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公开(公告)号：CN104569391B
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201510049714.6
申请日：2015-01-30
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东大华农动物保健品股份有限公司
IPC分类号： G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种草鱼出血病病毒抗体ELISA检测试剂盒，属于兽用生物制品技术领域。本发明从胎牛血清中分离分子量小于30～100K的蛋白质、氨基酸等营养物质培养繁殖草鱼出血病病毒，繁殖后对草鱼出血病病毒采用孔径为30～100K的滤膜进行超滤，然后经过分子筛层析、阴离子交换层析、超滤进行进一步的纯化，获得高纯度的草鱼出血病病毒；进一步采用分子量大小为30～100K的酶解明胶蛋白作为ELISA板的封闭液封闭草鱼出血病病毒等步骤制备了诊断草鱼出血病病毒抗体的ELISA试剂盒。该试剂盒中ELISA板包被的草鱼出血病病毒纯度高，检测更灵敏；经过酶解胶原蛋白封闭、戊二醛固定、干燥后有效延长保存期。
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公开(公告)号：CN104974977A
公开(公告)日：2015-10-14
申请号：CN201510219115.4
申请日：2015-04-30
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东大华农动物保健品股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种鞍带石斑鱼肾组织细胞系及其构建方法，该构建方法具体包括如下步骤：(1)肾组织的处理：取鞍带石斑鱼肾组织并进行消毒、切块，处理后浸泡待用；(2)原代培养：上述处理后的鞍带石斑鱼肾组织经胰酶消化液消化、灭菌双蒸水处理后进行原代培养；(3)传代培养：原代培养细胞汇合度达60-90％时进行传代培养，每5-7天传代一次。本发明所构建的肾组织细胞系对石斑鱼虹彩病毒敏感，且细胞病变时间快。因此，该细胞系可很好地应用于石斑鱼虹彩病毒的分离、繁殖及石斑鱼虹彩病毒疫苗研究。同时，也为其它海水鱼类病毒的分离培养及疫苗研制等提供了细胞材料。
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公开(公告)号：CN103493987B
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201310461810.2
申请日：2013-09-29
申请人： 广东大华农动物保健品股份有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC分类号： A23K1/165
摘要： 本发明公开了一种防治畜禽腹泻及促进生长的水溶性复合酶制剂，其是由水溶性稀释载体与活性成分混合而成；所述活性成分由木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、脂肪酶、α-半乳糖苷酶、葡萄糖氧化酶组成。本发明所述的水溶性复合酶制剂通过饮水直接到达胃肠，快速激活内源性各种酶的活力，参与内分泌调节，提高机体免疫力，调节肠道微生态环境，降低食糜粘度提高畜禽对营养物质的吸收，提高饲料中能量和蛋白质的利用率，减少肠道疾病，防治畜禽腹泻；提高畜禽的采食量，促进生长。
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公开(公告)号：CN104805053A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510222399.2
申请日：2015-04-30
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东大华农动物保健品股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系及其构建方法，属于动物细胞系领域，其为珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系PGSN，已于2015年01月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C201505。所述珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系的构建方法包括以下步骤：1)吻端组织的处理；2)原代细胞培养；3)传代培养。本发明所建立的珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系生长状态良好，细胞形态为成纤维样细胞，能稳定增殖并传至70代以上，能大量提供珍珠龙胆石斑鱼吻端组织细胞系，为分离、鉴定海水鱼类病毒及病毒疫苗制备提供研究平台和实验材料。
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公开(公告)号：CN104560893A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510050941.0
申请日：2015-01-30
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东大华农动物保健品股份有限公司
摘要： 本发明涉及一种用于培养病毒的培养基，包括培养液，其还包括：氨基酸溶液和胎牛血清中的小分子成分；所述培养液、氨基酸溶液和胎牛血清中的小分子成分按照体积百分数计分别为：培养液85-96％、氨基酸溶液2-5％、胎牛血清中的小分子成分2-10％。本发明还提供该培养基的制备方法：分别取配方量的培养液、氨基酸溶液和胎牛血清中的小分子成分，混合，得到产品。本发明的用于培养病毒的培养基，便于病毒繁殖结束后的病毒液的纯化，降低了疫苗生产成本；此外制备方法简单、易操作。
