一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法

    公开(公告)号:CN118655306A

    公开(公告)日:2024-09-17

    申请号:CN202410894604.9

    申请日:2024-08-16

    摘要: 本发明提供了一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法,属于食品安全检测领域。本发明包括链霉素特异性适配体的定点突变优化和侧向层析适配体试纸条的开发。定点突变STR适配体的酶切位点保证酶反应的进行,根据纳米金比色法测定结合饱和曲线获得亲和力最佳的适配体Apt52‑0。设计包含Apt52‑0的发卡结构,结合Vent®exo‑DNA聚合酶和Nt.AlwI切刻内切酶辅助信号放大实现靶标循环和目的序列置换,制备扩增探针和捕获探针实现信号放大和目的序列与扩增探针的同时识别,开发酶循环和多重AuNPs复合探针的二次信号放大侧向层析适配体试纸条。基于适配体试纸条检测STR的视觉检出限为25 nM,通过Image J软件分析的检出限为17.6 nM,为检测STR提供了一种实惠、高效、简便的手段。

    一种头孢菌素类抗生素广谱适配体筛选及传感器制备方法

    公开(公告)号:CN118624885A

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202410894626.5

    申请日:2024-07-04

    摘要: 本发明公开了一种头孢菌素类抗生素广谱适配体筛选及传感器制备方法,属于食品安全检测领域。本发明中以头孢匹林、头孢喹肟、头孢噻呋为混合靶标,以牛奶稀释液作为筛选环境,通过氧化石墨烯‑SELEX筛选以及序列优化,得到头孢菌素类抗生素广谱适配体Apt‑93,其序列为TCGTCGACGGATCCATGGCACATGGATACTAGCGAACGCATGCATGCGTCGA,具有较高亲和力和特异性。以该适配体Apt‑93为识别元件,以链霉亲和素磁珠为载体,结合荧光共振能力转移技术和G‑四链体DNA模拟酶特性,构建灵敏度高、实际应用性能好的DNA Walker双模式适配体传感器,该传感器检出限为8.10 nM,牛奶加标实验显示回收率为98.67%~101.72%,且特异性较好,成功应用于牛奶中头孢菌素类抗生素的残留检测。

    一种同时检测AFB1和ZEN的双靶适配体传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN114609209B

    公开(公告)日:2024-06-25

    申请号:CN202210217351.2

    申请日:2022-03-07

    摘要: 本发明公开了一种同时检测黄曲霉毒素B1(AFB1)和玉米赤霉烯酮毒素(ZEN)的双靶适配体传感器及其制备方法,涉及生物传感器技术领域;引入二硫化钼‑还原性氧化石墨烯(MoS2‑rGO)纳米材料提高工作电极的生物相容性,比表面积和导电性能,运用6‑(二茂铁基)己硫醇(FC6S)和硫堇(Thi)通过纳米金(AuNPs)分别标记AFB1适配体(DNA1)和ZEN适配体(DNA2),构建的双靶标适配体功能化探针通过金硫键固定到电极上,该探针可在差分脉冲伏安法(DPV)不同电位下产生互不干扰的可区分电流峰以实现对AFB1和ZEN的同时检测;构建的传感器具有较好的重现性、抗干扰性和稳定性,在实际样品检测中获得了满意的回收率。

    一种比率型电化学适配体传感器的制备方法

    公开(公告)号:CN115201296B

    公开(公告)日:2024-04-05

    申请号:CN202210856605.5

    申请日:2022-07-21

    摘要: 本发明属于生物传感器技术领域,公开了一种可检测牛奶中卡那霉素(KAN)的比率型电化学适配体传感器制备及使用方法。本发明制备的比率型电化学适配体传感器基于二茂铁(Fc)标记引物和石墨炔‑亚甲蓝(GDY‑MB)纳米复合材料。GDY‑MB纳米复合材料修饰在电极上会产生MB电信号,设计5'端标记Fc的引物可以与适配体杂交形成互补双链,当KAN与适配体特异性结合后会释放出游离引物形成发夹结构,导致Fc接近电极表面引起Fc电信号增强。引入核酸外切酶I(Exo I)切割单链适配体以达到目标物循环扩增放大信号作用。引物3'端进行磷酸化修饰以保护发夹结构不被Exo I切割。进一步修饰壳聚糖‑氧化锡锑(CS‑ATO)和AuNPs起到双重信号放大作用,实现了卡那霉素的高灵敏检测。

    一种检测辣椒素的竞争型免疫传感器的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN111579626B

    公开(公告)日:2022-06-28

    申请号:CN202010471185.X

    申请日:2020-05-29

    摘要: 一种检测辣椒素的竞争型免疫传感器的制备方法及应用,涉及一种新的检测食用植物油掺伪的生物传感器制备方法,其特征是,首先用四氧化三铁‑氧化铈对玻碳电极进行改性,可以加快电子传递速率从而提高传感器电信号;后将辣椒素类物质抗原固定在改性后的玻碳电极表面,滴加BSA封闭非特异性位点;滴加不同浓度辣椒素类物质标准品与抗体的混合溶液,随着辣椒素标准品的浓度增大,辣椒素类物质抗体与抗原的结合率下降,电信号增强,从而得到的标准曲线计算并出标准溶液中辣椒素类物质的含量;本发明竞争型免疫传感器灵敏度高、稳定性好,可用于食用植物油中的掺伪标志物辣椒素的快速检测。

    一种检测辣椒素的竞争型免疫传感器的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN111579626A

