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公开(公告)号：CN116064431A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211120009.7
申请日：2022-09-15
申请人： 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
摘要： 本发明公开了一种提高胃蛋白酶抗性的黄曲霉毒素氧化酶(AFO)及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型黄曲霉毒素氧化酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，筛选得到了一种提高胃蛋白酶抗性的突变体黄曲霉毒素氧化酶。本发明所述的作用于黄曲霉毒素(AFB1)的突变体黄曲霉毒素氧化酶(AFOP477N)对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型AFO延长了22％。突变体AFOP477N相比于野生型，在20～60℃时仍保有60％以上的活性；最适反应pH为6.0；在pH 7.0～8.0时保有40％以上的活性。
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公开(公告)号：CN115851633A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211120063.1
申请日：2022-09-15
申请人： 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
摘要： 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的黄曲霉毒素氧化酶(AFO)及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型黄曲霉毒素氧化酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，筛选得到了一种对胃蛋白酶抗性提高的突变体黄曲霉毒素氧化酶。本发明所述的作用于黄曲霉毒素(AFB1)的突变体黄曲霉毒素氧化酶(AFOG355I/G475V)对胃蛋白酶的抗性半衰期是野生型AFO的2.72倍。相比于野生型，突变体AFOG355I/G475V在10～40℃时保有40％以上的活性；最适反应pH为7.5。
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公开(公告)号：CN116004555A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202211120723.6
申请日：2022-09-15
申请人： 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
摘要： 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的黄曲霉毒素氧化酶(AFO)及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型黄曲霉毒素氧化酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，筛选得到了一种对胃蛋白酶抗性提高的突变体黄曲霉毒素氧化酶。本发明所述的作用于黄曲霉毒素(AFB1)的突变体黄曲霉毒素氧化酶(AFOG475M)对胃蛋白酶的抗性半衰期是野生型AFO的3.78倍。相比于野生型，突变体AFOG475M在10～40℃时保有40％以上的活性；最适反应pH为7.5；在pH5.0～8.0时保有40％以上的活性。
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公开(公告)号：CN113881654A
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202111050639.7
申请日：2021-09-08
申请人： 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
IPC分类号： C12N9/30 , C12N15/81 , A23K20/189 , A23L29/00
摘要： 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于米曲霉的α‑淀粉酶中制造多个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的酶，所述的氨基酸取代是第221和375位的氨基酸取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型α‑淀粉酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种获得对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶突变体，该酶对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型提高了2.54倍。突变型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性是野生型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性的1.42倍。突变型α‑淀粉酶的其他酶学性质与野生型α‑淀粉酶基本一致。
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公开(公告)号：CN113755468B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202111052143.3
申请日：2021-09-08
申请人： 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
摘要： 本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的玉米赤霉烯酮水解酶中制造单个氨基酸取代而产生的、对胰蛋白酶抗性更强的酶，所述的氨基酸取代是第262位的取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型玉米赤霉烯酮水解酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶突变体，该酶对胰蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了20.8％，其他酶学性质与野生型玉米赤霉烯酮水解酶基本一致。
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公开(公告)号：CN113881654B
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202111050639.7
申请日：2021-09-08
申请人： 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
IPC分类号： C12N9/30 , C12N15/81 , A23K20/189 , A23L29/00
摘要： 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于米曲霉的α‑淀粉酶中制造多个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的酶，所述的氨基酸取代是第221和375位的氨基酸取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型α‑淀粉酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种获得对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶突变体，该酶对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型提高了2.54倍。突变型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性是野生型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性的1.42倍。突变型α‑淀粉酶的其他酶学性质与野生型α‑淀粉酶基本一致。
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公开(公告)号：CN116064432A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211120018.6
申请日：2022-09-15
申请人： 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
摘要： 本发明公开了一种提高胃蛋白酶抗性的黄曲霉毒素氧化酶(AFO)及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型黄曲霉毒素氧化酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，筛选得到了一种提高胃蛋白酶抗性的突变体黄曲霉毒素氧化酶。本发明所述的作用于黄曲霉毒素(AFB1)的突变体黄曲霉毒素氧化酶(AFOP477S)对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型AFO延长了16％。相比于野生型，突变体AFOP477S在10～50℃时仍保有60％以上的活性；最适反应pH为7.5；在pH5.0～8.0时保有60％以上的活性。
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公开(公告)号：CN113755468A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202111052143.3
申请日：2021-09-08
申请人： 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
摘要： 本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的玉米赤霉烯酮水解酶中制造单个氨基酸取代而产生的、对胰蛋白酶抗性更强的酶，所述的氨基酸取代是第262位的取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型玉米赤霉烯酮水解酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶突变体，该酶对胰蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了20.8％，其他酶学性质与野生型玉米赤霉烯酮水解酶基本一致。
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公开(公告)号：CN113980932A
公开(公告)日：2022-01-28
申请号：CN202111231828.4
申请日：2021-10-22
申请人： 暨南大学 , 开平牵牛生化制药有限公司
摘要： 本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域，公开了一种定点突变的α‑葡萄糖苷酶。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α‑葡萄糖苷酶中制造两个氨基酸取代而产生的；所述的氨基酸取代是第120位和第215位的取代。本发明提供了所述的定点突变的α‑葡萄糖苷酶在制备2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸中的应用。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶能够降低合成AA‑2G时副产物AA‑6G的含量，且提高了AA‑2G产量，其他酶学性质与野生型酶基本一致。
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公开(公告)号：CN113980932B
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202111231828.4
申请日：2021-10-22
申请人： 暨南大学 , 开平牵牛生化制药有限公司
摘要： 本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域，公开了一种定点突变的α‑葡萄糖苷酶。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α‑葡萄糖苷酶中制造两个氨基酸取代而产生的；所述的氨基酸取代是第120位和第215位的取代。本发明提供了所述的定点突变的α‑葡萄糖苷酶在制备2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸中的应用。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶能够降低合成AA‑2G时副产物AA‑6G的含量，且提高了AA‑2G产量，其他酶学性质与野生型酶基本一致。
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