公开(公告)号：CN115073613A

公开(公告)日：2022-09-20

申请号：CN202210747717.7

申请日：2022-06-28

申请人： 扬州大学

发明人： 李燕华 ,  丁婧婧 ,  李晨曦 ,  姜道远 ,  周弇扬

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543

摘要： 本发明涉及一种融合蛋白GLuc‑p30及其制备方法和应用，以非洲猪瘟的p30蛋白为诊断抗原，建立了一种基于荧光素酶免疫沉淀系统的非洲猪瘟抗体检测方法，该方法通过DNA转染真核细胞制备荧光素酶与p30的融合抗原，将该抗原分泌到细胞外，融合抗原与血清样本中的非洲猪瘟抗体结合后，被金黄色葡萄球菌A蛋白偶联的磁珠捕获，经荧光素酶试验检测与磁珠特异性结合的融合抗原；本发明使用的真核细胞表达的病毒抗原含有磷酸化等翻译后修饰，与感染情况下表达的病毒蛋白更相近，且无需纯化，简化了抗原的准备过程；与现有的间接ELISA相比，本发明的检测方法具有更好的检测的灵敏性和特异性；本发明检测方法具有简单、敏感、特异、价廉等优点，可以满足大规模检测的要求。

公开(公告)号：CN116063563A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202211203262.9

申请日：2022-09-29

申请人： 扬州大学

发明人： 李燕华 ,  姜道远 ,  丁婧婧 ,  李晨曦 ,  周弇扬

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N9/02 ,  C12N15/867 ,  G01N33/569 ,  G01N33/535 ,  G01N33/68

摘要： 本发明提供一种融合抗原GLuc‑p30及其制备方法、试剂盒和检测方法，所述试剂盒包括：包被金黄色葡萄球菌A蛋白的酶标反应板、荧光素酶、融合抗原，非洲猪瘟抗体阳性血清，非洲猪瘟抗体阴性血清，荧光素酶底物、洗涤液，本发明通过慢病毒转导建立的稳定细胞株表达GLuc‑p30融合抗原，无需纯化，简化了抗原的准备过程，可以有效地检测样品中非洲猪瘟抗体，与符合国家标准非洲猪瘟抗体检测试剂盒的符合率达99％以上且有更好的检测灵敏性和特异性，具有广阔的市场前景和良好的经济、社会效益。