一种检测血清3型鸭甲型肝炎病毒抗体的间接ELISA方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN104215762B

    公开(公告)日:2016-07-06

    申请号:CN201410507423.2

    申请日:2014-09-28

    IPC分类号: G01N33/576

    摘要: 本发明公开了一种检测血清3型鸭甲型肝炎病毒抗体的间接ELISA方法及试剂盒,属于血清抗体检测技术领域。该间接ELISA方法以血清3型鸭甲型肝炎病毒VP1蛋白作为包被抗原,包被量为每孔0.1~1μg;HRP-小鼠抗鸭IgY作为酶标二抗,其使用浓度为0.2~2μg/mL;显色的时间为10分钟。该试剂盒包含VP1蛋白抗原包被板、HRP-小鼠抗鸭IgY、样品稀释液、洗涤液、TMB底物溶液A、B和终止液。本发明方法与试剂盒可用于鸭血清和鸭蛋卵黄中血清3型鸭甲型肝炎病毒抗体的检测,不与其他病毒的阳性血清产生交叉反应;相对于传统的中和反应检测方法,具有便捷、准确的优势。

    一种测定杆状病毒滴度的方法

    公开(公告)号:CN103364560A

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201310309787.5

    申请日:2013-07-23

    IPC分类号: G01N33/577 G01N33/569

    摘要: 本发明公开了一种测定杆状病毒滴度的方法,该方法包括如下步骤:将对数生长期的昆虫细胞以2×104~4×104/0.1mL/孔的细胞密度铺到细胞培养板中,置培养箱中培养使昆虫细胞贴于孔底;将被检的杆状病毒接种到昆虫细胞板中于培养箱中培养;弃去细胞板内培养基,固定,洗细胞板,加入gp64单抗孵育,洗细胞板,再加入羊抗鼠荧光抗体孵育,洗细胞板,荧光显微镜下观察;计算病毒的TCID50。本发明测定杆状病毒滴度的方法结合了间接免疫荧光,是一种直接判定各孔细胞是否感染的TCID50测定方法,重复性好,得到的检测结果更为准确,不需要结合细胞病变来进行判断,没有主观和经验因素的影响。

    一种用于检测PRV的荧光定量PCR试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN103509877B

    公开(公告)日:2015-09-02

    申请号:CN201210200972.6

    申请日:2012-06-18

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/68 G01N21/64

    摘要: 本发明涉及一种特异性检测猪伪狂犬病病毒(PRV)感染的荧光定量PCR快速检测试剂盒及其应用,所述试剂盒包括用于扩增猪伪狂犬病病毒gE基因保守区域的特异性引物对和特异性的TaqMan荧光标记探针,其中,所述特异性引物对的上游引物序列为5’-GAGGACGACGGGCTGTAC-3’,特异性引物对的下游引物序列为5’-GGACATCAACAGGCGGTTG-3’,所述TaqMan探针的序列为5’-TGGGTCCATTCGTCACTTCCG-3’,且TaqMan探针的5’端标记荧光报告基团FAM,3’端标记本身不发光的荧光淬灭基团BHQ1。本发明的试剂盒可用于快速定性定量检测PRV感染、鉴别检测PRV gE基因缺失疫苗毒株和/或PRV野毒株。

    一种提高禽流感抗原利用率的方法

    公开(公告)号:CN103357004A

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201310310020.4

    申请日:2013-07-23

    IPC分类号: A61K39/145 A61P31/16

    摘要: 本发明公开了一种提高禽流感抗原利用率的方法,涉及动物疫苗制备工艺。提高禽流感抗原利用率的方法,包括如下步骤:收集通过传代细胞培养禽流感病毒制备禽流感抗原或昆虫杆状病毒表达系统制备禽流感抗原所剩余的细胞;破碎收集的细胞,使细胞膜碎裂成类似禽流感病毒大小的细胞碎片,离心弃去未碎裂或碎裂不完全的细胞沉淀,获得表面嵌有禽流感免疫原性蛋白的细胞碎片,以此细胞碎片作为抗原制备疫苗或将此细胞碎片与禽流感抗原混合制备疫苗。本发明利用了禽流感抗原常规生产中废弃的细胞制备抗原,提高抗原的利用率,与单独使用常规生产中的上清做抗原相比产量得到了提高,是经济的禽流感抗原制备方法。