一种检测新型冠状病毒的荧光定量纳米粒子PCR的引物、引物探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN113355455B

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202110560677.0

    申请日:2021-05-21

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/6851 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种检测新型冠状病毒的荧光定量纳米粒子PCR的引物、引物探针组合及其应用,所述引物的5’端修饰有纳米颗粒,所述纳米颗粒为导体或半导体纳米颗粒。本发明还提供了包含所述引物的引物探针组合及试剂盒,并提供了一种新型冠状病毒2019‑nCoV的非诊断目的的检测方法,使用所述引物探针组合,且利用含有激光加热装置的PCR仪进检测,其使用银纳米颗粒表面修饰的引物,以及使用特定波长激光加热进行快速升降温,可将qPCR扩增时间缩短为30min以内,而荧光定量PCR需要60~120min;其检测灵敏度低至1copy,较荧光定量PCR提高10倍,且荧光定量纳米粒子PCR能抑制与新型冠状病毒同源性较高病毒SARS的非特异扩增,提升体系的特异性。

    一种检测新冠病毒的突变毒株的引物和探针的组合

    公开(公告)号:CN113278733A

    公开(公告)日:2021-08-20

    申请号:CN202110560664.3

    申请日:2021-05-21

    摘要: 本发明公开了一种检测新冠病毒的突变毒株的引物和探针的组合,含有核苷酸序列如SEQ ID NO:3到6所示的引物,以及核苷酸序列如SEQ ID NO:10到11所示的探针。基于本引物和探针的组合,本发明建立了一种基于纳米粒子PCR技术检测新冠病毒N基因N501Y突变点和N基因D614G突变点的检测方法,具有扩增效率更高和特异性佳的特点,该方法的灵敏度高达5copies/反应,且对8种冠状病毒和N501Y和D614未突变株的SARS‑CoV‑2均表现出优良的特异性。说明该体系可以快速有效的进行新型冠状病毒突变株和未突变株的筛查。

    一种检测新冠病毒的突变毒株的引物和探针的组合

    公开(公告)号:CN113278733B

    公开(公告)日:2024-03-01

    申请号:CN202110560664.3

    申请日:2021-05-21

    摘要: 本发明公开了一种检测新冠病毒的突变毒株的引物和探针的组合,含有核苷酸序列如SEQ ID NO:3到6所示的引物,以及核苷酸序列如SEQ ID NO:10到11所示的探针。基于本引物和探针的组合,本发明建立了一种基于纳米粒子PCR技术检测新冠病毒S基因N501Y突变点和S基因D614G突变点的检测方法,具有扩增效率更高和特异性佳的特点,该方法的灵敏度高达5copies/反应,且对8种冠状病毒和N501Y和D614未突变株的SARS‑CoV‑2均表现出优良的特异性。说明该体系可以快速有效的进行新型冠状病毒突变株和未(56)对比文件Jasdeep Singh et al..Structure-Function Analyses of New SARS-CoV-2Variants B.1.1.7, B.1.351 and B.1.1.28.1:Clinical, Diagnostic, Therapeutic andPublic Health Implications《.Viruses》.2021,第13卷(第3期),第1-16页.李泽伦.基于硫化铋的纳米探针在癌症诊疗中的应用《.中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》.2019,(第1期),E072-4.

    一种基于磁珠法提取病毒样本的核酸提取试剂盒

    公开(公告)号:CN113151397A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110150478.2

    申请日:2021-02-03

    发明人: 袁巧梅 肖彩霞

    IPC分类号: C12Q1/6806

    摘要: 本发明公开了一种基于磁珠法提取病毒样本的核酸提取试剂盒,所用磁珠为硅羟基磁珠,由多种不同粒径的磁珠混合组成,粒径大小为10~1000nm。捕获核酸的能力强,更适用于微量病毒核酸提取。该试剂盒原料易得、成本低廉;常温贮存,便于运输及使用;提取步骤简便,裂解结合只需加样本、裂解液、磁珠即可进行,无需加入蛋白酶K、CarrierRNA等进口原材料。病毒DNA&RNA共提,回收率高;无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂,对操作人员安全无毒副作用;操作简便,无需离心,对仪器设备要求不高;可匹配高通量自动提取仪;适用于从环境样本,如污水、冰柜、海鲜肉类、食品内外包装等微量病毒样本中提取病毒核酸。

    一种检测新型冠状病毒的荧光定量纳米粒子PCR的引物、引物探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN113355455A

    公开(公告)日:2021-09-07

    申请号:CN202110560677.0

    申请日:2021-05-21

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/6851 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种检测新型冠状病毒的荧光定量纳米粒子PCR的引物、引物探针组合及其应用,所述引物的5’端修饰有纳米颗粒,所述纳米颗粒为导体或半导体纳米颗粒。本发明还提供了包含所述引物的引物探针组合及试剂盒,并提供了一种新型冠状病毒2019‑nCoV的非诊断目的的检测方法,使用所述引物探针组合,且利用含有激光加热装置的PCR仪进检测,其使用银纳米颗粒表面修饰的引物,以及使用特定波长激光加热进行快速升降温,可将qPCR扩增时间缩短为30min以内,而荧光定量PCR需要60~120min;其检测灵敏度低至1copy,较荧光定量PCR提高10倍,且荧光定量纳米粒子PCR能抑制与新型冠状病毒同源性较高病毒SARS的非特异扩增,提升体系的特异性。

    一种基于磁珠法提取病毒样本的核酸提取试剂盒

    公开(公告)号:CN113151397B

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202110150478.2

    申请日:2021-02-03

    发明人: 袁巧梅 肖彩霞

    IPC分类号: C12Q1/6806

    摘要: 本发明公开了一种基于磁珠法提取病毒样本的核酸提取试剂盒,所用磁珠为硅羟基磁珠,由多种不同粒径的磁珠混合组成,粒径大小为10~1000nm。捕获核酸的能力强,更适用于微量病毒核酸提取。该试剂盒原料易得、成本低廉;常温贮存,便于运输及使用;提取步骤简便,裂解结合只需加样本、裂解液、磁珠即可进行,无需加入蛋白酶K、CarrierRNA等进口原材料。病毒DNA&RNA共提,回收率高;无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂,对操作人员安全无毒副作用;操作简便,无需离心,对仪器设备要求不高;可匹配高通量自动提取仪;适用于从环境样本,如污水、冰柜、海鲜肉类、食品内外包装等微量病毒样本中提取病毒核酸。