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公开(公告)号：CN104558166A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510050935.5
申请日：2015-01-30
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东大华农动物保健品股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种减少抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体中非特异性抗体的方法，依次包括以下步骤:采用膜包对草鱼呼肠孤病毒进行浓缩；2)采用分子筛层析初步筛分草鱼呼肠孤病毒；3)采用离子交换层析纯化草鱼呼肠孤病毒；4)制备兔抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体；5)去除抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体中的非特异性抗体。通过纯化的方法，提高草鱼出血病毒的纯度和滴度，减少其它非病毒蛋白所产生的非特异性多克隆抗体。通过多克隆抗体与CIK细胞碎片结合，除去部分多克隆抗体中的非特异性抗体。
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公开(公告)号：CN102888383B
公开(公告)日：2015-03-18
申请号：CN201210128876.5
申请日：2012-04-27
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东大华农动物保健品股份有限公司
摘要： 本发明分离了一株猪伪狂犬病毒GDXX株，并以该分离株为母本，通过分子生物学手段，依次缺失胸腺嘧啶核苷酸激酶（TK）基因和gE基因，获得重组病毒PRV/TK－/gE－。以该重组病毒为疫苗毒株研制生产安全高效的猪用伪狂犬活疫苗。
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公开(公告)号：CN103235139B
公开(公告)日：2015-01-14
申请号：CN201310124640.9
申请日：2013-04-11
申请人： 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东大华农动物保健品股份有限公司
IPC分类号： G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种禽流感油乳剂灭活疫苗成品抗原快速检测方法，其包括以下步骤：1）采用肉豆蔻异丙酯与禽流感油乳剂灭活疫苗充分振荡混均、离心，分离出水相层；2）对步骤1）的疫苗水相进行HA效价检测；3）根据步骤2）的疫苗水相HA效价检测结果，取步骤1）的禽流感油乳剂灭活疫苗水相配制成4HAU疫苗抗原稀释液；4）利用步骤3）配制好的4HAU疫苗抗原稀释液进行血凝抑制实验，以完全抑制4HAU抗原的血清最高稀释度为HI效价。本发明不破坏疫苗抗原的血凝效价与抗原性，能够准确快速测定禽流感油乳剂灭活疫苗成品的水相HA效价及分析其抗原性差异，所用试剂对人体和环境安全无毒害且价廉易取。
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公开(公告)号：CN102851301B
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN201210173714.3
申请日：2012-07-06
申请人： 广东大华农动物保健品股份有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司
摘要： 本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒M基因全序列的扩增方法，包括如下具体步骤：1、提取猪流行性腹泻病毒RNA；2、依据猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M基因序列设计RT-PCR引物，并扩增猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M基因；3、依据猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M基因序列设计套式PCR引物，以RT-PCR产物为模板，扩增M基因全部片段；4、PCR产物的克隆及测序分析：将套式PCR产物进行纯化并连接到pMD18-TSimpleVector上，筛选阳性克隆，将阳性克隆进行测序鉴定。该方法能够扩增猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M基因全长，通过该方法可以捕捉到猪流行性腹泻病毒在细胞培养传代过程中M全基因的序列变化，从而通过M基因的遗传变异分析了解其与PEDV毒力或者免疫效力的相关性。
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公开(公告)号：CN103088039B
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201310013575.2
申请日：2013-01-14
申请人： 广东大华农动物保健品股份有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司
摘要： 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒S基因抗原表位的扩增方法，包括1）提取病毒RNA；2）RT-PCR扩增；3）套式PCR扩增；4）PCR产物的克隆及测序分析等步骤。扩增猪流行性腹泻病毒（PEDV）的S部分基因，扩增片段长782bp(位于S基因的1316bp-2097bp)，并且包含位于S基因1495bp-1914bp之间的中和抗原表位，实现能扩增在vero细胞上培养的不同代次的PEDV种毒的S基因，捕捉到了猪流行性腹泻病毒在细胞培养传代过程中S基因，特别是中和抗原表位的序列变化，从而能了解其与PEDV免疫效力变化的相关性。
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