大鼠网膜脂肪组织炎症通路关键因子表达水平的测定方法

    公开(公告)号:CN105506119A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201610012152.2

    申请日:2016-01-08

    申请人: 张君

    IPC分类号: C12Q1/68

    CPC分类号: C12Q1/6883 C12Q2600/158

    摘要: 本发明公开了一种大鼠网膜脂肪组织炎症通路关键因子表达水平的测定方法,包括:两组大鼠均分笼喂养,对照组饲以基础饲料,实验组饲以高脂饲料;用已高压的手术器械采集大鼠网膜脂肪组织,3cm×3cm置于5ml冻存管内,标记时间、编号及分组信息,置于液氮速冻,-80℃保存;称取100mg左右实验脂肪组织样品,并至于液氮预冷的研钵中低温下研磨至粉状,Trizol法提取总RNA,反转录为cDNA,检测KLF4、KLF7及NF-кB炎症信号通路关键因子mRNA表达水平。

    一种大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化方法

    公开(公告)号:CN105779387A

    公开(公告)日:2016-07-20

    申请号:CN201610305315.6

    申请日:2016-05-10

    申请人: 张君

    IPC分类号: C12N5/0775 C12N5/077

    摘要: 本发明公开了一种大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化方法,包括:选择第3代骨髓间充质干细胞,按1×106mL?1浓度接种于细胞培养瓶内,待细胞贴壁生长至细胞密度达80%时,加入不同浓度油酸作为诱导剂;以基础培养基DMEM添加体积比例为10%的胎牛血清,分别添加25mM、50mM、100mM和200mM油酸四种浓度为成脂肪细胞的诱导培养基;每三天换液一次,以未加诱导培养液的细胞培养瓶作为对照,3周后油红0染色检测。本发明用不同浓度油酸可直接诱导出脂肪细胞,建立了新的诱导方法,此方法配置更加简单,诱导速度快,诱导率高。另可用于诱导不同大小脂肪细胞,研究不同大小脂肪细胞功能的差异。