一种高通量构建单克隆抗体表达载体的方法

    公开(公告)号:CN111378671B

    公开(公告)日:2024-06-28

    申请号:CN201811618124.0

    申请日:2018-12-28

    IPC分类号: C12N15/13 C12N15/85 C12N5/10

    摘要: 本发明涉及一种高通量构建单克隆抗体重组载体的方法以及该方法在高通量抗体发现中的应用,所述的方法包括以下步骤:分选抗原特异性单B细胞到高通量反应容器,并进行高通量逆转录;以获得的逆转录反应产物为模板,分别进行重链和轻链可变区的PCR扩增;将重链可变区克隆片段和轻链可变区克隆片段分别重组至表达载体中;所述的表达载体包含自杀基因ccdB。所述的高通量构建单克隆抗体重组载体的方法可极大地提高重组成功率,从而提高抗体发现的效率,缩短抗体发现时间。