公开(公告)号：CN116334121A

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202111602844.X

申请日：2021-12-24

申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司 ,  中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 马延和 ,  田朝光 ,  王兴吉 ,  刘倩 ,  刘音 ,  刘丹丹 ,  杨玉净 ,  郭文柱 ,  孙涛 ,  孙文良

IPC分类号： C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12N15/31 ,  C12N9/34 ,  C12N9/30 ,  C12P19/14 ,  C12P19/20 ,  C12P19/02 ,  C12R1/685

摘要： 本发明公开了一种提高曲霉蛋白分泌能力的方法及获得的重组菌株。所述方法包括对曲霉进行遗传操作以缺失或降低特定基因An16g07795的活性，以提高其糖化酶、α‑淀粉酶、其它参与淀粉水解的蛋白质等蛋白分泌能力。本发明利用CRISPR‑Cas9基因组编辑技术敲除黑曲霉的基因An16g07795，得到基因编辑缺失突变菌株，其能够显著提升淀粉水解酶的生产水平，包括蛋白分泌水平和糖化酶的活力明显提高，因而具有较大的应用价值。

公开(公告)号：CN115851676A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202211654693.7

申请日：2022-12-22

申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司

发明人： 王兴吉 ,  钱娟娟 ,  刘倩 ,  王帅 ,  郭庆文 ,  王克芬

IPC分类号： C12N9/42 ,  C12N1/20 ,  C12R1/07

摘要： 本发明属于生物化工生产领域，涉及微生物发酵的菌种突变及菌种选育方法，具体涉及一株产碱性纤维素酶的短小芽孢杆菌及其应用。该菌株是经紫外诱变和硫酸二乙酯诱变育种后获得的，具体为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)WS‑135，保藏编号为CGMCC NO.18641。该菌株生产的碱性纤维素酶耐热、耐碱、酶活力高、性能稳定，同时本发明并优化了相应的发酵机制，该发酵机制，发酵活力更高、提取收率更高、制造成本更低，发酵酶活力平均在360U/mL以上；且开发了碱性纤维素酶的喷雾干燥方法，提供了一种碱性纤维素酶固体酶制剂的喷雾方法。解决了现有碱性纤维素酶保藏，运输不方便的问题，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN114686509A

公开(公告)日：2022-07-01

申请号：CN202011604138.4

申请日：2020-12-30

申请人： 山东隆科特酶制剂有限公司 ,  中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 马延和 ,  王兴吉 ,  田朝光 ,  郭庆文 ,  刘倩 ,  刘文龙 ,  刘音 ,  李金根 ,  刘丹丹 ,  郭文柱 ,  武敏 ,  孙涛 ,  孙文良

IPC分类号： C12N15/80 ,  C12N15/31 ,  C12N1/15 ,  C12P19/14 ,  C12P19/02 ,  C12R1/685

摘要： 本发明公开了一种提高曲霉分泌蛋白的方法及所述方法获得的重组菌株。所述方法包括对曲霉细胞进行遗传操作以缺失或降低特定基因的活性，以提高其糖化酶、α‑淀粉酶、其它参与淀粉水解的蛋白质等蛋白分泌能力。在一个具体实验中，本发明利用CRISPR‑Cas9编辑技术敲除黑曲霉基因An01g09210，得到基因编辑缺失突变菌株，该突变菌株能够显著提升淀粉水解酶的生产水平，其中蛋白分泌水平比出发菌株提高约33％，糖化酶的活力比出发菌提高约36％，α‑淀粉酶的活力比出发菌提高约24％，具有较大的应用价值。