-
公开(公告)号:CN118120702B
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410293414.1
申请日:2024-03-14
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: C12N5/0787 , A01K67/0271 , C12N5/077 , A61K49/00
摘要: 本发明属于生物技术技术领域,公开了一种嗜碱性粒细胞自噬缺陷小鼠的构建方法及应用。本发明的构建方法为:采用受精卵同源重组的方式,对小鼠Atg5基因进行flox修饰,得自噬基因Atg5敲除小鼠;取所述自噬基因Atg5敲除小鼠的骨髓,诱导分化为嗜碱性粒细胞,提纯得Atg5‑/‑嗜碱性粒细胞;清除狼疮小鼠自身嗜碱性粒细胞,得模型小鼠;将所述Atg5‑/‑嗜碱性粒细胞过继转移至所述模型小鼠体内,即成。本发明的构建方法操作方法简单方便,耗时短,所得嗜碱性粒细胞自噬缺陷小鼠存活率100%,存活周期长。本发明在研究嗜碱性粒细胞自噬所介导疾病的发病机制中具有很好的应用前景。
-
公开(公告)号:CN118207256A
公开(公告)日:2024-06-18
申请号:CN202410278017.7
申请日:2024-03-12
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: C12N15/85 , C12N15/12 , A01K67/0276
摘要: 本发明公开了一种嗜碱性粒细胞缺失小鼠模型及其构建方法与应用,属于转基因技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以gRNA引导Cas9蛋白和靶向载体定点剪切并同源重组修复,在Mcpt8基因第2~4外显子的上游和下游分别插入LoxP位点,使得打靶成功率更高。本发明的特异性敲除小鼠Mcpt8基因,使得构建得到的小鼠模型缺失嗜碱性粒细胞且存活率高,存活率100%,存活周期长,可以存活六个月以上,能够有效保证实验的顺利进行。通过本发明特异性敲除小鼠Mcpt8基因的构建方法得到的缺失嗜碱性粒细胞的小鼠模型,在自身免疫性疾病的研究中具有很好的应用前景。
-
公开(公告)号:CN117004562B
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202310349014.3
申请日:2023-04-03
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: C12N5/0775 , A61K35/28 , A61P37/02
摘要: 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种自噬激活的间充质干细胞外泌体、其制备方法及应用。本发明的自噬激活的间充质干细胞外泌体采用雷帕霉素培养激活。本发明直制备的自噬激活的间充质干细胞外泌体具有更强的免疫抑制功能,优于未诱导自噬激活的外泌体,将所述自噬激活的间充质干细胞外泌体在制备治疗和/或预防系统性红斑狼疮药物中应用,能够显著降低狼疮血清抗dsDNA抗体、ANA水平,降低尿蛋白水平,改善狼疮肾脏病理,减少肾脏免疫复合物沉积。为干细胞外泌体应用于系统性红斑狼疮的临床治疗提供了有力工具。
-
公开(公告)号:CN114264676B
公开(公告)日:2022-10-14
申请号:CN202111584183.2
申请日:2021-12-22
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: G01N23/02 , G01N23/20008 , G01N1/31 , G01N1/36
摘要: 本发明涉及医疗技术领域,尤其涉及一种人嗜碱性粒细胞透射电镜样品的制备方法及其应用。嗜碱性粒细胞是最稀有的细胞类型之一,占人体白细胞不到1%。本发明利用鸡蛋清制备嗜碱性粒细胞透射电镜样品,用鸡蛋清覆盖3%戊二醛固定后的细胞沉淀,再进行1%锇酸固定、0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液冲洗,再依次进行醋酸铀染料染色、乙醇脱水、丙酮渗透、包埋切片即得到待测样品。与传统制样方法相比,对细胞数量要求低,不限于人嗜碱性粒细胞,具有较广的检测范围。所用鸡蛋清取材便捷,不改变细胞的形态,能使细胞集中成块便于包埋切片,便于细胞的形态学的观察,适用于细胞数量少的样品制备。
-
公开(公告)号:CN117004562A
公开(公告)日:2023-11-07
申请号:CN202310349014.3
申请日:2023-04-03
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: C12N5/0775 , A61K35/28 , A61P37/02
摘要: 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种自噬激活的间充质干细胞外泌体、其制备方法及应用。本发明的自噬激活的间充质干细胞外泌体采用雷帕霉素培养激活。本发明直制备的自噬激活的间充质干细胞外泌体具有更强的免疫抑制功能,优于未诱导自噬激活的外泌体,将所述自噬激活的间充质干细胞外泌体在制备治疗和/或预防系统性红斑狼疮药物中应用,能够显著降低狼疮血清抗dsDNA抗体、ANA水平,降低尿蛋白水平,改善狼疮肾脏病理,减少肾脏免疫复合物沉积。为干细胞外泌体应用于系统性红斑狼疮的临床治疗提供了有力工具。
-
