一种牛支原体的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法

    公开(公告)号:CN111549157A

    公开(公告)日:2020-08-18

    申请号:CN202010424356.3

    申请日:2020-05-19

    摘要: 本发明具体涉及一种牛支原体的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。牛支原体是一种严重威胁牛养殖业的病原体,目前尚没有有效的治疗药物及疫苗,提供高效精确的检测方法对于牛支原体的防治具有重要意义。本发明研究表明P59蛋白编码基因序列在牛支原体种内高度保守且与其他物种相似度低,是一种良好的检测标志物。具体的,本发明还提供一种基于P59蛋白的SYBR Green I荧光定量PCR的检测方法,经验证,具有良好的检测特异性及灵敏度。该方法的建立为牛支原体病的快速、准确、高精度检测提供了新的诊断方法,为牛支原体的防控提供了一定保障。

    牛布鲁氏菌间接ELISA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103344770B

    公开(公告)日:2015-09-23

    申请号:CN201310296209.2

    申请日:2013-07-15

    摘要: 本发明公开了一种牛布鲁氏菌间接ELISA检测试剂盒,由以下试剂构成:(1)预包被ELISA反应板,由包被液、包被抗原和封闭液构成,包被抗原为Virb8蛋白;(2)PBST洗涤液;(3)酶标二抗;(4)终止液;(5)显色液。本发明涉及的Virb8蛋白仅在布鲁氏菌感染的早期特异性表达,该蛋白对应产生的抗体处于感染早期,且产生的抗体存在时间较长,因此,克隆表达布鲁氏菌Virb8蛋白并建立相应的间接ELISA检测方法能够更特异、灵敏地判断是否存在布鲁氏菌感染和定量感染后引起的抗体滴度,可以为布鲁氏菌病的血清学早期诊断提供一种快速准确的方法,对解决大批量样品的布鲁氏菌现场检测技术具有重要的现实意义。

    毒力减弱的NSP4突变基因、重组质粒与重组牛轮状病毒

    公开(公告)号:CN102703475A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210151023.3

    申请日:2012-05-16

    摘要: 本发明公开了一种毒力减弱的NSP4突变基因,其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种包含该毒力减弱的NSP4突变基因的重组质粒,还公开了一种包含该毒力减弱的NSP4突变基因的重组牛轮状病毒,构建方法为:将重组质粒与pcDNA3.1-T7RNAP重组质粒共转染恒河猴肾细胞MA104,然后接种野生型牛轮状病毒,利用反向遗传技术拯救变异病毒,即得毒力减弱的重组牛轮状病毒。本发明的重组牛轮状病毒,为国内外首次利用反向遗传技术获得的毒力减弱的BRV病毒株,与传统获得减毒株方法比较,本发明利用反向遗传技术并结合RNA干涉方法,成功获得毒力减弱的牛轮状病毒,为BRV减毒疫苗侯选株的获得提供了快捷途径。