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公开(公告)号：CN103436607B
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201310335196.5
申请日：2013-08-02
Applicant: 山东农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡CLOCK基因不同转录本的扩增方法及其引物，鉴定每个转录本的特异序列，根据每个转录本的特异序列，设计特异性引物，对鸡mRNA进行扩增，扩增程序为：94℃预变性5min；35个循环：94℃变性30s，60.9℃退火30s，72℃延伸30s；72℃延伸5min；4℃保存；扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳结果和目的条带大小可以分辨出不同转录本，所述的特异性引物序列如SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：4所示。本发明针对每个转录本序列，设计了转录本特异引物，通过反转录PCR技术可以扩增出特定的转录本，对不同转录本功能的分析研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN104017888A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410276212.2
申请日：2014-06-19
Applicant: 山东农业大学
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6869 , C12Q2600/178 , C12Q2535/122
Abstract: 一种空肠弯曲杆菌感染相关鸡microRNA的鉴定方法，包括步骤如下：第一步，采集鸡胎粪，检测空肠弯曲杆菌阳性率；第二步，采集盲肠内容物用于空肠弯曲杆菌计数和盲肠组织样品用于RNA提取；第三步，提取样品总RNA，质检；混池；第四步，构建测序样本文库；第五步，进行Solexa测序；第六步，进行后续分析；第七步，预测其靶基因；第八步，根据microRNA及其靶基因信息得出与空肠弯曲杆菌cfu感染相关的microRNAs。本发明对其靶基因进行调控，间接参与很多免疫相关的信号通路，在鸡空肠弯曲杆菌感染中起着重要的调节作用，可能是抗空肠弯曲杆菌感染选育中的重要候选microRNAs，为今后我们深入研究microRNA在空肠弯曲杆菌中的作用机制奠定基础，为鸡的分子抗病育种提供理论基础和科学依据。
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公开(公告)号：CN104017888B
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201410276212.2
申请日：2014-06-19
Applicant: 山东农业大学
Abstract: 一种空肠弯曲杆菌感染相关鸡microRNA的鉴定方法，包括步骤如下：第一步，采集鸡胎粪，检测空肠弯曲杆菌阳性率；第二步，采集盲肠内容物用于空肠弯曲杆菌计数和盲肠组织样品用于RNA提取；第三步，提取样品总RNA，质检；混池；第四步，构建测序样本文库；第五步，进行Solexa测序；第六步，进行后续分析；第七步，预测其靶基因；第八步，根据microRNA及其靶基因信息得出与空肠弯曲杆菌cfu感染相关的microRNAs。本发明对其靶基因进行调控，间接参与很多免疫相关的信号通路，在鸡空肠弯曲杆菌感染中起着重要的调节作用，可能是抗空肠弯曲杆菌感染选育中的重要候选microRNAs，为今后我们深入研究microRNA在空肠弯曲杆菌中的作用机制奠定基础，为鸡的分子抗病育种提供理论基础和科学依据。
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公开(公告)号：CN103436607A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310335196.5
申请日：2013-08-02
Applicant: 山东农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡CLOCK基因不同转录本的扩增方法及其引物，鉴定每个转录本的特异序列，根据每个转录本的特异序列，设计特异性引物，对鸡mRNA进行扩增，扩增程序为：94℃预变性5min；35个循环：94℃变性30s，60.9℃退火30s，72℃延伸30s；72℃延伸5min；4℃保存；扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳结果和目的条带大小可以分辨出不同转录本，所述的特异性引物序列如SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：4所示。本发明针对每个转录本序列，设计了转录本特异引物，通过反转录PCR技术可以扩增出特定的转录本，对不同转录本功能的分析研究奠定基础。
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