改进的徒手切割水牛囊胚的方法及切割液

    公开(公告)号:CN105349485B

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201510932911.2

    申请日:2015-12-15

    申请人: 广西大学

    IPC分类号: C12N5/073

    摘要: 本发明公开了一种改进的徒手切割水牛囊胚的方法,并将切割液和培养滴合二为一,即将添加一定量牛磺酸的含有颗粒细胞的成熟培养液做成切割滴,命名为切割单层。该法主要包括制备切割单层、固定胚胎、切割胚胎、剥离切割胚,其中切割单层时直接采用添加牛磺酸的成熟培养液作为切割滴以取代传统切割液和培养滴;同时,该法对切割手法和切割载体进行了规范和简化,方法操作简便、无需处理透明带、切割后无需转移,可提高半胚的复原率(二分胚复原率达90%以上),防止污染,保证切割效率,为此项技术能够真正进入实用和普及阶段,更好地为畜牧业服务奠定了基础。

    一种水牛睾丸精子细胞分离和鉴定方法

    公开(公告)号:CN109182254A

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201811103634.4

    申请日:2018-09-20

    申请人: 广西大学

    IPC分类号: C12N5/076 C12Q1/02

    摘要: 本发明属于精子细胞处理技术领域,具体涉及一种水牛睾丸精子细胞分离和鉴定方法,其主要包括以下步骤:1)获得水牛睾丸,用胶原酶IV、透明质酸酶和DNase I组合酶法消化,细胞筛过滤,差异贴壁后取悬浮细胞;2)取悬浮细胞进行活细胞染色;3)流式细胞仪分选。有益效果:本技术方案为行之有效的水牛精子细胞分离方法,通过使用双酶法分解牛睾丸组织,得到单细胞悬液,采用连续差异贴壁法去除体细胞的干扰,再采用流式细胞仪根据未贴壁细胞染色后的荧光强弱,判断细胞DNA含量,有效消化和去除了二倍体精原细胞和四倍体初级经母细胞等其他非目标细胞的干扰,实现大量单倍体精子细胞的成功分选。

    改进的徒手切割水牛囊胚的方法及切割液

    公开(公告)号:CN105349485A

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201510932911.2

    申请日:2015-12-15

    申请人: 广西大学

    IPC分类号: C12N5/073

    摘要: 本发明公开了一种改进的徒手切割水牛囊胚的方法,并将切割液和培养滴合二为一,即将添加一定量牛磺酸的含有颗粒细胞的成熟培养液做成切割滴,命名为切割单层。该法主要包括制备切割单层、固定胚胎、切割胚胎、剥离切割胚,其中切割单层时直接采用添加牛磺酸的成熟培养液作为切割滴以取代传统切割液和培养滴;同时,该法对切割手法和切割载体进行了规范和简化,方法操作简便、无需处理透明带、切割后无需转移,可提高半胚的复原率(二分胚复原率达90%以上),防止污染,保证切割效率,为此项技术能够真正进入实用和普及阶段,更好地为畜牧业服务奠定了基础。

    一种促进番茄开花结果的栽培方法

    公开(公告)号:CN104813821B

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201510147345.4

    申请日:2015-03-31

    申请人: 广西大学

    发明人: 张鹏飞

    IPC分类号: A01G1/00 A01G7/06

    摘要: 本发明属于农业栽培技术领域,具体涉及一种促进番茄开花结果的栽培方法,包括如下步骤:(1)选地、整地,(2)壮苗,(3)搭架,(4)修剪与促苗,(5)促花,(6)开花结果期,本发明所述的技术方案,能很好地促进花芽分化效果好,提高番茄的成花率和结果率,盛花期明显,长势旺盛,开花数量大,花期延长,开花数量多而有光泽,病害少、抗旱力强,产量高、品质好,也相应地提高了番茄的经济效益和营养价值。

    一种促进番茄开花结果的栽培方法

    公开(公告)号:CN104813821A

    公开(公告)日:2015-08-05

    申请号:CN201510147345.4

    申请日:2015-03-31

    申请人: 广西大学

    发明人: 张鹏飞

    IPC分类号: A01G1/00 A01G7/06

    摘要: 本发明属于农业栽培技术领域,具体涉及一种促进番茄开花结果的栽培方法,包括如下步骤:(1)选地、整地,(2)壮苗,(3)搭架,(4)修剪与促苗,(5)促花,(6)开花结果期,本发明所述的技术方案,能很好地促进花芽分化效果好,提高番茄的成花率和结果率,盛花期明显,长势旺盛,开花数量大,花期延长,开花数量多而有光泽,病害少、抗旱力强,产量高、品质好,也相应地提高了番茄的经济效益和营养价值。

    一种三七总苷的制备方法

    公开(公告)号:CN104800258A

    公开(公告)日:2015-07-29

    申请号:CN201510165382.8

    申请日:2015-04-09

    申请人: 广西大学

    发明人: 张鹏飞

    IPC分类号: A61K36/258 A61P7/04

    摘要: 本发明公开了一种三七总苷颗粒中三七总苷的制备方法,包括如下步骤:(1)将三七药材粉碎成粗粉,投入多功能提取罐中,加6-8倍量的水,再加入乳化剂混匀,然后回流提取2次,每次1小时,收集提取液;(2)将收集的提取液pH值调整为7-8,过滤沉淀后,取滤液,通过大孔吸附树脂吸附、层析,用50-70%浓度的乙醇洗脱1-2次收集洗脱液,回收乙醇后减压浓缩,喷雾干燥得粉末提取物。使用本发明的方法提取三七,能增大了三七总苷的收率,使提取物收率提高30%以上;能减少制备三七总苷的提取时间和提取次数,能极大的缩短三七提取的生产周期,降低生产成本。

    一种番茄的嫁接方法
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN104813850A

    公开(公告)日:2015-08-05

    申请号:CN201510147725.8

    申请日:2015-03-31

    申请人: 广西大学

    发明人: 张鹏飞

    IPC分类号: A01G1/06

    摘要: 本发明属于蔬菜嫁接技术领域,尤其是一种番茄的嫁接方法,所述嫁接方法包括选取亲和力强的砧木和接穗进行切接穗、嫁接和嫁接后管理,具体嫁接方法包括如下步骤:培育接穗、接穗、砧木、灭菌和嫁接后管理,本发明的番茄嫁接方法简单,操作简单,且嫁接成活率高,愈合快,节省劳动力,受天气影响较小,吸水保湿性强,对于用优良品种种苗而言,其成本可大大降低,而且还能够改善番茄的品种,增强抗性,提高产量。

    细胞荧光原位杂交方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN107312838A

    公开(公告)日:2017-11-03

    申请号:CN201710510841.0

    申请日:2017-06-28

    申请人: 广西大学

    IPC分类号: C12Q1/68

    CPC分类号: C12Q1/6841 C12Q2563/107

    摘要: 本发明公开了一种细胞荧光原位杂交方法,包括预处理和杂交,预处理采用75%的低渗液进行低渗处理;杂交之前进行鱼精DNA的预杂交试验,预杂交时间为1-2h。实际使用表明,该法能够得到更为清晰、直观、准确的染色结果,实现了快速有效地对小鼠ES细胞进行荧光原位杂交,也适用于人iPS细胞染色体核型判断,和人21三体综合征的细胞核型进行分析,同时也为其他种类的细胞进行FISH染色提供了一种参考。因此,应用本发明在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子,为染色体或者基因完整性分析奠定了重要基础。