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公开(公告)号：CN114075556B
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202111395664.9
申请日：2021-11-18
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种可羟基化维生素D3C‑1和C‑25的P450酶及其基因、表达载体、重组菌与应用，本发明的P450维生素D3羟化酶CYP109A2‑H和重组菌及应用，与现有技术相比，本发明的P450维生素D3羟化酶CYP109A2‑H，经与已报道来源于DSM319的CYP109A2氨基酸序列比对，同源性为95.53％；本发明的P450酶能够在枯草芽孢杆菌中高效表达，且重组菌能够在37℃转化维生素D3为25(OH)VD3和1α，25(OH)2VD3，转化率达87.64％，25(OH)VD3和1α，25(OH)2VD3产量分别为7.78mg/L和10.62mg/L，产物中1α，25(OH)2VD3产量高于25(OH)VD3，产物的生物活性高，对于活性羟基维生素D3的生产具有重要作用。
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公开(公告)号：CN114350629B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202210101216.1
申请日：2022-01-27
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及一种维生素D3 C‑25位P450羟化酶及其基因、表达载体、菌株及应用，属于酶工程技术和基因工程技术领域。维生素D3 C‑25位P450羟化酶CYP109E1‑H的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，并将基因cyp109E1‑H插入pMA5质粒中，以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主构建菌株，实现了维生素D3 C‑25位P450羟化酶CYP109E1‑H的异源表达，且成功实现了对维生素D3的高效转化，同时专一性高，减少反应副产物，降低了生产成本，为其进一步的工业化应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN114075556A
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202111395664.9
申请日：2021-11-18
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种可羟基化维生素D3C‑1和C‑25的P450酶及其基因、表达载体、重组菌与应用，本发明的P450维生素D3羟化酶CYP109A2‑H和重组菌及应用，与现有技术相比，本发明的P450维生素D3羟化酶CYP109A2‑H，经与已报道来源于DSM319的CYP109A2氨基酸序列比对，同源性为95.53％；本发明的P450酶能够在枯草芽孢杆菌中高效表达，且重组菌能够在37℃转化维生素D3为25(OH)VD3和1α，25(OH)2VD3，转化率达87.64％，25(OH)VD3和1α，25(OH)2VD3产量分别为7.78mg/L和10.62mg/L，产物中1α，25(OH)2VD3产量高于25(OH)VD3，产物的生物活性高，对于活性羟基维生素D3的生产具有重要作用。
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公开(公告)号：CN114350629A
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202210101216.1
申请日：2022-01-27
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及一种维生素D3 C‑25位P450羟化酶及其基因、表达载体、菌株及应用，属于酶工程技术和基因工程技术领域。维生素D3 C‑25位P450羟化酶CYP109E1‑H的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，并将基因cyp109E1‑H插入pMA5质粒中，以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主构建菌株，实现了维生素D3 C‑25位P450羟化酶CYP109E1‑H的异源表达，且成功实现了对维生素D3的高效转化，同时专一性高，减少反应副产物，降低了生产成本，为其进一步的工业化应用奠定基础。
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