公开(公告)号：CN114657119B

公开(公告)日：2023-10-20

申请号：CN202210258310.8

申请日：2022-03-16

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 曹舒婷 ,  王丽 ,  高靖春 ,  姚康 ,  肖昊 ,  胡胜兰 ,  蒋宗勇 ,  侯磊

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/079

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种初生仔猪肠神经胶质细胞的分离和原代培养方法，所述方法具体为：步骤1：从屠宰的仔猪上取出空肠前段，进行清洗；步骤2：采用消化培养基消化肠道，收集细胞沉淀；步骤3：向步骤2得到的细胞沉淀中加入胰酶消化肠道，收集细胞沉淀；步骤4：用肠神经胶质细胞培养基重悬步骤3得到的细胞，并接种到用层粘连蛋白和Poly‑D赖氨酸包被的多孔细胞培养爬片上。该方法可成功率高的从仔猪肠道提取得到胶质细胞并原代培养。

公开(公告)号：CN115340960B

公开(公告)日：2024-06-18

申请号：CN202210268503.1

申请日：2022-03-18

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 曹舒婷 ,  王丽 ,  高靖春 ,  肖昊 ,  胡胜兰 ,  吴胜男 ,  蒋宗勇 ,  侯磊

IPC: C12N1/20 ,  C12N5/0786 ,  C12N5/071 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞共培养体系的构建方法，包括如下步骤：步骤1：准备产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞；步骤2：取仔猪空肠前段组织进行处理得到肠隐窝；步骤3：用稀释后的基质胶重悬肠隐窝，将产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞、肠隐窝接种于提前温育的孔板上，于孔板中加入类器官生长培养基，培养。本发明的培养基针对于猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞共培养体系的生长特点，选用了多种生长因子成份进行调和、优化了孔板中大肠杆菌和巨噬细胞的浓度，经过不断优化培养基中生长因子的配比，使猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌、巨噬细胞能够有效地进行接触性共培养。

公开(公告)号：CN114703136B

公开(公告)日：2022-08-19

申请号：CN202210619561.4

申请日：2022-06-02

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 王丽 ,  曹舒婷 ,  高靖春 ,  姚康 ,  黄凯勇 ,  蒋宗勇

IPC: C12N5/0793

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种初生仔猪肠道神经元的分离和原代培养方法，所述方法具体为：步骤1：从屠宰的仔猪上取出空肠前段，进行清洗；步骤2：采用消化培养基消化肠道，收集细胞沉淀；步骤3：向步骤2得到的细胞沉淀中加入胰酶消化肠道，收集细胞沉淀；步骤4：经细胞培养基重悬细胞重悬步骤3得到的细胞，并接种到用层粘连蛋白和Poly‑D赖氨酸包被的多孔细胞培养爬片上；定期更换细胞培养基，5天后收集检测，做细胞蛋白染色。该方法可成功率高的从仔猪肠道提取得到肠道神经元并原代培养。

公开(公告)号：CN114703136A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210619561.4

申请日：2022-06-02

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 王丽 ,  曹舒婷 ,  高靖春 ,  姚康 ,  黄凯勇 ,  蒋宗勇

IPC: C12N5/0793

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种初生仔猪肠道神经元的分离和原代培养方法，所述方法具体为：步骤1：从屠宰的仔猪上取出空肠前段，进行清洗；步骤2：采用消化培养基消化肠道，收集细胞沉淀；步骤3：向步骤2得到的细胞沉淀中加入胰酶消化肠道，收集细胞沉淀；步骤4：经细胞培养基重悬细胞重悬步骤3得到的细胞，并接种到用层粘连蛋白和Poly‑D赖氨酸包被的多孔细胞培养爬片上；定期更换细胞培养基，5天后收集检测，做细胞蛋白染色。该方法可成功率高的从仔猪肠道提取得到肠道神经元并原代培养。

公开(公告)号：CN115340960A

公开(公告)日：2022-11-15

申请号：CN202210268503.1

申请日：2022-03-18

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 曹舒婷 ,  王丽 ,  高靖春 ,  肖昊 ,  胡胜兰 ,  吴胜男 ,  蒋宗勇 ,  侯磊

IPC: C12N1/20 ,  C12N5/0786 ,  C12N5/071 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞共培养体系的构建方法，包括如下步骤：步骤1：准备产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞；步骤2：取仔猪空肠前段组织进行处理得到肠隐窝；步骤3：用稀释后的基质胶重悬肠隐窝，将产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞、肠隐窝接种于提前温育的孔板上，于孔板中加入类器官生长培养基，培养。本发明的培养基针对于猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌或巨噬细胞共培养体系的生长特点，选用了多种生长因子成份进行调和、优化了孔板中大肠杆菌和巨噬细胞的浓度，经过不断优化培养基中生长因子的配比，使猪肠类器官与产肠毒素性大肠杆菌、巨噬细胞能够有效地进行接触性共培养。

公开(公告)号：CN114657119A

公开(公告)日：2022-06-24

申请号：CN202210258310.8

申请日：2022-03-16

Applicant: 广东省农业科学院动物科学研究所

Inventor： 曹舒婷 ,  王丽 ,  高靖春 ,  姚康 ,  肖昊 ,  胡胜兰 ,  蒋宗勇 ,  侯磊

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/079

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种初生仔猪肠神经胶质细胞的分离和原代培养方法，所述方法具体为：步骤1：从屠宰的仔猪上取出空肠前段，进行清洗；步骤2：采用消化培养基消化肠道，收集细胞沉淀；步骤3：向步骤2得到的细胞沉淀中加入胰酶消化肠道，收集细胞沉淀；步骤4：用肠神经胶质细胞培养基重悬步骤3得到的细胞，并接种到用层粘连蛋白和Poly‑D赖氨酸包被的多孔细胞培养爬片上。该方法可成功率高的从仔猪肠道提取得到胶质细胞并原代培养。