禽传染性支气管炎病毒的致弱方法

    公开(公告)号:CN103397002A

    公开(公告)日:2013-11-20

    申请号:CN201310342900.X

    申请日:2013-08-07

    Abstract: 本发明公开了一种禽传染性支气管炎病毒的致弱方法,包括以下步骤,毒株YX10接种SPF鸡胚,每胚接种103.5-4EID50/0.2mL,培养一定时间后,将鸡胚置于-20℃半小时后,无菌收集尿囊液,进行下一代次传代;第1代-第10代培养温度为37℃,培养时间为48小时;第11代-第14代培养温度每一代降低1℃,培养时间为48小时;从第15代起培养温度为32℃,培养时间为32-48小时。本发明禽传染性支气管炎病毒的致弱方法可以有效的节省传代时间,减少免疫原性的丢失;有利于及时、有效研制出新型疫苗。

    一种外源性禽白血病病毒的检测方法

    公开(公告)号:CN106290861A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610635653.6

    申请日:2016-08-04

    CPC classification number: G01N33/56983 G01N33/68 G01N2333/465 G01N2469/10

    Abstract: 本发明公开了一种外源性禽白血病病毒的检测方法,其是将生长良好的DF1细胞进行消化、稀释,传代于细胞培养板中,37℃、5%CO2培养25-35min,至细胞培养板底部沉积45-55%的细胞时,向细胞培养板每孔依次贴壁加入待检测鸡的血浆,培养过夜后弃掉细胞培养板中原液,加入含1%胎牛血清的维持液,继续培养7-8天,将培养物冻存;解冻培养物,轻轻吹打混匀,加至P27抗原反应板中,检测P27抗原,判定待检测鸡是否感染外源性禽白血病病毒。相比传统方法,本发明方法对同一批样品能检测出更高的阳性率,检测出的S/P均值更高,差异极显著;且具有同等的稳定性、准确性,以及更高的灵敏性。

    用于检测鸭腺病毒2型的引物对及试剂盒

    公开(公告)号:CN105039587A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510188800.5

    申请日:2015-04-20

    Abstract: 本发明公开了鉴别鸭腺病毒2型的引物对及试剂盒,该引物对核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示。该对引物特异性强,可准确高效地鉴别出待检样品是否含有鸭腺病毒2型,而包括禽腺病毒、细小病毒、坦布苏、新城疫等在内的禽类病毒并不能扩增出DNA片段;灵敏度高,至少能检测出0.2558ng的样品DNA。本发明的引物及PCR检测试剂盒,检测时间短,整个PCR过程只需要2个小时左右;简便、经济、不需要购买昂贵的实验仪器及试剂,有利于及时发现病鸭是否感染该病毒,采取相应措施,避免造成更大的经济损失。

    一种外源性禽白血病病毒的检测方法

    公开(公告)号:CN106290861B

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201610635653.6

    申请日:2016-08-04

    Abstract: 本发明公开了一种外源性禽白血病病毒的检测方法,其是将生长良好的DF1细胞进行消化、稀释,传代于细胞培养板中,37℃、5%CO2培养25‑35min,至细胞培养板底部沉积45‑55%的细胞时,向细胞培养板每孔依次贴壁加入待检测鸡的血浆,培养过夜后弃掉细胞培养板中原液,加入含1%胎牛血清的维持液,继续培养7‑8天,将培养物冻存;解冻培养物,轻轻吹打混匀,加至P27抗原反应板中,检测P27抗原,判定待检测鸡是否感染外源性禽白血病病毒。相比传统方法,本发明方法对同一批样品能检测出更高的阳性率,检测出的S/P均值更高,差异极显著;且具有同等的稳定性、准确性,以及更高的灵敏性。

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