应用生物反应器工业化生产动物流感疫苗的方法

    公开(公告)号:CN102133398A

    公开(公告)日:2011-07-27

    申请号:CN201010282155.0

    申请日:2010-09-15

    摘要: 本发明涉及一种应用生物反应器工业化生产动物流感疫苗的方法,该方法包括如下步骤:(1)Vero或MDCK细胞接入经灭菌的含微载体的生物反应器,在含血清培养基中进行培养;(2)将生物反应器内含血清培养基置换为含胰酶的无血清培养基;(3)接种动物流感病毒继续培养;(4)待细胞病变达到80%以上时,收获得到细胞培养的流感病毒原液;(5)将流感病毒原液经超滤浓缩、灭活、添加佐剂制得流感灭活疫苗。本发明具有工艺参数可控,细胞密度高,病毒效价高,生产效率高,劳动强度低等优点。本发明生产的流感疫苗安全性好,质量稳定可靠,副反应减小,免疫效力高,对流感野毒攻击具有较好的免疫保护作用。

    一种测定杆状病毒滴度的方法

    公开(公告)号:CN103364560A

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201310309787.5

    申请日:2013-07-23

    IPC分类号: G01N33/577 G01N33/569

    摘要: 本发明公开了一种测定杆状病毒滴度的方法,该方法包括如下步骤:将对数生长期的昆虫细胞以2×104~4×104/0.1mL/孔的细胞密度铺到细胞培养板中,置培养箱中培养使昆虫细胞贴于孔底;将被检的杆状病毒接种到昆虫细胞板中于培养箱中培养;弃去细胞板内培养基,固定,洗细胞板,加入gp64单抗孵育,洗细胞板,再加入羊抗鼠荧光抗体孵育,洗细胞板,荧光显微镜下观察;计算病毒的TCID50。本发明测定杆状病毒滴度的方法结合了间接免疫荧光,是一种直接判定各孔细胞是否感染的TCID50测定方法,重复性好,得到的检测结果更为准确,不需要结合细胞病变来进行判断,没有主观和经验因素的影响。

    一种提高禽流感抗原利用率的方法

    公开(公告)号:CN103357004B

    公开(公告)日:2014-10-01

    申请号:CN201310310020.4

    申请日:2013-07-23

    IPC分类号: A61K39/145 A61P31/16

    摘要: 本发明公开了一种提高禽流感抗原利用率的方法,涉及动物疫苗制备工艺。提高禽流感抗原利用率的方法,包括如下步骤:收集通过传代细胞培养禽流感病毒制备禽流感抗原或昆虫杆状病毒表达系统制备禽流感抗原所剩余的细胞;破碎收集的细胞,使细胞膜碎裂成类似禽流感病毒大小的细胞碎片,离心弃去未碎裂或碎裂不完全的细胞沉淀,获得表面嵌有禽流感免疫原性蛋白的细胞碎片,以此细胞碎片作为抗原制备疫苗或将此细胞碎片与禽流感抗原混合制备疫苗。本发明利用了禽流感抗原常规生产中废弃的细胞制备抗原,提高抗原的利用率,与单独使用常规生产中的上清做抗原相比产量得到了提高,是经济的禽流感抗原制备方法。