镰孢菌RPA-CRISPR/Cas检测试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN116926235B

    公开(公告)日:2023-12-05

    申请号:CN202311198272.2

    申请日:2023-09-18

    摘要: 本发明提供了“镰孢菌RPA‑CRISPR/Cas检测试剂盒和方法”,属于分子检测技术,其中Cas蛋白为Cas12,所述试剂盒包括RPA引物和crRNA,所述镰孢菌包括层出镰孢菌,层出镰孢菌的RPA引物和crRNA分别为引物组合FproF2/FproR3、Fp‑crRNA2;本发明针对分布广、分离频率高、致病性强的玉米茎腐病病原菌,开发基于重组酶聚合酶扩增技术结合CRISPR/Cas12a的玉米茎腐病病原菌现场可视化快速检测技术,该技术可在37‑42℃恒温条件下进行反应,无需复杂的仪器设备,CRISPR/Cas12a可识别并切割特定核酸序列,从而在RPA基础上进一步增加了检测的特异性和灵敏度。(56)对比文件代玥 等. 多重PCR技术检测4种大豆镰孢菌根腐病病原《.中国油料作物学报》.2021,第43卷(第2期),第307-313页.