公开(公告)号：CN114136944B

公开(公告)日：2023-10-24

申请号：CN202111506102.7

申请日：2021-12-10

Applicant: 山东理工大学

Inventor： 李发兰 ,  王晓阳 ,  孙霞 ,  郭业民 ,  张皖齐

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明提供了一种检测牛奶中卡那霉素(KAN)残留的荧光适配体传感器制备方法，属于食品安全检测领域。本发明包括特定荧光波长DNA‑银纳米簇(DNA‑AgNCs)合成和荧光传感器构建。特定的DNA模板可以产生红色荧光的DNA‑AgNCs，减少牛奶固有成分产生的相对短的波长荧光信号干扰。利用红色荧光较强穿透能力进一步减少干扰信号的影响。利用DNA‑AgNCs和金纳米颗粒(AuNPs)的荧光共振能量转移(FRET)构建荧光传感方法。由于静电相互作用，DNA被吸附在AuNPs上。DNA‑AgNCs与AuNPs距离的减小会产生FRET，从而导致DNA‑AgNCs荧光被猝灭。当加入KAN时，适配体和KAN可以特异性结合，导致DNA‑AgNCs和AuNPs之间的静电相互作用减弱。DNA‑AgNCs和AuNPs之间的FRET将降低，致使DNA‑AgNCs的荧光信号得到恢复。该传感器对KAN的检测限低至22.6nM，具有令人满意的特异性和灵敏度。

公开(公告)号：CN117723525A

公开(公告)日：2024-03-19

申请号：CN202410035044.1

申请日：2024-01-10

Applicant: 山东理工大学

Inventor： 李发兰 ,  张皖齐 ,  孙志聪 ,  孙霞 ,  郭业民 ,  杨青青 ,  张妍妍

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明提供了一种检测牛奶中链霉素的比率型荧光适配体传感器制备方法，属于食品安全检测领域。本发明包括链霉素（STR）特异性适配体的筛选和比率型荧光传感器构建。首次采用磁性氧化石墨烯筛选技术获得STR适配体（Apt），根据二级结构和分子模拟对接分析结合位点，截断获得与靶标亲和力最佳的Apt52。利用Apt52修饰的碳量子点（CQDs）为参比信号，AgNCs‑SMP@ZIF‑8为响应信号构建荧光传感方法判定被检样中是否含有链霉素。适配体特异性结合靶标导致AgNCs‑SMP@ZIF‑8暴露快速吸附大量Cu2+富集，AgNCs‑SMP@ZIF‑8的荧光信号被猝灭，CQDs的荧光信号始终保持稳定，通过AgNCs‑SMP@ZIF‑8和CQDs的荧光信号比值变化检测链霉素残留。该传感器对STR的检测限为0.978 nM，具有令人满意的特异性和灵敏度。

公开(公告)号：CN114136944A

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN202111506102.7

申请日：2021-12-10

Applicant: 山东理工大学

Inventor： 李发兰 ,  王晓阳 ,  孙霞 ,  郭业民 ,  张皖齐

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明提供了一种检测牛奶中卡那霉素(KAN)残留的荧光适配体传感器制备方法，属于食品安全检测领域。本发明包括特定荧光波长DNA‑银纳米簇(DNA‑AgNCs)合成和荧光传感器构建。特定的DNA模板可以产生红色荧光的DNA‑AgNCs，减少牛奶固有成分产生的相对短的波长荧光信号干扰。利用红色荧光较强穿透能力进一步减少干扰信号的影响。利用DNA‑AgNCs和金纳米颗粒(AuNPs)的荧光共振能量转移(FRET)构建荧光传感方法。由于静电相互作用，DNA被吸附在AuNPs上。DNA‑AgNCs与AuNPs距离的减小会产生FRET，从而导致DNA‑AgNCs荧光被猝灭。当加入KAN时，适配体和KAN可以特异性结合，导致DNA‑AgNCs和AuNPs之间的静电相互作用减弱。DNA‑AgNCs和AuNPs之间的FRET将降低，致使DNA‑AgNCs的荧光信号得到恢复。该传感器对KAN的检测限低至22.6nM，具有令人满意的特异性和灵敏度。

公开(公告)号：CN118655306A

公开(公告)日：2024-09-17

申请号：CN202410894604.9

申请日：2024-08-16

Applicant: 山东理工大学

Inventor： 李发兰 ,  张皖齐 ,  孙志聪 ,  孙霞 ,  郭业民 ,  张妍妍 ,  杨青青

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/543 ,  C12Q1/682

Abstract: 本发明提供了一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法，属于食品安全检测领域。本发明包括链霉素特异性适配体的定点突变优化和侧向层析适配体试纸条的开发。定点突变STR适配体的酶切位点保证酶反应的进行，根据纳米金比色法测定结合饱和曲线获得亲和力最佳的适配体Apt52‑0。设计包含Apt52‑0的发卡结构，结合Vent®exo‑DNA聚合酶和Nt.AlwI切刻内切酶辅助信号放大实现靶标循环和目的序列置换，制备扩增探针和捕获探针实现信号放大和目的序列与扩增探针的同时识别，开发酶循环和多重AuNPs复合探针的二次信号放大侧向层析适配体试纸条。基于适配体试纸条检测STR的视觉检出限为25 nM，通过Image J软件分析的检出限为17.6 nM，为检测STR提供了一种实惠、高效、简便的手段。

公开(公告)号：CN118624885A

公开(公告)日：2024-09-10

申请号：CN202410894626.5

申请日：2024-07-04

Applicant: 山东理工大学

Inventor： 李发兰 ,  孙志聪 ,  张皖齐 ,  孙霞 ,  郭业民 ,  张妍妍 ,  杨青青

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58 ,  C12N15/115 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种头孢菌素类抗生素广谱适配体筛选及传感器制备方法，属于食品安全检测领域。本发明中以头孢匹林、头孢喹肟、头孢噻呋为混合靶标，以牛奶稀释液作为筛选环境，通过氧化石墨烯‑SELEX筛选以及序列优化，得到头孢菌素类抗生素广谱适配体Apt‑93，其序列为TCGTCGACGGATCCATGGCACATGGATACTAGCGAACGCATGCATGCGTCGA，具有较高亲和力和特异性。以该适配体Apt‑93为识别元件，以链霉亲和素磁珠为载体，结合荧光共振能力转移技术和G‑四链体DNA模拟酶特性，构建灵敏度高、实际应用性能好的DNA Walker双模式适配体传感器，该传感器检出限为8.10 nM，牛奶加标实验显示回收率为98.67%~101.72%，且特异性较好，成功应用于牛奶中头孢菌素类抗生素的残留检测。