公开(公告)号：CN105907729A

公开(公告)日：2016-08-31

申请号：CN201610279535.6

申请日：2016-04-29

申请人： 广东东阳光药业有限公司

发明人： 王振伟 ,  李胜超 ,  孙永川 ,  董军纪 ,  熊洋 ,  蒋鹏 ,  李志广 ,  林小鹊 ,  苏彦景 ,  李文佳

IPC分类号： C12N7/02

CPC分类号： C12N7/00 ,  C12N2710/20051

摘要： 本发明涉及生物医药领域，公开了一种快速获取重组人HPV L1类病毒样颗粒(VLP)的方法，该方法是羟基磷灰石层析法(Hydroxyapatite，HAP)的优化。将表达重组HPV L1的细胞破碎后得到的粗样液经初步纯化，加入还原剂使目的蛋白组分充分解聚，以五聚体状态均一存在，然后在一定条件下进行HAP，洗脱过程中目的蛋白L1能自组装成VLP。本发明的技术方案不仅能有效提高目的蛋白纯度，还能在层析过程中即获得类病毒颗粒，省去了专门的解聚重组装过程，对提高目的蛋白收率也有很大贡献，使目的蛋白L1的分离纯化工艺变得简便、易于控制，并适于工业化生产。

公开(公告)号：CN105907729B

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201610279535.6

申请日：2016-04-29

申请人： 广东东阳光药业有限公司

发明人： 王振伟 ,  李胜超 ,  孙永川 ,  董军纪 ,  熊洋 ,  蒋鹏 ,  李志广 ,  林小鹊 ,  苏彦景 ,  李文佳

IPC分类号： C12N7/02

摘要： 本发明涉及生物医药领域，公开了一种快速获取重组人HPV L1类病毒样颗粒(VLP)的方法，该方法是羟基磷灰石层析法(Hydroxyapatite，HAP)的优化。将表达重组HPV L1的细胞破碎后得到的粗样液经初步纯化，加入还原剂使目的蛋白组分充分解聚，以五聚体状态均一存在，然后在一定条件下进行HAP，洗脱过程中目的蛋白L1能自组装成VLP。本发明的技术方案不仅能有效提高目的蛋白纯度，还能在层析过程中即获得类病毒颗粒，省去了专门的解聚重组装过程，对提高目的蛋白收率也有很大贡献，使目的蛋白L1的分离纯化工艺变得简便、易于控制，并适于工业化生产。