一种分析蛋白O-糖基化位点的方法

    公开(公告)号:CN104198613A

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201410475759.5

    申请日:2014-09-17

    申请人: 山东大学

    摘要: 本发明涉及一种分析蛋白O-糖基化位点的方法,步骤如下:(1)将蛋白质组样品或单个蛋白样品经内切酶酶切后,再经内切糖苷酶和外切糖苷酶酶切,制得带有GalNAc糖标签的肽段和非糖肽的组学蛋白样品或单个蛋白样品;(2)上样于榴莲凝集素色谱柱进行分离,制得组学蛋白样品;(3)将单个蛋白样品或组学蛋白样品使用C18反相色谱柱分离,然后在正离子模式下用高分辨质谱仪进行检测,得到高分辨质谱图;(4)将得到的质谱数据进行处理,通过搜库结果获得蛋白糖基化位点信息。本发明建立了单个蛋白和组学蛋白样品中糖蛋白的O-糖基化位点的检测方法,能更快速、更准确、更全面的得到位点信息。

    一种低分子肝素部分降解产物的离子对反相色谱质谱联用检测方法

    公开(公告)号:CN103454372B

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201310409051.5

    申请日:2013-09-10

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: G01N30/89

    摘要: 本发明涉及一种低分子肝素部分降解产物的离子对反相色谱与高分辨质谱联用检测方法,它利用离子对反相色谱与高分辨质谱进行联用检测低分子肝素部分降解产物的各个组分,通过离子对反相色谱分离样品中各组分,并通过高分辨质谱获得精确的分子量,计算出各组分的糖链序列信息,包括两端结构、糖链长度、乙酰基及硫酸基取代数量,从而对各低分子肝素部分降解产物的结构进行比较精细的表征。本发明可以检测低分子肝素部分降解产物的两端结构、糖链长度、乙酰基及硫酸基取代数量,解决了现有技术中仅能获得低分子肝素部分降解的紫外吸收图谱的问题,对于提高肝素的检测水平、保障药品安全具有极大的实用价值。

    一种分析蛋白O-糖基化位点的方法

    公开(公告)号:CN104198613B

    公开(公告)日:2016-04-06

    申请号:CN201410475759.5

    申请日:2014-09-17

    申请人: 山东大学

    摘要: 本发明涉及一种分析蛋白O-糖基化位点的方法,步骤如下:(1)将蛋白质组样品或单个蛋白样品经内切酶酶切后,再经内切糖苷酶和外切糖苷酶酶切,制得带有GalNAc糖标签的肽段和非糖肽的组学蛋白样品或单个蛋白样品;(2)上样于榴莲凝集素色谱柱进行分离,制得组学蛋白样品;(3)将单个蛋白样品或组学蛋白样品使用C18反相色谱柱分离,然后在正离子模式下用高分辨质谱仪进行检测,得到高分辨质谱图;(4)将得到的质谱数据进行处理,通过搜库结果获得蛋白糖基化位点信息。本发明建立了单个蛋白和组学蛋白样品中糖蛋白的O-糖基化位点的检测方法,能更快速、更准确、更全面的得到位点信息。

    人绒毛膜促性腺激素肿瘤标志物过糖基化修饰的检测试剂盒

    公开(公告)号:CN105158485A

    公开(公告)日:2015-12-16

    申请号:CN201510507018.5

    申请日:2015-08-17

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: G01N33/76 G01N33/574

    摘要: 本发明涉及一种人绒毛膜促性腺激素(hCG)肿瘤标志物过糖基化修饰(hCG-H)的检测试剂盒。它利用磁珠结合一种亲和力受糖基化变化影响最小的抗体(MCA-A)作为捕获抗体对待检样品中总hCG进行捕获,利用一种受糖基化变化影响最显著的抗体(MCA-B)和另一种受糖基化影响较小的抗体(MCA-C)同时对样品中hCG的蛋白总量和N-糖基化修饰程度进行检测,从而实现对肿瘤生物标志物的鉴定。本发明大大提高了免疫诊断方法的准确性,灵敏度和特异性,对于实际样品中肿瘤标志物过糖基化修饰的检测具有极大的实用价值。

    一种低分子肝素的离子对反相色谱质谱联用检测方法

    公开(公告)号:CN102759596B

    公开(公告)日:2014-08-20

    申请号:CN201210235395.4

    申请日:2012-07-09

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: G01N30/89

    摘要: 本发明涉及一种低分子肝素的离子对反相色谱与高分辨质谱联用检测方法,该方法利用离子对反相色谱与高分辨质谱进行联用检测低分子肝素的各个组分,通过离子对反相色谱分离样品中各主要组分,并通过高分辨质谱获得精确的分子量,计算出其糖链序列信息,包括两端结构、糖链长度、乙酰基及硫酸基取代数量,从而对低分子肝素的结构进行比较精细的表征。本发明对于提高肝素的检测水平、保障药品安全具有极大的实用价值。

    一种低分子肝素的离子对反相色谱质谱联用检测方法

    公开(公告)号:CN102759596A

    公开(公告)日:2012-10-31

    申请号:CN201210235395.4

    申请日:2012-07-09

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: G01N30/89

    摘要: 本发明涉及一种低分子肝素的离子对反相色谱与高分辨质谱联用检测方法,该方法利用离子对反相色谱与高分辨质谱进行联用检测低分子肝素的各个组分,通过离子对反相色谱分离样品中各主要组分,并通过高分辨质谱获得精确的分子量,计算出其糖链序列信息,包括两端结构、糖链长度、乙酰基及硫酸基取代数量,从而对低分子肝素的结构进行比较精细的表征。本发明对于提高肝素的检测水平、保障药品安全具有极大的实用价值。

    一种低分子肝素部分降解产物的离子对反相色谱质谱联用检测方法

    公开(公告)号:CN103454372A

    公开(公告)日:2013-12-18

    申请号:CN201310409051.5

    申请日:2013-09-10

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: G01N30/89

    摘要: 本发明涉及一种低分子肝素部分降解产物的离子对反相色谱与高分辨质谱联用检测方法,它利用离子对反相色谱与高分辨质谱进行联用检测低分子肝素部分降解产物的各个组分,通过离子对反相色谱分离样品中各组分,并通过高分辨质谱获得精确的分子量,计算出各组分的糖链序列信息,包括两端结构、糖链长度、乙酰基及硫酸基取代数量,从而对各低分子肝素部分降解产物的结构进行比较精细的表征。本发明可以检测低分子肝素部分降解产物的两端结构、糖链长度、乙酰基及硫酸基取代数量,解决了现有技术中仅能获得低分子肝素部分降解的紫外吸收图谱的问题,对于提高肝素的检测水平、保障药品安全具有极大的实用价值。