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公开(公告)号:CN103333251B
公开(公告)日:2014-08-20
申请号:CN201310124911.0
申请日:2013-04-11
申请人: 广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
IPC分类号: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/32
摘要: 本发明涉及一种基于重组融合抗原蛋白的γ-干扰素夹心ELISA检测方法,同时本发明还涉及重组融合抗原蛋白的制备方法和γ-干扰素单克隆抗体制备方法,属于医学检验测定技术领域。本发明的重组融合抗原蛋白由分泌性抗原蛋白MPB70、抗原蛋白CFP10、抗原蛋白ESAT6通过肽键连接组成,γ-干扰素单克隆抗体通过动物免疫、细胞融合、杂交瘤细胞筛选、克隆、纯化得到,利用重组融合抗原蛋白和γ-干扰素单克隆抗体建立夹心ELISA检测方法。由于重组融合抗原蛋白可快速刺激牛血样品分泌出γ-干扰素,γ-干扰素单抗能快速特异性识别牛γ-干扰素,具有较强的灵敏度和特异性,在水牛结核病诊断方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103333251A
公开(公告)日:2013-10-02
申请号:CN201310124911.0
申请日:2013-04-11
申请人: 广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
IPC分类号: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/32
摘要: 本发明涉及一种基于重组融合抗原蛋白的γ-干扰素夹心ELISA检测方法,同时本发明还涉及重组融合抗原蛋白的制备方法和γ-干扰素单克隆抗体制备方法,属于医学检验测定技术领域。本发明的重组融合抗原蛋白由分泌性抗原蛋白MPB70、抗原蛋白CFP10、抗原蛋白ESAT6通过肽键连接组成,γ-干扰素单克隆抗体通过动物免疫、细胞融合、杂交瘤细胞筛选、克隆、纯化得到,利用重组融合抗原蛋白和γ-干扰素单克隆抗体建立夹心ELISA检测方法。由于重组融合抗原蛋白可快速刺激牛血样品分泌出γ-干扰素,γ-干扰素单抗能快速特异性识别牛γ-干扰素,具有较强的灵敏度和特异性,在水牛结核病诊断方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103205507A
公开(公告)日:2013-07-17
申请号:CN201310075372.6
申请日:2013-03-08
申请人: 广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
摘要: 本发明公开了一对检测高致病性猪蓝耳病与经典猪蓝耳病的RT-PCR引物及试剂盒,所述引物的上游引物核苷酸序列为GGCGACAATGTCCCTAAC,下游引物核苷酸序列为GATGGCTTGAGCTGAGTAT,所述试剂盒包括所述的引物。采用本发明引物检测高致病性猪蓝耳病与经典猪蓝耳病病毒,具有敏感性高、特异性强、快速简便、检测成本低等优点。
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公开(公告)号:CN102174508A
公开(公告)日:2011-09-07
申请号:CN201110043499.0
申请日:2011-02-23
申请人: 广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
摘要: 本发明涉及一种山羊痘病毒复制非必需区的筛选方法及其通用转移载体,是通过PCR方法扩增山羊痘病毒基因组某两区域两端基因片段,然后将绿色荧光蛋白(EGFP)基因和黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(gpt)基因表达盒插入上述片段中,构建2个山羊痘病毒通用转移载体,由上述转移载体获得稳定表达外源基因的重组病毒,从而确定所选区域为山羊痘病毒的复制非必需区,上述通用转移载体含有1个独特的酶切位点Sal I,可插入其它目的基因表达盒。利用本发明提供的两个通用转移载体所获得的重组病毒,不仅具有与亲本病毒相近的生长性能,而且由于基因组中多个毒力相关基因被定向敲除,因此安全性更佳,具备开发成为基因工程减毒疫苗株的潜力。
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