一种大质量土壤样品微生物基因组DNA提取方法

    公开(公告)号:CN117821442A

    公开(公告)日:2024-04-05

    申请号:CN202311839219.6

    申请日:2023-12-28

    IPC分类号: C12N15/10 C12Q1/6806

    摘要: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种大质量土壤样品微生物基因组DNA提取方法,包括向提取容器中加入土壤样品、两种不同直径的研磨珠和提取缓冲液,混合振荡,得到初步裂解液;加入SDS后加热裂解,得到二次裂解液;离心获取第一上清液,蛋白除杂后再次离心获得第二上清液;加入沉淀试剂混匀,获得DNA沉淀物;漂洗后用TE缓冲液进行溶解,纯化后获得土壤微生物基因组DNA。该微生物基因组DNA提取方法适用于大质量的各类土壤样品,能有效去除腐殖酸等难去除的杂质,提取率可达到85%,得到的基因组DNA片段大、纯度高,可直接进行PCR及高通量测序等分子操作,检测到细菌OTU丰度显著高于小质量土壤样品,更能满足土壤微生物检测的实际需要。