一种调控细胞形态改善聚乳酸生产性能的策略

    公开(公告)号:CN110724657B

    公开(公告)日:2022-01-11

    申请号:CN201911035041.3

    申请日:2019-10-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种调控细胞形态改善聚乳酸生产性能的策略,属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段,利用细胞分裂抑制剂,抑制细胞分裂,达到提高细胞的体积和比表面积,便于胞内产品的积累。通过引入靶向细胞分裂抑制剂的调控线路,扩大了细胞的体积,使得聚乳酸胞内积累变多。通过本发明生产的聚乳酸含量达到53.8w%,干重达到27.2g/L。

    一种启动子组合控制的动态调控系统

    公开(公告)号:CN109576199B

    公开(公告)日:2020-09-04

    申请号:CN201811493330.3

    申请日:2018-12-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种启动子组合控制的动态调控系统,具体公开了一种启动子组合控制的涉及动态调控系统及其在莽草酸生产中的应用,属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段,筛选出两类转录特征完全不同的启动子,即生长期关联启动子和稳定期启动子。利用蛋白酶特异性识别切割特定短肽的性质,设计构建出不需要借助人为控制和外源添加诱导剂的蛋白丰度调控系统。通过在工程大肠杆菌中引入靶向莽草酸激酶的动态调控基因线路,实现了在无机盐培养基中,不外源添加芳香族氨基酸和诱导剂生产莽草酸的能力。通过本发明生产的莽草酸产量可达21.2g/L,转化率达0.24g/g葡萄糖。

    一株固定CO2产苹果酸的大肠杆菌工程菌的构建及应用

    公开(公告)号:CN110951660A

    公开(公告)日:2020-04-03

    申请号:CN201911317890.8

    申请日:2019-12-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一株固定CO2产苹果酸的大肠杆菌工程菌的构建及应用,属于发酵领域。所述工程菌是对大肠杆菌Escherichia coli MG1655进行基因工程改造获得的菌;所述基因工程改造为敲除富马酸还原酶基因、富马酸酶基因、乳酸脱氢酶基因和乙醇脱氢酶基因,并游离过表达甲酸脱氢酶、乙酰辅酶A合成酶、酰化乙醛脱氢酶、甲醛裂合酶、二羟基丙酮激酶、苹果酸酶和亚磷酸氧化还原酶,获得菌株GH0407。上述菌株用于发酵生产苹果酸,以CO2和葡萄糖作为共底物厌氧发酵72h,苹果酸产量达到39g/L,得率为1.53mol/mol,原始出发菌株不积累苹果酸。

    一种提高D-酪氨酸生产效率的方法

    公开(公告)号:CN110938580A

    公开(公告)日:2020-03-31

    申请号:CN201911363367.9

    申请日:2019-12-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高D-酪氨酸生产效率的方法,属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段构建了一株双质粒共表达的重组菌,同时实现三种酶的高效表达,将L-酪氨酸转化为D-酪氨酸,并通过偶联辅酶再生系统,将NADP+转化为NADPH,使得NADPH循环再生,转化能够高效进行。并通过优化全细胞转化条件,实现了D-酪氨酸的高效生产。通过本发明生产的D-酪氨酸产量可达8.4g/L,转化率达93%。

    一种蓝光控制的动态调控系统及其应用

    公开(公告)号:CN110438057A

    公开(公告)日:2019-11-12

    申请号:CN201910773912.5

    申请日:2019-08-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种蓝光控制的动态调控系统及其应用,具体公开了一种蓝光控制的动态调控系统及其在乙偶姻生产中的应用,属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段,选择了蓝光光敏蛋白,利用光敏蛋白特异性响应特定波长的光源特性和无需外源添加诱导剂的优势,通过在工程大肠杆菌中引入靶向FtsZ+FtsA的动态调控基因线路,实现了在无机盐培养基中生产乙偶姻。通过本发明生产的乙偶姻产量可达63g/L,转化率达0.57g/g葡萄糖。

    一种调节光滑球拟酵母抵御低pH胁迫的方法

    公开(公告)号:CN110184204A

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201910497267.9

    申请日:2019-06-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种调节光滑球拟酵母抵御低pH胁迫的方法,属于生物工程技术领域。本发明通过缺失或过量表达本源转录因子的编码基因CgRDS2来调节光滑球拟酵母抵御低pH胁迫的能力。结果表明,光滑球拟酵母缺失CgRDS2基因后,与出发菌株相比,在低pH胁迫条件下细胞浓度可降低32.6%,细胞存活率下降56.9%,胞内ATP含量降低33.5%,细胞膜通透性降低23.6%;过表达CgRDS2基因后,与出发菌株相比,菌株在低pH胁迫条件下,细胞浓度没有显著变化,细胞存活率提高17.6%,胞内ATP含量提高41.5%,细胞膜通透性增加18.8%。

    苹果酸酶重组菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN106591342B

    公开(公告)日:2019-05-10

    申请号:CN201611046752.7

    申请日:2016-11-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种苹果酸酶重组菌的构建方法,包括以下步骤:对NADP依赖型苹果酸酶基因进行突变,得到苹果酸酶突变基因;将苹果酸酶突变基因与载体连接,然后在宿主菌中重组表达,得到苹果酸酶重组菌;本发明同时还请求保护采用上述方法构建的苹果酸酶重组菌以及一种生产L‑苹果酸的方法,包括以下步骤:将上述苹果酸酶重组菌在发酵培养基中进行好氧发酵;当苹果酸酶重组菌生长至OD600为0.4‑0.8时,进行诱导,然后再进行微好氧发酵。本发明所获得的苹果酸酶重组菌具有较高的催化丙酮酸羧化反应的能力,可显著提高菌体生产苹果酸的能力。

    一种高产α-酮异戊酸的方法

    公开(公告)号:CN109371070A

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201811350903.7

    申请日:2018-11-14

    Abstract: 本发明公开了一种高产α-酮异戊酸的方法,属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段将来源于谷氨酸棒杆菌编码L-氨基酸氧化酶的基因与表达载体相连。将构建好的表达质粒导入E.coli BL21(DE3),通过卡那霉素抗性平板筛选获得重组的含L-氨基酸氧化酶工程菌。用于转化L缬氨酸生产α-酮异戊酸。通过控制温度和pH,金属离子、实现α-酮异戊酸的高效生产。在25℃、pH=8.0、菌体量30g/L,底物浓度65g/L的条件下。α-酮异戊酸的产量最高可达51g/L,转化率为79.1%。

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