公开(公告)号：CN106282241A

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201610637401.7

申请日：2016-08-05

申请人： 无锡市第二人民医院

发明人： 姜宇 ,  朱国兴 ,  仲兆民 ,  杨健 ,  易利华 ,  徐又佳

IPC分类号： C12N15/89 ,  A01K67/027

CPC分类号： C12N15/89 ,  A01K67/0276 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/03 ,  C07K14/461

摘要： 本发明公开了通过CRISPR/Cas9得到敲除bmp2a基因的斑马鱼的方法，设计了新的gRNA序列，设计在BMP2a第一个外显子和内含子之间，gRNA序列为GGAGCCCATCACTAGACTCTTGG，酶切为HinfI。与传统敲除基因的技术相比，CRISPR/Cas9技术具有毒性小，准确性高，效率高，成功周期短等特点；所以理论上，使得BMP2a基因更快得被敲除。

公开(公告)号：CN107446922A

公开(公告)日：2017-12-08

申请号：CN201710654668.1

申请日：2017-08-03

申请人： 无锡市第二人民医院

发明人： 姜宇 ,  朱国兴 ,  施克勤 ,  徐又佳 ,  杨健 ,  易利华

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N5/10

摘要： 本发明主要涉及利用CRISPR/Cas9技术，设计独特的一段PAM区，使得成骨细胞中的hepcidin基因被完美敲除，又不“误伤”其他基因，形成世界上首株hepcidin敲除的成骨细胞（国内外均无报道）。作为首例hepcidin敲除转基因的人成骨细胞的意义重大，hepcidin是调控铁的主要因素，一旦被敲除，即造成铁过载的细胞株，可以排除人为因素干预，对于研究铁的表达研究意义重大，同时与传统敲除基因的技术相比，CRISPR/Cas9技术具有毒性小，准确性高，效率高，成功周期短等特点；使得hepcidin基因更快得被敲除。