公开(公告)号:CN116064545A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202211453744.X
申请日:2022-11-18
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , A61K45/00 , A61P37/02
摘要: 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种调控SLE患者B淋巴细胞活化或增殖的生物标志物及应用。本发明提供了一种调控SLE患者B淋巴细胞活化或增殖的生物标志物,所述生物标志物为LncRNA ENST00000537616。活化的Ba外泌体被B细胞摄取后,可通过释放其内容物LncRNA ENST00000537616至B细胞中,进而促进B细胞的活化和增殖。本发明首次发现了活化Ba外泌体中LncRNA ENST00000537616在SLE中促进B细胞活化的作用,为SLE发病机制的研究和临床诊治提供了新的方向。
-
公开(公告)号:CN115963255A
公开(公告)日:2023-04-14
申请号:CN202211703352.4
申请日:2022-12-26
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: G01N33/533
摘要: 本发明属于医疗技术领域,公开了一种人嗜碱性粒细胞免疫荧光样品的制备方法及应用。本发明的制备方法包括以下步骤:分选人外周血嗜碱性粒细胞,培养,收集细胞沉淀;加入多聚甲醛固定细胞,收集细胞沉淀;采用DAPI染色细胞核;加入0.75%~1%的低熔点琼脂重悬细胞,得细胞悬液;再将细胞悬液滴到载玻片上进行封片、室温凝固片刻即得到待测样品。本发明对细胞数量要求极低,可固定悬浮细胞,可依实验要求调整重悬体积进而调整细胞密度,所用低熔点琼脂糖取材便捷,熔点低,重悬能使细胞均匀分散;封片后在30℃左右快速成胶,能够在悬浮细胞外形不受到破坏的前提下,固定悬浮细胞便于观察,成本低廉,步骤简便。
-
公开(公告)号:CN114990118B
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202210702366.8
申请日:2022-06-20
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: C12N15/113 , C12N5/0787 , C12N5/0781
摘要: 本发明涉及转录组学技术领域,公开了一种调控系统性红斑狼疮(SLE)患者B淋巴细胞的分子标记、其载体及其应用。本发明筛选了一种调控SLE患者B淋巴细胞的分子标记,所述分子标记为miRNA‑24550,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。将本发明的分子标记、引物、调节剂或载体在调控SLE患者B淋巴细胞生长中应用。本发明首次提出了miRNA‑24550在经Anti‑IgE活化的嗜碱性粒细胞源外泌体中显著高表达;经Anti‑IgE活化的嗜碱性粒细胞源外泌体miRNA‑24550可以促进SLE患者淋巴B细胞存活及增殖,为明确SLE的发病机制和临床上SLE的诊治提供了新的思路。
-
公开(公告)号:CN118207256B
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410278017.7
申请日:2024-03-12
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: C12N15/85 , C12N15/12 , A01K67/0276
摘要: 本发明公开了一种嗜碱性粒细胞缺失小鼠模型及其构建方法与应用,属于转基因技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以gRNA引导Cas9蛋白和靶向载体定点剪切并同源重组修复,在Mcpt8基因第2~4外显子的上游和下游分别插入LoxP位点,使得打靶成功率更高。本发明的特异性敲除小鼠Mcpt8基因,使得构建得到的小鼠模型缺失嗜碱性粒细胞且存活率高,存活率100%,存活周期长,可以存活六个月以上,能够有效保证实验的顺利进行。通过本发明特异性敲除小鼠Mcpt8基因的构建方法得到的缺失嗜碱性粒细胞的小鼠模型,在自身免疫性疾病的研究中具有很好的应用前景。
-
公开(公告)号:CN118120702A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410293414.1
申请日:2024-03-14
申请人: 广东医科大学附属医院
IPC分类号: A01K67/0271 , C12N5/0787 , C12N5/077 , A61K49/00
摘要: 本发明属于生物技术技术领域,公开了一种嗜碱性粒细胞自噬缺陷小鼠的构建方法及应用。本发明的构建方法为:采用受精卵同源重组的方式,对小鼠Atg5基因进行flox修饰,得自噬基因Atg5敲除小鼠;取所述自噬基因Atg5敲除小鼠的骨髓,诱导分化为嗜碱性粒细胞,提纯得Atg5‑/‑嗜碱性粒细胞;清除狼疮小鼠自身嗜碱性粒细胞,得模型小鼠;将所述Atg5‑/‑嗜碱性粒细胞过继转移至所述模型小鼠体内,即成。本发明的构建方法操作方法简单方便,耗时短,所得嗜碱性粒细胞自噬缺陷小鼠存活率100%,存活周期长。本发明在研究嗜碱性粒细胞自噬所介导疾病的发病机制中具有很好的应用前景。
-
-
-
-
-
-
-
-
-