    公开(公告)日:2020-08-25

    申请号:CN202010471185.X

    申请日:2020-05-29

    摘要: 一种检测辣椒素的竞争型免疫传感器的制备方法及应用,涉及一种新的检测食用植物油掺伪的生物传感器制备方法,其特征是,首先用四氧化三铁-氧化铈对玻碳电极进行改性,可以加快电子传递速率从而提高传感器电信号;后将辣椒素类物质抗原固定在改性后的玻碳电极表面,滴加BSA封闭非特异性位点;滴加不同浓度辣椒素类物质标准品与抗体的混合溶液,随着辣椒素标准品的浓度增大,辣椒素类物质抗体与抗原的结合率下降,电信号增强,从而得到的标准曲线计算并出标准溶液中辣椒素类物质的含量;本发明竞争型免疫传感器灵敏度高、稳定性好,可用于食用植物油中的掺伪标志物辣椒素的快速检测。

    一种基于G-四联体的双模式卡那霉素适配体传感器的制备方法

    公开(公告)号:CN114518359B

    公开(公告)日:2024-08-20

    申请号:CN202210218468.2

    申请日:2022-03-08

    摘要: 本发明属于生物传感器技术领域,公开了一种可检测牛奶中卡那霉素的双模式适配体传感器的制备及使用方法。本发明利用靶标和适配体的特异性结合释放游离的互补核酸链(Pr),Pr与挂锁探针在DNA连接酶和聚合酶的作用下进行滚环扩增(RCA)产生大量G‑四联体。基于G‑四联体与血红素复合能够改变3,3',5,5'‑四甲基联苯胺显色效果,实现卡那霉素的视觉检测。基于G‑四联体与亚甲基蓝的强吸附作用,实现卡那霉素的电化学检测,同时在电极表面修饰多壁碳纳米管和金纳米颗粒,以增加电活性面积和电导率。本发明利用RCA不仅放大了比色视觉信号,还结合纳米复合材料实现了电化学信号的双重放大,实现了卡那霉素可视化和高灵敏的双模式检测。

    一种检测链霉素的比率型荧光适配体传感器的制备方法

    公开(公告)号:CN117723525A

    公开(公告)日:2024-03-19

    申请号:CN202410035044.1

    申请日:2024-01-10

    IPC分类号: G01N21/64

    摘要: 本发明提供了一种检测牛奶中链霉素的比率型荧光适配体传感器制备方法,属于食品安全检测领域。本发明包括链霉素(STR)特异性适配体的筛选和比率型荧光传感器构建。首次采用磁性氧化石墨烯筛选技术获得STR适配体(Apt),根据二级结构和分子模拟对接分析结合位点,截断获得与靶标亲和力最佳的Apt52。利用Apt52修饰的碳量子点(CQDs)为参比信号,AgNCs‑SMP@ZIF‑8为响应信号构建荧光传感方法判定被检样中是否含有链霉素。适配体特异性结合靶标导致AgNCs‑SMP@ZIF‑8暴露快速吸附大量Cu2+富集,AgNCs‑SMP@ZIF‑8的荧光信号被猝灭,CQDs的荧光信号始终保持稳定,通过AgNCs‑SMP@ZIF‑8和CQDs的荧光信号比值变化检测链霉素残留。该传感器对STR的检测限为0.978 nM,具有令人满意的特异性和灵敏度。

    一种有机磷农药的比率型荧光检测方法

    公开(公告)号:CN117269121A

    公开(公告)日:2023-12-22

    申请号:CN202310513325.9

    申请日:2023-05-09

    IPC分类号: G01N21/64 G01N21/01

    摘要: 本发明提供了一种检测蔬菜中有机磷农药(OPs)残留的荧光传感器制备方法,属于食品安全检测领域。不存在OPs时,乙酰胆碱酯酶(AChE)催化乙酰胆碱(ACh)产生胆碱,进而在胆碱氧化酶修饰的四苯基乙烯(ChOx)(催化下TPE‑Fc,)生成过氧化氢氧化成其氧化态(H2OTPE2)。H‑2FcO2+将二茂铁。TPE‑Fc+具有更大的聚集倾向,产生聚集诱导发光(AIE),青色荧光发生增强。同时,二茂铁氧化过程产生羟基自由基(•OH),破坏了谷胱甘肽为模板合成的金纳米团簇(GSH‑AuNCs),导致GSH‑AuNCs的橙色荧光降低。OPs存在会抑制这一过程,随着浓度的增加,青色荧光减弱,橙色荧光增强,从而实现OPs的可视化检测。此外,使用智能手机对红色(R)、绿色(G)和蓝色(B)数值进行识别,建立了RGB标准曲线并开发了微信小程序用于OPs残留浓度的快速检测,结果准确可靠。

    一种同时检测AFB1和ZEN的双靶适配体传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN114609209A

    公开(公告)日:2022-06-10

    申请号:CN202210217351.2

    申请日:2022-03-07

    摘要: 本发明公开了一种同时检测黄曲霉毒素B1(AFB1)和玉米赤霉烯酮毒素(ZEN)的双靶适配体传感器及其制备方法,涉及生物传感器技术领域;引入二硫化钼‑还原性氧化石墨烯(MoS2‑rGO)纳米材料提高工作电极的生物相容性,比表面积和导电性能,运用6‑(二茂铁基)己硫醇(FC6S)和硫堇(Thi)通过纳米金(AuNPs)分别标记AFB1适配体(DNA1)和ZEN适配体(DNA2),构建的双靶标适配体功能化探针通过金硫键固定到电极上,该探针可在差分脉冲伏安法(DPV)不同电位下产生互不干扰的可区分电流峰以实现对AFB1和ZEN的同时检测;构建的传感器具有较好的重现性、抗干扰性和稳定性,在实际样品检测中获得了满意的回收率。