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公开(公告)号：CN101565760A
公开(公告)日：2009-10-28
申请号：CN200910062399.5
申请日：2009-06-02
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测牛副流行性感冒3型病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)RNA抽提液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物和TaqMan探针、f)标准阳性DNA模板、g)荧光定量PCR反应液，其特征是引物序列分别为正义引物和反义引物：扩增子大小为129bp，荧光探针序列，探针的5’端标记荧光发射基团FAM，3’端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入牛副流行性感冒3型病毒保守的F蛋白编码区188bp片段的pGEM－T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释，结果更加准确、可靠、稳定、且重复性好。也可以进行牛流行性感冒的流行病学调查，还可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
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公开(公告)号：CN101565759A
公开(公告)日：2009-10-28
申请号：CN200910062398.0
申请日：2009-06-02
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测牛细小病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)DNA提取试剂，b)热启动Taq DNA聚合酶，c)引物和TaqMan探针，d)标准阳性DNA模板，e)PCR荧光定量反应液，其特征是：引物序列为正义引物：5′－CCAGTACCAGGAAACGGAGAC－3′，反义引物：5′－GCATGTATTCCGGTCTCCAA－3′，扩增子大小为118bp，荧光探针序列为：5′－FAM－CCTCAACATCTACGTCACCGGACAA－TAMRA－3′，探针的5’端标记荧光发射基团FAM，靠近3’端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入细小病毒VP3蛋白编码区118bp片段的pGEM－T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒制备，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。荧光定量PCR试剂盒在奶牛感染细小病毒流行病学调查中的应用，高效方便地对血清制品中的牛细小病毒污染进行实时监控，广泛适用于该病毒感染的流行病学调查。
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公开(公告)号：CN101565758B
公开(公告)日：2011-08-24
申请号：CN200910062397.6
申请日：2009-06-02
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测狂犬病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)RNA抽提液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物和TaqMan探针、f)标准阳性DNA模板、g)PCR荧光定量反应液，其特征是：引物序列分别为正义引物：5′-TAGGATGCTATATGGGTCAAGTCAGA-3′，反义引物：5′-TTCAAATGTCCCTTTCCCGAAGAA-3′，扩增子大小为125bp，荧光探针序列为：5′-FAM-CAACGGTTATTGCTGCATGTGCTCCTCA-TAMRA-3′，探针的5’端标记荧光发射基团FAM，3’端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入狂犬病毒N蛋白区391bp片段的pGEM-T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。高效方便地对血清制品中的狂犬病毒的污染进行实时监控，还能为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
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公开(公告)号：CN101560572B
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN200910062094.4
申请日：2009-05-15
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测牛腹泻病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)RNA抽提液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物和TaqMan探针、f)标准阳性DNA模板、g)荧光定量PCR反应液，其特征在于：正义引物、反义引物、荧光探针序列，探针的5’端标记荧光发射基团FAM，3’端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入牛腹泻病毒5’-UTR区185bp片段的pGEM-T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。试剂盒的制备步骤：A.标本及标准品处理；B.两步法RT-PCR扩增及实时荧光检测；荧光定量PCR试剂盒在定量检测抗牛腹泻病毒药物中的应用。使定量结果更加准确、可靠、稳定、且重复性好。
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公开(公告)号：CN101565758A
公开(公告)日：2009-10-28
申请号：CN200910062397.6
申请日：2009-06-02
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测狂犬病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)RNA抽提液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物和TaqMan探针、f)标准阳性DNA模板、g)PCR荧光定量反应液，其特征是：引物序列分别为正义引物：5′－TAGGATGCTATATGGGTCAAGTCAGA－3′，反义引物：5′－TTCAAATGTCCCTTTCCCGAAGAA－3′，扩增子大小为125bp，荧光探针序列为：5′－FAM－CAACGGTTATTG CTGCATGTGCTCCTCA－TAMRA－3′，探针的5’端标记荧光发射基团FAM，3’端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入狂犬病毒N蛋白区391bp片段的pGEM－T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。高效方便地对血清制品中的狂犬病毒的污染进行实时监控，还能为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
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公开(公告)号：CN104099288B
