公开(公告)号：CN106868155B

公开(公告)日：2020-03-10

申请号：CN201710154441.0

申请日：2017-03-15

Applicant: 武汉大学

Inventor： 周翔 ,  刘奕侬 ,  王少儒 ,  田沺 ,  张小娥 ,  黄俊捷 ,  杨伊文 ,  朱子睿

IPC: C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种利用核酸外切酶反应产生引物结合树枝状滚环扩增可视化检测miRNA的方法。本发明方法包含三部分，第一部分引物的产生，发卡探针I被靶标miRNA打开后，被核酸外切酶I降解单链部分，而后核糖核酸酶H降解DNA：RNA杂合链中的RNA，留下一段短链DNA；第二部分是树状滚环扩增，上一步产生的单链DNA连接长单链DNA探针成环作为模板，然后以该单链DNA为引物进行一级滚环扩增，在滚环扩增体系中引入的发卡茎环结构II，被一级滚环扩增产物打开，从而多级树枝状滚环扩增；第三部分是根据滚环扩增产物中含有的G‑四链体进行检测。本发明是一种灵敏、经济、方便、原位的可视化检测miRNA的方法。

公开(公告)号：CN106868155A

公开(公告)日：2017-06-20

申请号：CN201710154441.0

申请日：2017-03-15

Applicant: 武汉大学

Inventor： 周翔 ,  刘奕侬 ,  王少儒 ,  田沺 ,  张小娥 ,  黄俊捷 ,  杨伊文 ,  朱子睿

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种利用核酸外切酶反应产生引物结合树枝状滚环扩增可视化检测miRNA的方法。本发明方法包含三部分，第一部分引物的产生，发卡探针I被靶标miRNA打开后，被核酸外切酶I降解单链部分，而后核糖核酸酶 H降解DNA：RNA杂合链中的RNA，留下一段短链DNA；第二部分是树状滚环扩增，上一步产生的单链DNA连接长单链DNA探针成环作为模板，然后以该单链DNA为引物进行一级滚环扩增，在滚环扩增体系中引入的发卡茎环结构II，被一级滚环扩增产物打开，从而多级树枝状滚环扩增；第三部分是根据滚环扩增产物中含有的G‑四链体进行检测。本发明是一种灵敏、经济、方便、原位的可视化检测miRNA的方法。

公开(公告)号：CN113355804B

公开(公告)日：2023-03-24

申请号：CN202110814569.1

申请日：2021-07-19

Applicant: 武汉大学

Inventor： 王彦峰 ,  张诗辰 ,  杨伊文 ,  卞晓恩 ,  夏天 ,  陈祖涵 ,  段博

IPC: D04H1/728 ,  D01D5/00 ,  D01F4/00 ,  D01F1/10 ,  A61L27/20 ,  A61L27/22 ,  A61L27/50 ,  A61L27/54 ,  A61L27/56

Abstract: 本发明属于复合纤维膜技术领域。本发明提供了一种具有生物响应性的复合纳米纤维膜，由包含如下质量份的原料制备得到：季铵化甲壳素35～55份；丝素蛋白60～90份；交联剂4～8份；抗菌剂0.5～5份。本发明还提供了一种复合纳米纤维膜的制备方法及其应用。本发明的复合纳米纤维膜具有长效显著的消炎抗菌作用，对于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制率均在98.5％以上；能够促进创面快速愈合，尤其适合消化系统的创面，在不同消化液环境中表现出不同的降解性，对消化液具有良好的生物响应性。

公开(公告)号：CN106834508A

公开(公告)日：2017-06-13

申请号：CN201710162311.1

申请日：2017-03-17

Applicant: 武汉大学

Inventor： 周翔 ,  刘奕侬 ,  王少儒 ,  田沺 ,  张小娥 ,  黄俊捷 ,  杨伊文

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/682 ,  C12Q2525/207 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2533/107

Abstract: 本发明公开了一种连接反应引发的超分支滚环扩增检测miRNA的方法，属于分子生物学和核酸化学领域。本发明方法主要由三部分组成；第一部分是5'端磷酸化的锁式探针的两末端与靶标miRNA互补配对后利用SplintR连接酶连接成环；第二部分是超分支滚环扩增，锁式探针成环后作为模板、靶标miRNA作为引物，在phi29 DNA聚合酶的作用下发生线性滚环扩增，通过引入二级引物，使线性滚环扩增沿着支链方向发展，达到信号进一步放大；第三部分是往滚环扩增产物中加入SYBR GREEN I染料进行检测。本发明操作简单、成本较低、体系单一、灵敏度高、无背景荧光信号干扰，适于复杂生物环境中miRNA的检测。

公开(公告)号：CN113355804A

公开(公告)日：2021-09-07

申请号：CN202110814569.1

申请日：2021-07-19

Applicant: 武汉大学

Inventor： 王彦峰 ,  张诗辰 ,  杨伊文 ,  卞晓恩 ,  夏天 ,  陈祖涵 ,  段博

IPC: D04H1/728 ,  D01D5/00 ,  D01F4/00 ,  D01F1/10 ,  A61L27/20 ,  A61L27/22 ,  A61L27/50 ,  A61L27/54 ,  A61L27/56

Abstract: 本发明属于复合纤维膜技术领域。本发明提供了一种具有生物响应性的复合纳米纤维膜，由包含如下质量份的原料制备得到：季铵化甲壳素35～55份；丝素蛋白60～90份；交联剂4～8份；抗菌剂0.5～5份。本发明还提供了一种复合纳米纤维膜的制备方法及其应用。本发明的复合纳米纤维膜具有长效显著的消炎抗菌作用，对于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制率均在98.5％以上；能够促进创面快速愈合，尤其适合消化系统的创面，在不同消化液环境中表现出不同的降解性，对消化液具有良好的生物响应性。