检测食品中副溶血弧菌的RPA特异性引物及试剂盒与应用

    公开(公告)号:CN106967816B

    公开(公告)日:2020-01-17

    申请号:CN201710277777.6

    申请日:2017-04-25

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种检测食品中副溶血弧菌的RPA特异性引物及试剂盒与应用,属于生物技术领域。该RPA特异性引物的序列如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示,扩增内标的序列如SEQ ID No:8所示。本发明用时短:PCR反应通常耗时2~3个小时,RPA技术仅需要20min即可完成扩增。常温下即可扩增:只需要37℃下恒温反应即可,不需要特殊的热循环设备。结果易于判断,不像LAMP产物的弥散带,RPA仅需1对引物即可完成扩增,扩增产物根据引物设计位点具有特定大小的条带。含扩增内标,能指示RPA反应的假阴性。

    一步法微滴数字PCR定量检测果蔬中GII型诺如病毒的方法

    公开(公告)号:CN107338328B

    公开(公告)日:2020-04-14

    申请号:CN201710630764.2

    申请日:2017-07-28

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种一步法微滴数字PCR定量检测果蔬中GII型诺如病毒的方法。该方法利用RT‑ddPCR,结合用于RT‑qPCR检测GII型诺如病毒的引物和探针,进行反应,实现GII型诺如病毒的高灵敏快速检测。本方法灵敏度高,可达约2copies/μL,而常规的RT‑qPCR的灵敏度通常为10copies/μL左右;扩增效率高,扩增效率为95.4%,R2=0.9973。在低拷贝数下比RT‑qPCR更能有效规避果蔬中抑制物的影响,减少了假阴性的产生。因此,本发明检测方法灵敏、准确、直观,对农业部、检验检疫局等政府部门以及相关检测机构和企业提供了新的检测方法并具有指导意义。

    一步法微滴数字PCR定量检测果蔬中GII型诺如病毒的方法

    公开(公告)号:CN107338328A

    公开(公告)日:2017-11-10

    申请号:CN201710630764.2

    申请日:2017-07-28

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种一步法微滴数字PCR定量检测果蔬中GII型诺如病毒的方法。该方法利用RT-ddPCR,结合用于RT-qPCR检测GII型诺如病毒的引物和探针,进行反应,实现GII型诺如病毒的高灵敏快速检测。本方法灵敏度高,可达约2copies/μL,而常规的RT-qPCR的灵敏度通常为10copies/μL左右;扩增效率高,扩增效率为95.4%,R2=0.9973。在低拷贝数下比RT-qPCR更能有效规避果蔬中抑制物的影响,减少了假阴性的产生。因此,本发明检测方法灵敏、准确、直观,对农业部、检验检疫局等政府部门以及相关检测机构和企业提供了新的检测方法并具有指导意义。

    检测食品中副溶血弧菌的RPA特异性引物及试剂盒与应用

    公开(公告)号:CN106967816A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710277777.6

    申请日:2017-04-25

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种检测食品中副溶血弧菌的RPA特异性引物及试剂盒与应用,属于生物技术领域。该RPA特异性引物的序列如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示,扩增内标的序列如SEQ ID No:8所示。本发明用时短:PCR反应通常耗时2~3个小时,RPA技术仅需要20min即可完成扩增。常温下即可扩增:只需要37℃下恒温反应即可,不需要特殊的热循环设备。结果易于判断,不像LAMP产物的弥散带,RPA仅需1对引物即可完成扩增,扩增产物根据引物设计位点具有特定大小的条带。含扩增内标,能指示RPA反应的假阴性。

    转基因大豆GTS40-3-2及内外源基因的多重巢式荧光定量PCR检测引物组和方法

    公开(公告)号:CN104450946B

    公开(公告)日:2016-05-25

    申请号:CN201410843991.X

    申请日:2014-12-30

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种转基因大豆GTS40-3-2及内外源基因的多重巢式荧光定量PCR检测引物组和方法。本发明将多重PCR、巢式PCR、荧光定量PCR结合起来,对引物的设计进行了严格的控制,并对检测流程进行了改进,建立了一套多重巢式荧光定量PCR检测体系,该体系能够定量检测转基因大豆GTS40-3-2品系,以及常见外源基因NOS终止子、CP4-EPSPS、CaMV35S启动子和大豆内源基因Lectin,该方法灵敏度相比普通荧光定量PCR提高了1个数量级。本发明的方法具有模板需要量少,灵敏度高,通量高,特异性强等优点;能应用于转基因的快速定量检测,为快速、准确、高通量、定量检测转基因提供新方法。

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