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公开(公告)号：CN105315318B
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201510746918.5
申请日：2015-11-06
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种α‐L‐鼠李糖苷酶在制备5‑氟‑2'‑脱氧脲苷衍生物中的应用。5‑氟‑2'‑脱氧脲苷鼠李糖苷，包括3’‐O‐α‑L‑鼠李糖基‑5‑氟‐2'‐脱氧脲苷和5’‐O‐α‑L‑鼠李糖基‑5‑氟‐2'‐脱氧脲苷，分子式为C15H21FN2O9。本发明以5‑氟‑2'‑脱氧脲苷为原料，以廉价鼠李糖为糖基供体，采用微生物来源的α‑L‑鼠李糖苷酶原始酶合成5‑氟‑2'‑脱氧脲苷鼠李糖苷，该方法具有步骤简单，成本低廉，条件温和，环境友好等优点，产物与其原料5‑氟‑2'‑脱氧脲苷相比，含有鼠李糖基，增加了稳定性和靶向性，作为肿瘤靶向药物应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN105177085B
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201510497366.9
申请日：2015-08-13
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种区域选择性专一的转糖基α‑半乳糖苷酶的应用，步骤如下：将转糖基α‑半乳糖苷酶与对硝基苯‑α‑D‑半乳糖苷和乳糖溶液混合，配制成反应体系，反应后，终止反应，纯化，制得Globotriose。所述转糖基α‑半乳糖苷酶的表达基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用区域选择性专一的转糖基α‑半乳糖苷酶，以对硝基苯‑α‑D‑半乳糖苷为糖基供体，以乳糖为受体，一步合成寡糖Globotriose单一寡糖产物，避免了异构产物的生成。该方法底物价格便宜，反应步骤简单，产物纯化简便，真正适合于Globotriose的规模化合成及分离制备纯品，具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN108220310A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201810160652.X
申请日：2018-02-27
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种转糖基exo‑α‑唾液酸苷酶在制备6'唾液酸乳糖中的应用。利用区域选择性专一的转糖基exo‑α‑唾液酸苷酶，以寡聚唾液酸为糖基供体，以乳糖为糖基受体，一步合成6'唾液酸乳糖单一寡糖产物，不产生异构产物。该方法底物价格便宜，反应步骤简单，产物纯化简便，真正适合于6'唾液酸乳糖的规模化合成及分离制备纯品，可应用于添加到婴幼儿奶粉中，使其达到或接近母乳的营养功能，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN103276029B
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201310255797.5
申请日：2013-06-25
Applicant: 山东大学
IPC: C12P19/44
Abstract: 本发明涉及一种邻苯二酚半乳糖苷的制备方法，包括如下步骤：（1）采用磷酸缓冲液配制乳糖浓度为0.1M～0.3M，邻苯二酚浓度为0.05M～0.2M，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-半乳糖苷酶添加量为2μg～10μg/mL的反应体系；（2）将反应体系反应后，煮沸终止反应，离心，取上清液；（3）将上清液，经分离、干燥后，制得邻苯二酚半乳糖苷。采用经过突变的β-半乳糖苷酶合成邻苯二酚半乳糖苷，产物与其原料邻苯二酚相比，含有半乳糖基，增加了水溶性和稳定性，该化合物自身可作为化学合成中间体用以衍生合成新的高附加值化合物。
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公开(公告)号：CN103305491B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201310256580.6
申请日：2013-06-25
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种β-半乳糖苷酶，尤其涉及一种能糖基化白藜芦醇的β-半乳糖苷酶，属于酶蛋白工程技术领域。该酶是通过定向进化天然β-半乳糖苷酶获得的突变酶，具有新的转糖基受体底物特异性，能对天然酶无法糖基化的白藜芦醇分子进行糖基化，可作为半乳糖基化修饰的工具酶，在酚类化合物加工及药物分子修饰等方面应用前景广阔。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103190478B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201310121813.1
申请日：2013-04-09
