利索-全球专利检索

  1. 登录
  2. 注册

搜索结果

33 条记录 (耗时 0.043 秒)

    基于Taqman探针的水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR快速检测方法
    1.
    发明公开
    基于Taqman探针的水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR快速检测方法 有权

    公开(公告)号：CN103215347A

    公开(公告)日：2013-07-24

    申请号：CN201310076856.2

    申请日：2013-03-12

    申请人： 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

    发明人： 贾俊涛 ,  吴振兴 ,  李正义 ,  祝素珍 ,  姜英辉 ,  马云 ,  张健

    IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/63

    摘要： 本发明公开了一种基于Taqman探针的麦氏弧菌（Vibriometschnikovii）的荧光定量PCR快速检测方法，采用麦氏弧菌特异性引物和TaqMan探针，即可对水产品中麦氏弧菌进行检测与监控 。其中上游引物Vmetschnikovii-1：5'-GCTATTCGAAAGTTTATTCTTC-3'，下游引物Vmetschnikovii-2：5'-CCAAGATGGTCGATATCATC-3'，特异性TaqMan探针为：Vmetschnikovii-3：5'-CGTAGGTCGTATGAAGTTCAATAGT-3'。检测麦氏弧菌的方法包括细菌基因组DNA的提取、麦氏弧菌的荧光定量PCR检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高。另外，本发明与普通PCR技术相比，不需要凝胶电泳拍照观察，实现了检测流程一体化封闭检测，避免了PCR产物对实验室的污染。

    一种牙鲆弹状病毒的检测方法
    4.
    发明公开
    一种牙鲆弹状病毒的检测方法 无效

    公开(公告)号：CN101323884A

    公开(公告)日：2008-12-17

    申请号：CN200810138644.1

    申请日：2008-07-25

    申请人： 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

    发明人： 岳志芹 ,  梁成珠 ,  刘荭 ,  徐彪 ,  朱来华 ,  邓明俊 ,  张健 ,  郑小龙 ,  肖西志 ,  辛学谦

    IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N21/64

    摘要： 本发明涉及水产动物病原的检测与诊断技术领域的一种牙鲆弹状病毒的检测方法，采用实时定量逆转录－聚合酶链式反应技术检测鱼类牙鲆弹状病毒，先设计特异性引物序列和荧光探针序列，然后提取待测样品的核酸；再进行实时定量逆转录－聚合酶链式反应，同时利用体外转录含有目的扩增片段的核糖核酸作为标准品绘制标准曲线；最后根据仪器软件计算得到的待测样品的循环阀值判定待测样品中是否含有牙鲆弹状病毒并进行定量；本发明可广泛应用于牙鲆、鲈鱼、大菱鲆、真鲷等养殖场的疫病监控及进出口贸易中牙鲆弹状病毒的检测，与现有技术相比，具有检测快速、效率高、定量准确、特异性强、检测范围广、灵敏度高等特点。

    基于Taqman探针的水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR快速检测方法
    5.
    发明授权
    基于Taqman探针的水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR快速检测方法 有权

    公开(公告)号：CN103215347B

    公开(公告)日：2014-11-12

    申请号：CN201310076856.2

    申请日：2013-03-12

    申请人： 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

    发明人： 贾俊涛 ,  吴振兴 ,  李正义 ,  祝素珍 ,  姜英辉 ,  马云 ,  张健

    IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/63

    摘要： 本发明公开了一种基于Taqman探针的麦氏弧菌（Vibrio metschnikovii）的荧光定量PCR快速检测方法，采用麦氏弧菌特异性引物和TaqMan探针，即可对水产品中麦氏弧菌进行检测与监控 。其中上游引物Vmetschnikovii-1：5'-GCTATTCGAAAGTTTATTCTTC-3'，下游引物Vmetschnikovii-2：5'-CCAAGATGGTCGATATCATC-3'，特异性TaqMan探针为：Vmetschnikovii-3：5'-CGTAGGTCGTATGAAGTTCAATAGT-3'。检测麦氏弧菌的方法包括细菌基因组DNA的提取、麦氏弧菌的荧光定量PCR检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高。另外，本发明与普通PCR技术相比，不需要凝胶电泳拍照观察，实现了检测流程一体化封闭检测，避免了PCR产物对实验室的污染。

    凝结芽孢杆菌的荧光定量PCR快速检测方法
    8.
    发明公开
    凝结芽孢杆菌的荧光定量PCR快速检测方法 失效

    公开(公告)号：CN102304559A

    公开(公告)日：2012-01-04

    申请号：CN201010110205.7

    申请日：2010-02-05

    申请人： 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

    发明人： 刘云国 ,  祝素珍 ,  王英超 ,  孙涛 ,  马维兴 ,  唐静 ,  张健 ,  马云

    IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/07

    摘要： 一种快速检测凝结芽孢杆菌的荧光定量PCR方法。首先提取待测样品增菌液的基因组DNA并稀释备用；再利用凝结芽孢杆菌基因组保守性DNA序列设计特异性引物；然后使用该引物对待测样品分离琼脂平板上可疑菌落的基因组DNA进行荧光定量PCR扩增和检测。其加样参数为：每个荧光定量PCR反应总体积为25μl，包括提取的基因组DNA，2μl；10×PCR Buffer，2.5μl；Mg2+1.5mmol/L；Tag酶1u；UNG酶1u；dNTP 0.1mmol/L 凝结芽孢杆菌特异性引物、探针各10pmol；最后加ddH2O至25μl；设置荧光定量PCR仪的程序参数为：37℃2min；95℃预变性30s，95℃变性5s，60℃退火40s，同时收集FAM荧光，40个循环；4℃保存。具有检测速度快、灵敏度高、成本低的优点。