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201410341070.3
申请日：2014-07-17
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
发明人： 张国荣
IPC分类号： C12N5/07
摘要： 本发明提供了一种新生牛血清的生产工艺，包括以下步骤：选取原料血清，入库保存；将原料血清移入融化间进行融化，然后保存；采用纯化水对原料血清包装袋进行清洗后，再采用注射用水清洗，最后在酒精中浸泡消毒；将消毒后的原料血清包装袋进行无菌剪口，粗滤；将粗滤后的血清进行澄清过滤，速冻，保存；将速冻后的血清注入灭菌后的混合罐中，在混合罐中进行搅拌；将搅拌后的血清注入筒式过滤器中进行除菌过滤，除菌过滤后的血清通过过渡罐进入自动灌装线进行分装；将分装后的血清进行抽样检验，对检查合格后的产品进行包装。该工艺能够彻底实现杜绝支原体及病菌的污染，完全满足对牛血清的使用要求。
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公开(公告)号：CN101560573B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN200910062095.9
申请日：2009-05-15
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测牛腺病毒3型的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)DNA提取试剂，b)热启动Taq DNA聚合酶，c)引物和TaqMan探针，d)标准阳性DNA模板，e)PCR荧光定量反应液，其特征是：引物序列分别为正义引物：5′-CCTGAATTCTCTTGCAGCCAGA-3′，反义引物：5′-CCTACCGAACCGACGCAGAT-3′，扩增子大小为100bp，荧光探针序列为：5′-FAM-TGAGAAGGTACTCCTCGTCGCTGGACCA-TAMRA-3′，探针的5′端标记荧光发射基团FAM，靠近3′端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入腺病毒3型pol蛋白100bp片段的pGEM-T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒制备，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。高效方便地对血清制品中的牛腺病毒3型污染进行实时监控，可广泛用于该病毒感染的流行病学调查，还能为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
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公开(公告)号：CN101565759B
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN200910062398.0
申请日：2009-06-02
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测牛细小病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)DNA提取试剂，b)热启动Taq DNA聚合酶，c)引物和TaqMan探针，d)标准阳性DNA模板，e)PCR荧光定量反应液，其特征是：引物序列为正义引物：5′-CCAGTACCAGGAAACGGAGAC-3′，反义引物：5′-GCATGTATTCCGGTCTCCAA-3′，扩增子大小为118bp，荧光探针序列为：5′-FAM-CCTCAACATCTACGTCACCGGACAA-TAMRA-3′，探针的5’端标记荧光发射基团FAM，靠近3’端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入细小病毒VP3蛋白编码区118bp片段的pGEM-T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒制备，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。荧光定量PCR试剂盒在奶牛感染细小病毒流行病学调查中的应用，高效方便地对血清制品中的牛细小病毒污染进行实时监控，广泛适用于该病毒感染的流行病学调查。
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公开(公告)号：CN101565757B
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN200910062396.1
申请日：2009-06-02
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测呼肠孤病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)RNA抽提液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物和TaqMan探针、f)标准阳性DNA模板、g)PCR荧光定量反应液，其特征是：引物序列分别为正义引物：5′-TGCGCCTATCCTTGAGTTGA-3′，反义引物：5′-TTGCCAGGAAATACGGGTCT-3′，扩增子大小为138bp，荧光探针序列为：5′-FAM-TCAAAATGGTGGACTTCAGTTTCGATTT-TAMRA-3′，探针的5’端标记荧光发射基团FAM，3’端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入呼肠孤病毒S1蛋白区361bp片段的pGEM-T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。高效方便地对血清制品中的呼肠孤病毒的污染进行实时监控，可广泛用于该病毒感染的流行病学调查，还能为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
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公开(公告)号：CN101565757A
公开(公告)日：2009-10-28
申请号：CN200910062396.1
申请日：2009-06-02
申请人： 武汉三利生物技术有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测呼肠孤病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)RNA抽提液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物和TaqMan探针、f)标准阳性DNA模板、g)PCR荧光定量反应液，其特征是：引物序列分别为正义引物：5′－TGCGCCTATCCTTGAGTTGA－3′，反义引物：5′－TTGCCAGGAAATACGGGTCT－3′，扩增子大小为138bp，荧光探针序列为：5′－FAM－TCAAAATGGTGGAC TTCAGTTTCGATTT－TAMRA－3′，探针的5’端标记荧光发射基团FAM，3’端标记荧光淬灭基团TAMRA，标准阳性DNA模板由已插入呼肠孤病毒S1蛋白区361bp片段的pGEM－T载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。高效方便地对血清制品中的呼肠孤病毒的污染进行实时监控，可广泛用于该病毒感染的流行病学调查，还能为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
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