其他酶学性质没有变化，在工业上具有应用价值，其可以改善木质纤维素的发酵工艺，并且可生产出高达20-30％浓度的果汁。
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公开(公告)号：CN101955922A
公开(公告)日：2011-01-26
申请号：CN201010248207.2
申请日：2010-08-02
申请人： 安徽大学
摘要： 本发明公开了一种葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶及其表达，该葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶是具有SEQ ID No：2所示的氨基酸序列的多肽，其基因编码序列如SEQ ID No：1所示。本发明还公开了含有该葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶的表达菌株。本发明所述的β-葡萄糖苷酶来自海洋未培养微生物，具有较好的葡萄糖耐受性，可以改善木质纤维素的发酵工艺，并且可生产出高达20-30％浓度的果汁；其葡萄糖抑制常数为1000mM，本发明葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶在pH6-9范围内具有好的稳定性。
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公开(公告)号：CN1807607A
公开(公告)日：2006-07-26
申请号：CN200610037937.1
申请日：2006-01-20
申请人： 安徽大学
摘要： 一种真菌共培养发酵生产漆酶的方法，将栓菌AH28－2(Trametes sp.AH28－2)的菌悬液接种在发酵培养基中于22～37℃培养1～4天，然后加入木霉ZH1(Trichoderma sp.ZH1)的菌悬液继续培养5～10天，最后分离得到漆酶制剂，酶活达6,000U/L(愈创木酚法)。培养基为液体培养基，主要含一定量的碳源、氮源、钾与钠的磷酸盐、铜与铁的硫酸盐、腺嘌呤和维生素B等。本方法中不用芳香化合物和重金属离子诱导，安全、环保，酶活高且活力稳定。
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