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及含Levan果聚糖的酸奶的制备方法，包括如下步骤：（1）将产Levan蔗糖酶的菌株经活化培养和产酶发酵培养制得发酵培养液；（2）离心收集发酵液上清或者菌体；（3）向发酵液上清中添加硫酸铵粉末，离心，收集蛋白沉淀；或者，将菌体经超声波破碎离心后，上清液中添加硫酸铵粉末，离心，收集蛋白沉淀；纯化后制得纯酶蛋白Levansucrase；（4）向原料奶中添加蔗糖和纯酶蛋白Levansucrase，然后接种乳酸杆菌，经发酵，制得含Levan果聚糖的酸奶。本发明利用微生物Levan蔗糖酶在酸奶发酵的同时生成Levan果聚糖，从而直接获得含有功能性多糖的酸奶新品种，避免了复杂的多糖纯化工艺，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN103275953B
公开(公告)日：2014-06-18
申请号：CN201310257432.6
申请日：2013-06-25
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶。本发明提供一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶，氨基酸序列如SEQ？ID？No.1所示；本发明还提供了编码该转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶的基因。本发明所述的转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶出现了新的受体选择性，能对天然β-半乳糖苷酶难以糖基化或无法糖基化的酚类化合物进行转糖反应，可作为酚类化合物及相关药物分子修饰和改性的有力工具，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN101856143B
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201010173582.5
申请日：2010-05-17
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种培养基，尤其涉及一种培养烟碱降解微生物的烟叶浸提液培养基及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供的烟叶浸提液培养基，其主要成分含有烟叶浸提液，制备方法为将烟叶碎片和水按照质量体积比10～80∶1的比例混合，煮沸25～35分钟，抽滤定容，即得烟叶浸提液。本发明还提供烟叶浸提液培养基在培养烟碱降解微生物方面的应用，该培养基适用于多种烟碱降解微生物的培养，并且可以获得更大的生物量，同时提高烟碱降解能力。本发明所述培养基配制简单、使用方便、成本低、适合工业化应用。
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公开(公告)号：CN102250958B
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201110190960.5
申请日：2011-07-08
Applicant: 山东大学
CPC classification number: Y02E50/343
Abstract: 本发明涉及一种体外酶反应生成的类胡萝卜素的快速提取方法，属于生物工程技术领域。该方法步骤如下：将表达类胡萝卜素代谢相关酶的重组大肠杆菌菌体超声波破壁，然后加入相应的反应物质，超声波混匀，避光密闭振荡反应；再向混合液中加入10％SDS溶液，加入NaAc溶液，振荡离心，弃上清液，得蛋白质沉淀；向蛋白质沉淀中加入丙酮，搅拌，使沉淀均匀分散，然后经离心后，取上清液，滤膜过滤后，经检测，即得类胡萝卜素的丙酮溶液。本发明通过使类胡萝卜素与蛋白质共沉淀，将类胡萝卜素从大体积的体外反应溶液中浓缩到少量蛋白质沉淀中，从而减少了后续分离纯化过程。
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公开(公告)号：CN102321645A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110226051.2
申请日：2011-08-08
Applicant: 山东大学
Abstract: 本发明涉及一种α-L-鼠李糖苷酶基因，尤其涉及一种来源于链格孢的α-L-鼠李糖苷酶基因及其应用，属于基因工程技术领域。一种α-L-鼠李糖苷酶基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。由上述α-L-鼠李糖苷酶基因编码的α-L-鼠李糖苷酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明所述α-L-鼠李糖苷酶基因克隆到pPIC9K表达载体上，转化毕氏酵母GS115，甲醇诱导表达，发酵液产酶量426mg/L。该α-L-鼠李糖苷酶基因在毕氏酵母中表达的重组酶能够高效水解柑橘类果汁中的主要苦味物质柚苷，并且能够以鼠李糖为供体、多种物质为受体合成转糖基产物，在食品、制药和化工行业有重要的潜在应用价值。
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