一种鳄鱼脂肪干细胞分离培养方法和无血清培养基

    公开(公告)号:CN110669728A

    公开(公告)日:2020-01-10

    申请号:CN201911083533.X

    申请日:2019-11-07

    申请人: 张伟

    发明人: 张伟 胡大海 李超

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明公开了一种鳄鱼脂肪干细胞分离培养方法,包括采集鳄鱼脂肪组织;将鳄鱼脂肪组织经过清洗、消化得到鳄鱼脂肪干细胞;将鳄鱼脂肪干细胞用无血清培养基进行培养。本发明还公开了鳄鱼脂肪干细胞分离培养中所需的无血清培养基包括F12基础培养基,还包括转铁蛋白、血清白蛋白、胰岛素、大豆胰酶、层粘连蛋白、硒酸钠、维生素C和茶多酚。本发明鳄鱼脂肪干细胞细胞分离培养方法,细胞采用无血清培养基进行培养,无异源血清成分加入,避免了血清对细胞的毒性作用和血清源性污染,减少了对细胞的伤害和后期临床使用时的风险。

    一种鳄鱼脂肪干细胞来源外泌体提取及冻干粉制备方法

    公开(公告)号:CN110938593A

    公开(公告)日:2020-03-31

    申请号:CN202010002071.0

    申请日:2020-01-02

    申请人: 张伟

    发明人: 张伟 胡大海 李超

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明公开了一种鳄鱼脂肪干细胞来源外泌体提取方法,首先收集鳄鱼脂肪干细胞;对收集到的鳄鱼脂肪干细胞在无血清培养基中进行培养,取上清液超高速离心,沉淀物即为鳄鱼脂肪干细胞来源外泌体。本发明还公开了鳄鱼脂肪干细胞来源外泌体冻干粉的制备方法,向鳄鱼脂肪干细胞来源外泌体中加入冻干赋形剂,然后依次经过冷藏和两次冷冻干燥即得。本发明采用无血清培养基培养,未加入血清类成分,避免了动物病原对于干细胞污染的可能性,及外来添加剂对人体和皮肤的伤害;本发明制备得到的冻干粉,产品性质更加稳定,能够更长久地发挥其生物活性。

    脂肪干细胞外泌体的无菌胶原液及贴敷的制备方法

    公开(公告)号:CN110812525A

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201911382525.5

    申请日:2019-12-27

    申请人: 张伟

    发明人: 张伟 胡大海 李超

    摘要: 本发明公开了一种脂肪干细胞外泌体的无菌胶原液,由脂肪干细胞外泌体和无菌胶原液组成,每毫升无菌胶原液中含有0.5-0.8mg外泌体。其制备方法为:在无菌环境下,将脂肪干细胞外泌体和无菌胶原液混合并搅拌均匀,低温保存即可。本发明还公开了脂肪干细胞外泌体的无菌胶原液贴敷的制备方法,无菌条件下将脂肪干细胞外泌体的无菌胶原液压合在两块无纺布中间,再装入铝箔袋中封口低温保存即可。本发明通过将脂肪干细胞外泌体和无菌胶原液相结合制得脂肪干细胞外泌体的无菌胶原液,能够充分发挥两者的作用,对皮肤损伤修复以及创面修复有更好的治疗效果,且能够缩短创面愈合时间。